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  • 简介:摘要肿瘤的发生和发展是多因素、多步骤的复杂过程。而泛素是多步级联的蛋白质修饰过程,是维持真核细胞内稳态的重要机制。其中E3泛素连接家族是泛素-蛋白体系统的重要成分,可催化多种蛋白底物的泛素,促进其被蛋白体系统降解。迄今为止,E3泛素连接在多种肿瘤细胞生物学过程中发挥着重要作用,包括细胞增殖、凋亡及周期调控。而HECT型E3泛素连接作为E3泛素连接最早被研究的一种,其主要参与蛋白质翻译后转录调控的泛素修饰过程。本文就HECT型E3泛素连接及其在肿瘤中作用的现状和最新研究进展进行综述。

  • 标签: 泛素蛋白连接酶类 肿瘤 治疗应用 HECT型E3酶
  • 简介:摘要E3泛素连接(ubiquitin ligase enzyme,E3)通过调控细胞生物学过程的关键蛋白,参与肿瘤的发生发展。研究结果表明,环指家族(RING-finger)作为最大的E3家族,可以作为抑癌或促癌因子在肝细胞肝癌(HCC)中发挥重要作用。本文对RING-finger E3s在HCC中作用机制,以及靶向治疗中的应用进行综述,为HCC的研究提供新思路。

  • 标签: 肝细胞癌 靶向治疗
  • 简介:摘要: 目的: Hippo 信号通路异常会导致胃癌发生和进展。Hippo 信号通路的核心成分主要受泛素-蛋白体调控,然而其在胃癌中的作用还不清楚。本研究旨在探讨 FBXW5 与 Hippo 信号通路的关系及其在胃癌中的临床意义。 方法: 蛋白免疫印迹法分析裸鼠瘤体中 FBXW5 的表达,及细胞中 FBXW5 蛋白与 Hippo 通路相关蛋白的调控关系;Transwell小室试验、细胞划痕试验用于探讨FBXW5 对胃癌细胞侵袭或迁移能力的影响;裸鼠皮下成瘤实验验证 FBXW5 对移植瘤生长速率的影响。结果: Western blot 实验证明 FBXW5 蛋白在胃癌中高表达,FBXW5 对 Hippo 信号通路存在调控作用,FBXW5 沉默将减缓皮下移植瘤的生长速率。结论: FBXW5 通过结合并促进 LATS1 的泛素和降解失活 Hippo 信号通路,促进胃癌细胞的侵袭、转移。

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  • 简介:目的:克隆并表达caspase-8/10相关RING结构域蛋白1(CARP1)基因,检测其泛素连接活性。方法:提取结肠癌HCT116细胞总RNA,RT-PCR扩增CARP1基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中,序列正确的阳性克隆进行扩增,提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达,通过体内泛素检测其泛素活性,通过萤光素报告基因的方法检测其对NF-kB转录活性的影响,利用细胞生长曲线检测CARP1基因对结肠癌细胞生长的影响。结果:免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达;免疫共沉淀实验表明,当CARP1存在时,受体相互作用蛋白1(RIP1)被泛素;萤光素实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a(TNFa)引起的NF-kB报道基因的激活;通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长,并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长的作用。结论:构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达,表达产物具有RIP1泛素连接的活性,可抑制TNFa引起的NF-kB报告基因的激活,并且促进结肠癌细胞的生长,为进一步的基因功能研究奠定了基础。

  • 标签: CASPASE 8 10相关RING结构域蛋白1 真核表达 泛素连接酶 细胞生长
  • 简介:一次大展E3(EiectronicEntertainmentExpo),全球最大的互动娱乐展,于5月14马16日在美国洛杉矾举行,球共有400家公司参展。参现人数高达6万多.绝大部分为游戏业界人士在三天的展会中.除了可以欣赏和体验到1350多款新游戏之外.参观者还可以参加各种研讨会.有机会聆听来自游戏行业最有实力的领军人物们的演讲——从游戏产业战略.到游戏开发技术.到未来游戏发展趋势。

  • 标签: 游戏产业 行业 游戏业 公司 参观者 战略
  • 简介:天热了,2006年也已经过去一小半。美国那边的E3刚刚结束,德国那边的世界杯马上就要开场了。

