简介：无

简介：摘要：蛋白酶测定常用方法是茚三酮比色法，然而普通的茚三酮比色法测定氨基酸浓度的灵敏性不高，稳定性不好，从而影响了测定土壤蛋白酶活性的准确度，因此，本研究在前人研究的基础上，进行了茚三酮试剂的活化，改进了茚三酮比色法，达到了以更高的精度测量蛋白酶活性的目的。

简介：摘要目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、迁移诱导蛋白7（MIG-7）、细丝蛋白A（FLNa）在结肠癌组织中的表达及其对预后的影响。方法收集2013年1月至2015年12月南京医科大学附属淮安市第一人民医院899例结肠癌患者手术切除的肿瘤标本及其对应的癌旁正常组织。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定结肠癌组织与癌旁正常组织中MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa的表达水平，分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果结肠癌组织中MMP-2、MMP-9、MIG-7表达水平分别为（481±69）ng/ml、（262±85）ng/ml、（156±23）ng/ml，均高于癌旁正常组织[分别为（136±33）ng/ml、（191±21）ng/ml、（98±18）ng/ml]，差异均有统计学意义（t值分别为41.591、120.224、59.896，均P<0.01）；结肠癌组织中FLNa表达水平为（19.5±3.2）ng/ml，低于癌旁正常组织[（65.4± 8.3）ng/ml]，差异有统计学意义（t=154.902，P<0.05）。结肠癌组织中MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa表达水平与肿瘤长径、Dukes分期、淋巴结转移、分化程度均有关（均P<0.05）。多因素Cox回归分析结果显示，MMP-9高表达、MMP-2高表达、MIG-7高表达及FLNa低表达均是患者预后不良的独立影响因素（均P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，MMP-9、MMP-2、MIG-7低表达患者中位总生存期分别为55个月（95% CI 25~78个月）、56个月（95% CI 26~79个月）、54个月（95% CI 25~78个月），均长于高表达患者；而FLNa高表达患者中位总生存期为58个月（95%CI 27~80个月），长于低表达患者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论MMP-9、MMP-2、MIG-7、FLNa与结肠癌的发生、发展密切相关，MMP-9、MMP-2、MIG-7高表达和FLNa低表达均影响结肠癌患者预后，可作为临床预后判断的重要指标。

简介：摘要 血清组织蛋白酶的种类有很多，包括了组织蛋白酶B、S、L、K、D等等，各自有其特点和功能，应用在临床诊断当中。本文主要综述了血清组织蛋白酶在临床诊断中的应用，例如血清组织蛋白酶D在非酒精性脂肪性肝病的诊断应用，血清组织蛋白酶K在骨质疏松症诊断中的应用，血清组织蛋白酶L在卵巢癌中的应用等，希望能对血清组织蛋白酶有一个更加清晰、完整的认识。

简介：摘要目的探讨胎膜早破（PROM）孕妇外周血和胎膜组织中氧化型α1-抗胰蛋白酶（ox-AAT）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）表达的临床意义。方法回顾性分析2019年4月至2020年4月江苏省滨海县人民医院收治的95例PROM产妇的临床资料，依据是否合并组织学绒毛膜羊膜炎（HCA）分为PROM合并HCA组（31例）和PROM未合并HCA组（64例），另选择同期50例正常妊娠产妇作为健康对照组。比较各组外周血和胎膜组织中ox-AAT、NE表达水平。结果PROM合并HCA组外周血ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（2.34 ± 0.02） ng/L比（1.50 ± 0.12）和（0.32 ± 0.04） ng/L和（0.48 ± 0.08）ng/L比（0.13 ± 0.06）和（0.11 ± 0.05） ng/L]，PROM未合并HCA组外周血ox-AAT水平高于健康对照组[（1.50 ± 0.12） ng/L比（0.32 ± 0.04）ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。PROM合并HCA组胎膜组织中ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（0.031 ± 0.005） ng/L比（0.015 ± 0.002）和（0.009 ± 0.003） ng/L、（0.020 ± 0.002） ng/L比（0.003 ± 0.001）和（0.002 ± 0.001） ng/L]，PROM未合并HCA组胎膜组织中ox-AAT水平高于健康对照组[（0.015 ± 0.002） ng/L比（0.009 ± 0.003） ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示外周血中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.879， P<0.05），胎膜组织中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.875， P<0.05）。PROM合并HCA组和PROM未合并HCA组胎盘早剥发生率较健康对照组高[32.26%（10/31）、20.31%（13/64）比4.00%（2/50）]，PROM合并HCA组新生儿肺炎发生率较PROM未合并HCA组和健康对照组高[25.81%（8/31）比9.38%（6/64）和2.00%（1/50）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论ox-AAT在PROM产妇外周血和胎膜组织中过表达，NE在合并HCA的PROM外周血和胎膜组织中过表达，ox-AAT和NE表达增强与围生期不良结局密切相关。

