简介:血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)是一种能够特异性裂解血管性血友病因子(vWF)的血浆金属蛋白酶,严重的ADAMTS13活性缺失可导致特发性血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的发生.本文简要综述了ADAMTS13的结构和功能及其与TTP的发病机制、诊断和治疗之间的关系.
简介:摘要目的研究重组人血管性血友病因子裂解蛋白酶(rhADAMTS13)对放射性肠损伤的防护效应。方法将30只C57BL/6 J小鼠按随机数表法分为健康对照组、12 Gy腹部照射组(单纯照射组)和rhADAMTS13联合12 Gy照射组(联合组),分别为6、12和12只。联合组于照射前3 d给予2.5 μg/kg rhADAMTS13尾静脉注射,单纯照射组和联合组给予单次12Gy X射线腹部照射。于照射后1和3 d处死,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆血管性血友病因子(vWF)、血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)和C-反应蛋白(CRP)的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肠组织病理学改变,免疫组织化学染色检测肠组织Ki67、TNF- α和MPO表达水平,生化试剂盒检测血浆丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)。结果与健康对照组比较,单纯照射组照射后1(1.38±0.11)和3 d(1.70±0.10)小鼠血浆vWF水平增高(t=6.20、12.29,P<0.05),ADAMTS13水平降低(t=9.82、22.83,P<0.05);与单纯照射组比较,联合组照射后1(1.23±0.12)和3 d(1.48±0.09)小鼠血浆vWF水平减低(t=2.93、3.96,P<0.05),ADAMTS13水平升高(t=5.09、9.82,P<0.05)。与单纯照射组比较,照射后3 d联合组绒毛长度缩短程度明显降低(t=8.51,P<0.05),免疫组织化学染色显示,联合组照射后3 d隐窝Ki67+细胞数量明显增加(t=9.82,P<0.05),TNF- α和MPO浸润程度明显降低(t=15.44、14.33,P<0.05)。此外,rhADAMTS13干预能显著降低照射后1和3 d小鼠血浆CRP(t=5.02、2.96,P<0.05)和MDA(t=2.47、2.55,P<0.05)的含量,并增加SOD活性(t=2.64、5.64,P<0.05)和T-AOC(t=3.05、5.07,P<0.05)。结论rhADAMTS13能够通过降低炎症和氧化应激水平减轻电离辐射所致小鼠肠损伤,为放射性肠损伤的防护提供了一种新的策略。
简介:目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单克隆抗体的特异性;应用免疫印迹技术确定单克隆抗体与全长ADAMTS13的识别能力;观察单克隆抗体对ADAMTS13水解vWF的影响。结果:最终获得6株抗ADAMTS13的单克隆抗体,克隆号分别为1G11、2F11、6G3、9E1、10A8、10B4。经ELISA鉴定,纯化后的单克隆抗体1G11和2F11的效价最高,与截断型ADAMTS13-T7蛋白结合能力比较,明显高于全长ADAMTS13蛋白。Westernblotting结果显示,6个单克隆抗体都能与全长ADAMTS13结合,其中1G11和2F11条带最亮。功能实验表明,在变性条件下1G11和2F11能够明显抑制ADAMTS13水解vWF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强。结论:成功获得针对ADAMTS13的单克隆抗体,其中两株为抑制性功能抗体。
