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  • 简介:摘要目的探讨7腺病毒肺炎患儿的临床特征。方法回顾性分析2019年1月至2019年9月厦门市儿童医院收治的20例7腺病毒肺炎患儿的临床资料,对患儿的临床表现、实验室检查、肺部影像学资料、纤维支气管镜镜下表现、治疗方案及疗效等进行分析,并随访观察患儿预后情况。结果20例7腺病毒肺炎患儿均伴有发热、咳嗽,易出现呼吸困难;易引发肝功能异常、心肌损伤等合并症。20例患儿均有不同程度的乳酸脱氢酶(LDH)升高,重症患儿常合并降钙素原(PCT)升高。易混合其他病原体感染,其中以肺炎支原体感染居多,其次是流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、烟曲霉菌。胸部影像学检查可见肺实变不张,以左下肺、右下肺为主,合并患侧少量胸腔积液。部分患儿后期遗留支气管扩张或闭塞性细支气管炎;经纤维支气管镜检查主要表现为气道黏膜充血、水肿,部分出现黏液栓甚至塑型支气管炎形成。所有患儿经综合治疗后均病情好转出院。结论7腺病毒肺炎发病急,病情重,合并症多,病程长,缺乏特异性治疗,且易出现混合感染,导致病情迁延、反复,加大治疗难度,后期遗留后遗症概率高。适时行纤维支气管镜及肺泡灌洗治疗,对于疾病的诊断及治疗均有非常重要的意义。

  • 标签: 儿童 7型腺病毒肺炎 纤维支气管镜
  • 简介:摘要目的分析儿童重症7腺病毒肺炎临床特点及治疗结果,探讨儿童重症7腺病毒肺炎的治疗方法。方法回顾性分析2016年1月至2019年10月广州市妇女儿童医疗中心儿童重症监护病房收治的70例重症7腺病毒肺炎患儿的临床资料,描述性分析重症7腺病毒肺炎患儿的临床情况、治疗经过及结局。结果(1)70例重症7腺病毒肺炎患儿,男43例(61.4%),女27例(38.6%);0~12个月30例(42.9%),13~36个月28例(40.0%),>36个月12例(17.1%)。(2)入PICU前发病时间(11.87±7.10)d;入PICU 6 h内序贯器官功能衰竭评分为6.80±3.13;Murray肺损伤评分为2.49±1.15;P/F值(150.57±86.25)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。X线胸片受累程度达2个象限及以上的有64例(91.4%);所有患儿诊断脓毒症。(3)实验室检查:白细胞计数(7.6±5.5)×109/L,血小板计数(238.8±164.2)×109/L,C反应蛋白(39.4±37.2)mg/L。(4)治疗方案和结局:65例(92.9%)使用静脉丙种球蛋白;45例(64.3%)使用过激素;43例(61.4%)进行了纤维支气管镜探查或冲洗;21例(30.0%)进行了血液净化治疗;63例(90.0%)进行了无创或有创呼吸机治疗,其中20例(28.6%)患儿使用了高频呼吸机辅助通气;6例(8.6%)使用了肺泡表面活性物质;19例(27.1%)使用体外膜肺氧合治疗。呼吸机平均治疗时间(13.10±11.58)d;PICU中体温降至正常时间为(4.69±4.01)d;平均入住PICU时间(15.76±12.20)d;平均住院天数(27.04±13.10)d。16例患儿死亡,病死率22.9%。结论儿童重症7腺病毒肺炎病情危重、肺损伤显著,虽经体外膜肺氧合等积极治疗,仍具有较高的病死率。