简介：摘要目的探讨胎膜早破（PROM）孕妇外周血和胎膜组织中氧化型α1-抗胰蛋白酶（ox-AAT）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）表达的临床意义。方法回顾性分析2019年4月至2020年4月江苏省滨海县人民医院收治的95例PROM产妇的临床资料，依据是否合并组织学绒毛膜羊膜炎（HCA）分为PROM合并HCA组（31例）和PROM未合并HCA组（64例），另选择同期50例正常妊娠产妇作为健康对照组。比较各组外周血和胎膜组织中ox-AAT、NE表达水平。结果PROM合并HCA组外周血ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（2.34 ± 0.02） ng/L比（1.50 ± 0.12）和（0.32 ± 0.04） ng/L和（0.48 ± 0.08）ng/L比（0.13 ± 0.06）和（0.11 ± 0.05） ng/L]，PROM未合并HCA组外周血ox-AAT水平高于健康对照组[（1.50 ± 0.12） ng/L比（0.32 ± 0.04）ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。PROM合并HCA组胎膜组织中ox-AAT和NE水平高于PROM未合并HCA组和健康对照组[（0.031 ± 0.005） ng/L比（0.015 ± 0.002）和（0.009 ± 0.003） ng/L、（0.020 ± 0.002） ng/L比（0.003 ± 0.001）和（0.002 ± 0.001） ng/L]，PROM未合并HCA组胎膜组织中ox-AAT水平高于健康对照组[（0.015 ± 0.002） ng/L比（0.009 ± 0.003） ng/L]，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示外周血中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.879， P<0.05），胎膜组织中ox-AAT水平与NE水平呈正相关（r = 0.875， P<0.05）。PROM合并HCA组和PROM未合并HCA组胎盘早剥发生率较健康对照组高[32.26%（10/31）、20.31%（13/64）比4.00%（2/50）]，PROM合并HCA组新生儿肺炎发生率较PROM未合并HCA组和健康对照组高[25.81%（8/31）比9.38%（6/64）和2.00%（1/50）]，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论ox-AAT在PROM产妇外周血和胎膜组织中过表达，NE在合并HCA的PROM外周血和胎膜组织中过表达，ox-AAT和NE表达增强与围生期不良结局密切相关。

简介：摘要 目的：观察埃索美拉唑、阿莫西林、甲硝唑和枸橼酸铋钾的四联治疗在Hp感染中的根除率，以及观察链霉蛋白酶联合四联药物对Hp的根除效果。方法:选取Hp感染阳性，胃镜提示为胃炎的初诊患者120例，随机分为两组，接受14d的Hp根除治疗。治疗组：埃索美拉唑20 mg，2次/d，阿莫西林1.0g，2次/d、甲硝唑400 mg，3次/d，枸橼酸铋钾220mg，2次/d，疗程14d，同时每次在早晚餐前10分钟左右同时服用链霉蛋白酶颗粒及碳酸氢钠1.0g。对照组：应用同样的铋剂四联疗法。停药4周后进行14C-尿素呼吸试验，对比根除率。结果:治疗组Hp根除率为 95%，对照组根除率为 83.3%，具有显著性差异( P ＜0. 05) 。结论: 铋剂四联疗法是一种高效的Hp根除方案，联合链霉蛋白酶能够提高Hp根除率。

简介：摘要蛋白酶激活受体2（PAR2）是G蛋白耦联受体的家族成员，作为一种细胞表面受体，PAR2可被丝氨酸蛋白酶及药理学上的合成配体激活，其在机体内分布广泛并在心血管病理生理机制中发挥着重要作用。近年来大量研究显示PAR2在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤及心肌纤维化中具有重要作用，且抗凝剂利伐沙班可通过作用于PAR2对心脏产生保护作用。因此，PAR2或可成为冠心病的治疗靶标，同时相关抗凝剂或可老药新用，挖掘其抗凝以外治疗冠心病的潜能。

简介：摘要目的考察不同胰蛋白酶及消化后是否弃去胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney，MDCK)细胞消化效果的影响，并评价培养基中添加胎牛血清对减轻胰蛋白酶细胞毒性的作用。方法选用5种胰蛋白酶分别消化MDCK细胞，消化5 min后弃去胰蛋白酶为弃去组，不弃去为保留组。观察消化过程，记录细胞达到不同状态所需的时间。完全消化后，检测细胞的活率、结团率、直径。以不同浓度的胰蛋白酶消化MDCK细胞，按培养基是否添加胎牛血清分为含血清和无血清组，检测细胞活性。结果重组胰蛋白酶消化时间长于动物源胰蛋白酶。保留和弃去组细胞活率均值都大于94.77%，结团率均值均大于34.56%，直径均值分别为17.33和16.97 μm且差异有统计学意义(t＝4.632, P<0.001)。细胞活性随胰蛋白酶添加量呈现梯度变化。含血清和无血清组的细胞活性差异有统计学意义(t＝12.545, P<0.001)。结论5种胰蛋白酶均可完全解离贴壁MDCK细胞，其中重组胰蛋白酶消化时间较长，作用温和，比较适合生产。弃去胰蛋白酶再继续消化的做法可行且有益，胰蛋白酶浓度对细胞活性有影响，胎牛血清可以减轻胰蛋白酶的潜在毒性。