简介:目的:通过检测造血干细胞移植(HSCT)患者预处理前后ADAMTS-13活性及vWF抗原含量,探讨预处理过程对ADAMTS-13及vWF水平的影响及评估其临床意义。方法:取113例于苏州大学附属第一医院行造血干细胞移植患者预处理前后外周血,20例健康志愿者外周血(作为对照),采用FRETS-vWF73荧光试验检测血浆ADAMTS-13活性,ELISA法检测vWF抗原量。多数患者采取改良BUCY,部分急性淋巴细胞白血病患者予TBI+CY方案预处理,淋巴瘤患者多用BEAM等方案预处理。结果:①移植后发生血栓并发症8例,49例患者出现急性移植物抗宿主病(aGVHD)。②113例造血干细胞移植患者预处理前后ADAMTS-13活性均较正常对照组低,而vWF抗原含量均高于正常对照组(P<0.05)。预处理后ADAMTS-13活性减低的患者占59.3%(69/113),其中活性减低范围在60%以上的患者占8.0%(9/113);相应的VWF抗原含量也出现增高(P<0.01)。③8例血栓并发症患者ADAMTS-13活性预处理后均降低,与非血栓组有明显差异(P<0.01)。活性减低超过预处理前60%的占37.5%(3/8),同时vWF抗原量增加(P<0.01)。④49例aGVHD患者ADAMTS-13活性均值在预处理后降低,但是与非aGVHD患者相比没有明显差异;其中25例患者在aGVHD发生当时ADAMTS-13活性较预处理前发生了明显减低(P<0.001),活性减低超过预处理前60%的占6.0%(2/35)。Logistic回归分析表明:移植预处理后ADAMTS-13活性下降超过预处理前60%,是后期发生血栓的风险因素(P<0.01);而预处理后ADAMTS-13活性下降不是aGVHD发生的危险因素。结论:造血干细胞移植预处理后ADAMTS-13活性较预处理前下降,vWF抗原含量升高;血栓病人尤为明显。ADAMTS-13活性降幅超过60%是后期发生血栓并发症的危险因素,而预处理后ADAMTS-13活性减低与aGVHD的发生无关。所以ADAMTS-13活性降低是移植后血栓并发症的重要预测指标。
简介:摘要ADAMTS1属于含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs,ADAMTS)家族成员,广泛参与生物体内的炎症反应、组织纤维化等病理生理过程。卵巢在女性生殖系统中最为关键,是产生类固醇激素和雌性配子的场所。而ADAMTS1与卵巢功能正常发挥关系密切:ADAMTS1参与卵巢整体形态结构的维持;在卵泡发育阶段,ADAMTS1参与颗粒细胞的功能调控,并介导卵母细胞-颗粒细胞“对话”,对于促进卵母细胞的成熟至关重要;在卵泡发育后期的排卵阶段,ADAMTS1通过裂解多功能蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖等细胞外基质,影响卵丘细胞扩展,调控排卵的顺利进行;此外,ADAMTS1对排卵后的黄体生成、功能维持及退化也具有十分重要的作用。ADAMTS1的表达异常也与卵巢功能异常如多囊卵巢综合征、卵巢早衰等密切相关。本文就ADAMTS1参与卵巢功能调控方面做一综述。
简介:采用密度泛函理论B3LYP方法计算了13个13位取代苦参碱衍生物的电子结构,研究了化合物结构与抑制人肝癌细胞HepG2抗癌活性的定量构效关系(QSAR).结果表明:(1)13位取代的苦参碱类衍生物的最低空轨道能ELUMO越低,最低空轨道与最高占据轨道的能隙ΔE越小,化合物抗癌活性越高;(2)分子的能量Etotal、面积S以及体积V越大,其极化度P越大,活性越大;(3)分子的油水分配系数logP越大,活性越大,即分子的疏水性增大活性增强.综合得到了显著性较好的QSAR方程:-lgIC50=97.008-11.759ΔE+818.602QC2-2.132×10-4Etotal,可用于预测该类衍生物抑制人肝癌细胞HepG2的活性并进行分子设计.
简介:摘要 作为化学学科一大独有的特色标志,化学方程式既是化学教学的重头戏也是化学教学的拦路虎。一方面,化学方程式是化学教学中的一个重要部分,化学中化学反应的表示、反应原理的解释以及物质的化学性质说明都离不开化学方程式,它是学生学好化学形成正确的科学思想和积极的学习态度的重要基础;另一方面,同时亦是化学教学中的难点之一,学生往往在学习化学方程式时采用死记硬背的方法,加之不能清楚地理解化学方程式所要表达出来的微观结构蕴意,使得初三学生在初接触化学学科时困难重重,学习兴趣降低,对接下来的化学学习造成了负面的影响。本文主要采用文献法和个案研究法,通过阅读大量的参考文献,阐述化学方程式的含义,强调化学方程式的基础性和重要性;在此基础上,学习与分析有关化学方程式的教学案例,从中领悟总结出适合中学生学习化学方程式的方法。