  • 标签: 重症腺病毒肺炎 7型腺病毒 脓毒症 体外膜肺氧合
  • 简介:摘要目的探讨人腺病毒7(human adenovirus type 7,HAdV-7)感染对于炎症小体激活的影响及作用机制。方法采用免疫荧光检测HAdV-7对于THP-1分化的巨噬细胞的感染;应用ELISA方法检测HAdV-7感染对于IL-1β的激活;实时荧光定量PCR检测病毒感染对于NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1等mRNA表达的影响;蛋白质免疫印迹实验(western blot,WB)检测病毒感染后细胞内NLRP3、pro-IL-1β的表达及上清中caspase-1和IL-1β蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示HAdV-7可感染THP-1分化的巨噬细胞,WB显示HAdV-7感染诱导细胞内pro-IL-1β蛋白表达上调,ELISA检测表明HAdV-7感染可诱导IL-1β的分泌表达(MOI=0.5,P=0.0008)。使用Ac-YVDK-cmk抑制caspase-1表达后,HAdV-7感染上清中IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0025);HAdV-7感染caspase-1缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达同样被显著抑制(P=0.0191)。荧光定量PCR检测HAdV-7感染可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3 mRNA表达上调(NLRP3:P=0.0004;pro-IL-1β:P=0.0007),同时WB显示HAdV-7可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3蛋白表达上调;使用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞,可抑制HAdV-7感染的细胞上清中IL-1β的表达(P=0.0027); HAdV-7感染NLRP3缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0189)。分别使用TLR2、TLR4、TLR7/9信号传导抑制剂,抑制HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制TLR4信号传导,细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调(P=0.0122);使用ROS抑制剂、组织蛋白酶B抑制剂,或抑制K+外流,分别处理HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制组织蛋白酶B(P=0.0292),或抑制K+外流时(KCl, P=0.0022;Glibenclamide, P=0.0275),细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调。结论HAdV-7感染THP-1细胞激活NLRP3炎症小体,NLRP3炎症小体激活的第一信号通过Toll样受体4(TLR4)信号传导,第二信号主要通过半通道模型介导K+外流的和溶酶体破坏模型释放组织蛋白酶B的激活NLRP3炎症小体。

  • 标签: 人腺病毒7型 NLRP3炎症小体 IL-1β TLR4 组织蛋白酶B
  • 简介:腺病毒(Adeno)基因组为线状双链DNA,长度大约36kb.适合于容纳较大片段外源基因。与逆转录病毒载体相比,腺病毒载体能有效地将外源基因转染到各种靶细胞中。其宿主范围广,感染性强,尤其能感染分化后的非分裂期细胞。在Adeno生活周期中,其基因不整合到宿主细胞DNA中,故无插入突变激活癌基因的危险,外源基因能游离地表达。商品化的腺病毒载体一般剔除了其基因组的E1区,经体外重组后,产生可复制缺陷腺病毒

  • 标签: 逆转录病毒载体 腺病毒载体 外源基因转染 复制缺陷型腺病毒 双链DNA 纯化
  • 简介:摘要报道1例通过呼吸道标本宏基因组二代测序检测出人类腺病毒7阳性,且血清腺病毒IgA抗体阳性,同时应用咽拭子PCR法检测甲H1N1流感病毒核酸阳性,确诊为重症社区获得性肺炎(腺病毒7合并甲H1N1病毒)患者的诊治过程,结合文献复习总结该病的临床特点及诊治方法,以提高临床医生对该病的认识,改善患者的预后。

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  • 简介:腺病毒基因组约为35kb,分为7个血清,采用其中较为安全的血清2和5可作为载体。腺病毒做为载体有很多优点:它能感染广泛的细胞类型;能感染分裂细胞或不分裂细胞;腺病毒的疫苗已为人们使用.