简介：摘要念珠菌是人体常见的机会性致病菌，在社会进步、医疗手段提高等多种因素综合作用下，侵袭性念珠菌病的发病率逐渐增高。目前临床上致病真菌耐药性日趋严重，亟需研发新的抗真菌药物。分泌型天冬氨酸蛋白酶在多种致病性念珠菌中都有发现，不仅参与念珠菌病的发生、发展过程，在其耐药过程中也发挥重要作用，该酶的抑制剂有望发展成为新型抗真菌药物，解决目前抗真菌治疗的难点。

简介：摘要目的制备脑炎心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus, EMCV)的3C蛋白酶抗体并检测抗体特异性反应位点。方法构建原核表达载体pQE30-3C，将蛋白进行体外原核表达，免疫纯种BALB/c小鼠，制备单克隆抗体，通过Western blot检测制备的抗体与3C蛋白结合的特异性，通过免疫荧光和Western blot检测抗体与EMCV病毒中表达的3C蛋白酶结合的特异性。原核表达具有不同抗原性的EMCV 3C的3个不同片段，并通过Western blot检测单克隆抗体与EMCV 3C蛋白酶不同片段的反应特异性。结果单克隆抗体与原核表达的3C蛋白酶反应良好，通过Western blot可以检测到病毒中表达的3C蛋白，通过免疫荧光也可以检测到EMCV病毒中的3C蛋白。通过与3C片段的反应发现，单克隆抗体与C端反应，即抗体针对的是C端处的抗原决定簇。结论成功制备EMCV 3C蛋白酶的抗体，能与原核表达的3C蛋白和病毒3C蛋白反应，且针对的是C端的抗原决定簇。

简介：【摘要】：目的 观察胃蛋白酶联合小儿推拿治疗小儿厌食症的临床疗效。方法 于2020年4月至2020年9月在我院接受治疗的小儿厌食症患者中，随机选择70例作为该受试者的研究样本，平均分为对照组和观察组，每组35例。对照组接受胃蛋白酶，观察组加入小儿推拿。比对两种方法在临床中的使用效果。结果 观察组的临床效率较对照组有明显优势。比对差异明显（P0.05）；两组治疗后比对，观察组较对照组有显著改善。比对差异明显（P

简介：摘要目的建立四跨膜蛋白7自身抗体（TSPAN7A）的荧光素酶免疫共沉淀检测技术（LIPS），并评估TSPAN7A在中国1型糖尿病（T1D）人群中的应用价值。方法将插入人全长四跨膜蛋白7 cDNA的海肾荧光素酶重组质粒转染293T细胞，获得含四跨膜蛋白7与海肾荧光素酶融合蛋白的细胞裂解液。待测血清与该细胞裂解液孵育过夜后，用蛋白A-琼脂糖沉淀免疫复合物，洗涤，加入海肾荧光素酶底物并检测荧光读数，以199名健康对照的第99百分位数作为阳性阈值。采用LIPS法检测2014至2017年中南大学湘雅二医院代谢内分泌科就诊的100例T1D患者［男64例，女36例，年龄（28±16）岁］、119例2型糖尿病（T2D）患者［男78例，女41例，年龄（47±12）岁］以及98名健康对照［男55名，女43名，年龄（28±12）岁］血清中TSPAN7A水平。同时采用放射配体法（RLA）检测谷氨酸脱羧酶自身抗体（GADA）、蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体（IA-2A）、锌转运体8自身抗体（ZnT8A）水平，初步评估TSPAN7A的临床应用价值。结果100例T1D患者中GADA、IA-2A、ZnT8A、TSPAN7A的阳性率分别为72.0%、40.0%、29.0%、25.0%，经Bonferroni法校正后，TSPAN7A阳性率低于GADA（P<0.001），而与IA-2A（P=0.035）和ZnT8A比较差异无统计学意义（P=0.630）。T1D患者TSPAN7A阳性率高于T2D的0.84%（1/119；25.0%比0.84%，P<0.001）和健康对照的1.02%（1/98；25.0%比1.02%，P<0.001）。在其他抗体基础上联合检测TSPAN7A可使T1D抗体阳性检出率由82.0%提高至85.0%。TSPAN7A阳性T1D患者与其他3种胰岛自身抗体阳性者临床特征差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论本研究成功建立了TSPAN7A的荧光素酶免疫共沉淀检测技术，TSPAN7A是中国T1D人群的一种新型胰岛抗体。