  • 标签: 腺病毒载体 细胞类型 病毒基因组 血清型 感染 分裂
  • 作者: 朱云 张林琳 段亚丽 谢正德
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华预防医学杂志》 2022年第02期
  • 机构:国家儿童医学中心 国家呼吸系统临床医学研究中心 首都医科大学附属北京儿童医院 儿科重大疾病研究教育部重点实验室 中国医学科学院儿童危重感染诊治创新单元 儿童呼吸道感染性疾病研究北京市重点实验室 北京市儿科研究所感染与病毒研究室,北京 100045,国家儿童医学中心 首都医科大学附属北京儿童医院感染与病毒研究室,北京 100045
  • 简介:摘要目的原核表达人腺病毒(HAdV)7DNA结合蛋白(DBP),制备DBP蛋白多克隆抗体。方法合成HAdV-7 DBP基因并克隆至pET30a载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导进行原核表达。经镍离子金属螯合层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,使用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定该抗体效价;使用Western blotting方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测抗体特异性。以rDBP包被ELISA反应板使用间接ELISA对HAdV感染儿童急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体进行检测。结果成功构建HAdV-7 DBP原核表达载体,表达的重组DBP蛋白经镍柱亲和层析纯化后纯度>95%,间接ELISA方法测得制备的多克隆抗血清的抗体效价为1∶1 024 000,Western blotting方法和IFA方法显示该抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法检测HAdV感染儿童 急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体的阳性率分别为50.0%(19/38)和63.2%(24/38)。结论成功构建HAdV-7 DBP蛋白的原达表达载体,获得了HAdV-7DBP重组蛋白和高效价的兔多克隆抗体。

  • 标签: 人腺病毒7型 DNA结合蛋白 原核表达 多克隆抗体
  • 简介:摘要目的总结儿童人腺病毒7混合肺炎支原体感染肺炎的临床特征。方法选择2018年12月1日至2019年9月1日在武汉儿童医院确诊的36例人腺病毒7混合肺炎支原体感染肺炎儿童为研究对象(混合感染组),回顾性分析36例患儿的临床表现、实验室检查和影像学资料,并选取同期住院的94例单纯人腺病毒7感染肺炎患儿作为单纯感染组。采用t检验、非参数秩和检验及χ2检验进行比较分析。结果混合感染组患儿中,男25例,女11例,平均年龄3.11岁;主要临床表现为发热(97.2%)、咳嗽(100.0%),且多表现为高热,平均体温为40.0 ℃,热峰约4次/d,平均热程11 d;重症肺炎率高(86.1%),与单纯感染组(69.1%)比较差异有统计学意义(χ2=3.878,P<0.05);可合并心肌损害(55.5%)、心力衰竭(16.7%)、肝功能损害(25.0%)、消化道出血(5.5%)、中毒性脑病(11.0%)、噬血细胞综合征(16.7%)、闭塞性细支气管炎(50.0%)等并发症。细胞因子,如白细胞介素(IL)-6[237.84(108.59,606.36) ng/L]、IL-10[31.44(12.13,69.60) ng/L]、干扰素γ[(102.85±92.23) ng/L]均明显升高,其中IL-6、IL-10与单纯感染组[148.35(57.43,390.82);19.67(10.96,35.35)]比较升高更为明显,差异均有统计学意义(Z=-1.984、-2.077,均P<0.05)。混合感染组肺实变(50.0%)及胸腔积液(38.9%)均较常见,且胸腔积液发生率较单纯感染组(19.1%)明显升高,差异有统计学意义(χ2=5.594,P<0.05)。结论儿童腺病毒7混合肺炎支原体感染肺炎多为重症肺炎,可能与细胞因子风暴有关。

  • 标签: 人腺病毒7型 肺炎支原体 混合感染 细胞因子风暴 肺炎 儿童
  • 简介:目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定.结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.

  • 标签: 基因重组腺病毒载体 ATP7B WILSON病基因 293细胞 pcDNA3 BamHⅠ
  • 简介:腺病毒感染病是一种流行范围极广泛的潜在病原体感染所引起的急性传染病。实验表明,将病鸽与健康鸽放在一起,甚至将病鸽呕出的胃液注入健康鸽的嗉囊内也不一定使健康鸽发病,

  • 标签: 腺病毒 鸽子 防治 急性传染病 病原体感染 流行范围
  • 简介:目的:构建白细胞介素7(IL-7)和增强绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的重组腺病毒载体,为进一步感染干细胞奠定基础。方法:将目的基因IL-7克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质粒,继而在H293细胞中扩增,纯化后测定病毒滴度。结果:pShuttle-EGFP-mIL7重组穿梭质粒经酶切鉴定得到0.5kb和5.1kb2条带;pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体质粒经酶切鉴定得到14K、11.8K、3.1kb、2.66kb、2.47K、1.45K、0.6K7条带;TCID50法测定纯化后的病毒滴度为2×10^10pfu/ml。结论:pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体构建成功。

  • 标签: 白细胞介素7 增强型绿色荧光蛋白 重组腺病毒载体 构建
  • 简介:摘要目的建立免疫荧光检测牛腺病毒3(bovine adenovirus type 3, BAV-3)的方法,用于生物制品用牛源材料的检测。方法分别以牛鼻甲骨细胞、传代牛肾细胞、原代牛肾细胞培养BAV-3,筛选最适宜的敏感细胞培养BAV-3,纯化获得抗原后免疫BALB/c小鼠。采用杂交瘤抗体技术制备抗BAV-3单克隆抗体(单抗),亲和层析法纯化后用异硫氰酸荧光素标记。用制备的单抗建立直接免疫荧光法检测BAV-3,并对方法的特异性、灵敏度及中间精密度进行验证。结果用抗BAV-3单抗检测牛腹泻病毒、副流感病毒3、呼肠孤病毒、呼吸道合胞病毒、狂犬病毒、羊轮状病毒,均无交叉反应。采用该方法检测牛鼻甲骨细胞培养的BAV-3,3次传代可检出的最低病毒含量和标准差分别为0.10和0.05 CCID50。结论建立的免疫荧光检测BAV-3方法具有良好的特异性和较高的灵敏度、中间精密度,可用于BAV-3的常规检测。

  • 标签: 外源病毒 牛腺病毒3型 抗体,单克隆 免疫荧光试验
  • 简介:2.2腺病毒在我国流行的情况如何?同其他国家的流行趋势类似,我国腺病毒的肆虐时间也在上世纪50-60年代。1958年以来我国各地相继证实,腺病毒除引起上呼吸道感染外,还可引起小儿肺炎,6个月至2岁的婴幼儿腺病毒肺炎最为危重,尤以北方各省多见,病情严重者也较南方多。

  • 标签: 腺病毒肺炎 毒热 上呼吸道感染 流行趋势 小儿肺炎 婴幼儿
  • 简介:

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  • 简介:利用构建的犬2腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72~96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48~96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.

  • 标签: 犬2型腺病毒 E3区 表达载体
  • 简介:摘要目的探讨小儿腺病毒肺炎临床护理效果。方法选用2015年3月至2017年3月期间在我院的52例小儿腺病毒肺炎患儿为研究对象,分别用常规护理和针对性护理,对比两组患儿护理情况。结果两组患儿的优良率分别为96.15%和80.77%,干预后,两组家长焦虑、抑郁评分明显好于干预前,观察组好于对照组。结论通过对小儿腺病毒肺炎患儿实施针对性护理,患儿各项症状得到显著改善,缓解了家长焦虑、抑郁等症状,值得推广应用。

  • 标签: 小儿腺病毒肺炎 临床护理 护理分析
  • 简介:摘要人腺病毒(HAdV)是急性呼吸道感染、腹泻、急性眼角结膜炎等多种疾病的常见病原体。许多研究表明HAdV基因组易发生基因重组,进而形成新的基因型别,迄今已报道的104个型别中53~104为重组形成的新基因,在全球范围内引起多次疫情,对疾病的防控提出新挑战。目前对其重组研究较少,亟需深入研究以揭示重组机制及临床意义。

  • 标签: 人腺病毒 型别 重组
  • 简介:某肉鸡养殖场肉仔鸡发生了一起以心包积液、肝炎为主要特征的疫病,通过对病死鸡的临床症状和病理剖检观察、PCR检测、鸡胚接种试验等确诊为该鸡场发生了禽腺病毒的感染,通过采取系列治疗措施,疫情得到了控制。

  • 标签: 肉鸡 禽腺病毒 诊治