简介：摘要泛素化是细胞中广泛存在的蛋白质翻译后修饰形式，在调控机体免疫应答、炎症反应、细胞连接、细胞周期、细胞凋亡、DNA损伤修复等许多生命进程中发挥着重要作用。蛋白质的泛素化修饰也是可逆的，去泛素化酶通过水解多聚泛素链对底物蛋白去泛素化来调控蛋白质的寿命或功能，因此在泛素介导的信号转导通路中发挥作用。卵巢肿瘤相关蛋白酶(ovarian tumor-proteases，OTUs)属半胱氨酸家族，研究发现OTUs家族许多成员与病毒感染的调控密切相关，本文就近年来OTUs在宿主抗病毒方面的作用及机制进行综述。

简介：摘要基质金属蛋白酶是一类锌(Zn2+)依赖的蛋白水解酶族，几乎可降解所有细胞外基质，因此参与人体的许多病理过程，包括肿瘤的侵袭和转移、炎症反应、血管凋亡以及促纤维化等。本文就基质金属蛋白酶在常见肺部疾病的临床应用方面的研究进展作一综述。

简介：【摘要】 目的 观察银锌霜联合糜蛋白酶治疗肢体混合度烧伤创面的临床效果。方法:规定时间内本单位收治的符合入组标准的烧伤患者，随机方法分为对照组和治疗组，每组患者30例，分别于治疗后7、14、21天观察创面大体情况，14天统计创面坏死组织溶脱率，并统计2组创面完全愈合的时间。实验数据采用SPSS16.0统计软件进行统计分析，行X²检验，P＜0.05具有统计学意义。结论: 银锌霜联合糜蛋白酶对混合度烧伤创面的治疗具有极大的促进作用，方法合理有效，能为患者减轻病痛，简单经济，有效地缩短病程。

简介：无

简介：无

简介：摘要目的探讨四跨膜蛋白CO-029表达与胆管癌上皮-间质转变(EMT)及肿瘤转移的关系和作用机理。方法利用已构建的vshRNA-CO-029 (LV/GFP/CO-029)慢病毒质粒转染并筛选沉默CO-029基因表达的稳转胆管癌细胞株HCCC-9810-vshRNA-CO-029作为沉默组，以模拟质粒转染的HCCC-9810细胞作为模拟组，以未转染细胞作为对照组。分别以细胞划痕、Transwell和裸鼠体内种植实验检测三组细胞的迁移和侵袭转移能力变化。应用免疫共沉淀和肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激实验检测CO-029对EMT相关基因表达的影响。结果沉默组细胞划痕愈合率低于模拟组细胞[(27.11±4.58)%比(92.84±6.24)%]，沉默组细胞穿过Matrigel胶的数量为(57.15±6.10)个，低于模拟组(108.20±9.21)个及对照组(112.00±10.45)个，差异均具有统计学意义(均P<0.01)。裸鼠肝脏移植沉默组细胞的肝脏瘤体积为(2.17±0.54)cm3，而移植模拟组细胞的肝脏瘤体积为(0.74±0.15)cm3，差异有统计学意义(P<0.05)。模拟组肺转移的发生率和肺转移瘤灶数目分别为100%(6/6)、(214.17 ± 35.64)个，沉默组分别为16.7% (1/6)、(41.56±14.15)个，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。免疫共沉淀显示CO-029可与TNF-αR1形成复合物，TNF-α可诱导模拟组细胞的E-钙黏蛋白表达下调，波形蛋白和N-钙黏蛋白表达上调，而沉默组细胞中则无明显变化。结论CO-029表达与胆管癌侵袭转移能力正相关，并可能与TNF-α协同诱导胆管癌细胞发生EMT，是胆管癌复发转移及预后干预的潜在靶点和分子靶向治疗指标。

简介：摘要泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system， UPS）是真核细胞内除自噬-溶酶体外的另一种蛋白质降解系统。UPS可以清除错误折叠的蛋白，减少因错误折叠蛋白堆积而导致的衰老疾病发生。UPS选择性的蛋白质降解和调节功能作用于精原细胞的有丝分裂、减数分裂和精子细胞的变形过程，在精子发生中扮演重要角色。另外，精子的获能、顶体反应、透明带穿透、受精后精子线粒体的消除等重要生殖过程也与UPS紧密相关。本文就近年来UPS在精子发生和受精过程中的作用及其与不孕症关系研究进行文献综述。