  • 标签: E3 游戏产业 PC游戏 玩家
  • 简介:革命导师说过:革命是全球无产者盛大的节日!而一年一度的E3则是全球游戏业者盛大的节日——全球游戏从业人员在短短几天的时间里飞向美国加州洛杉矶,挤满洛杉矶市区的旅馆,共同为这一盛大的节日而欢呼。

  • 标签: 美国加州 从业人员 洛杉矶 游戏业
  • 简介:目的探讨泛素连接Hrd1与L型氨基酸转运载体1(LAT1)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组、反转录-聚合链锁反应(RT-PCR)及Westernblotting检测62例胃癌及癌旁组织中Hrd1和LAT1的表达水平,并分析2种蛋白表达的相关性及与胃癌临床病理特征的关系。结果Hrd1、LAT1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为54.8%(34/62)和56.4%(35/62),明显高于癌旁正常组织的25.0%(5/20)和20.0%(4/20),差异均有统计学意义(P〈0.05)。Hrd1在胃癌组织中的表达仅与肿瘤大小有关(P〈0.05),LAT1表达与肿瘤大小、临床分期有关(P〈0.05)。RT-PCR检测显示,胃癌组织中Hrd1与LAT1的相对表达量分别为4.22±0.83和5.80±1.72,高于癌旁组织的1.14±0.39和1.32±0.77(P〈0.05)。Westernblotting检测显示,胃癌组织中Hrd1和LAT1的相对表达量分别为0.855±0.153和0.896±0.148,高于癌旁组织的0.357±0.178和0.439±0.136(P〈0.05)。Hrd1与LAT1蛋白的表达水平呈正相关(r=0.820,P〈0.001)。结论Hrd1与LAT1在胃癌组织中的表达均高于癌旁正常组织,提示两者可能在胃癌的发生、发展中发挥重要的作用。

  • 标签: 胃癌 泛素连接酶 L型氨基酸转运载体1(LAT1)
  • 简介:摘要目的探讨泛素连接FBW7是否在肝癌细胞HepG2中参与泛素修饰锌指转录因子Snail而影响侵袭和转移。方法通过转染沉默HepG2细胞(购自武汉普诺赛生命技术公司)FBW7的表达48 h后,实验组为沉默FBW7的HepG2细胞,对照组为空白载体转染,分别检测FBW7、Snail mRNA及蛋白表达。通过划痕实验和Transwell方法检测下调FBW7对HepG2细胞侵袭和转移的影响。组间比较采用t检验。结果转染沉默HepG2细胞FBW7基因表达后,FBW7 mRNA(0.31±0.06比0.98±0.25,t=-7.813,P<0.05)及蛋白(0.29±0.03比1.00±0.00,t=-63.967,P<0.05)表达均下调,差异有统计学意义;锌指转录因子Snail mRNA(1.59±0.06比0.99±0.07,t=18.630,P<0.05)及蛋白(1.75±0.20比1.00±0.00,t=11.323,P<0.05)表达均上调,差异有统计学意义;划痕实验显示HepG2细胞迁移能力增加(256.00±35.21比185.00±22.45,t=4.855,P<0.05),Transwell实验显示HepG2细胞穿透数目增多[(271.00±55.32)个比(162.00±33.14)个,t=4.138,P<0.05],差异均有统计学意义。结论FBW7可能通过泛素修饰Snail而抑制肝癌细胞HepG2的侵袭转移。

  • 标签: FBW7 Snail 肝细胞癌 侵袭转移
  • 简介:第一天笔者利用媒体身份提前2小时入场,冲入E3展会。最先去的就是任天堂(Nintcndo)的展台想一睹Wii的风采,可到那里才发现Nintendo的Wii体验馆已经排起了长长的队伍,这才是媒体入场时间呀!看队伍的长度估计要等1小时才能一窥Wii的真面目,于是决定趁人还不多,先走马现花的看看其他展台。事后才发觉这个决定是完全错误的,因为之后的2天半时间里Nintcndo的Wii体验馆起码需要排2至3小时的队才能进入。

  • 标签: E3 游戏产业 任天堂 NDS游戏
  • 简介:八爪鱼:E3大展的全名是ElectronicEntertainmentExpo,而E3名字的来源,显而易见是由3个英文单词的首字母组成的,E3的中文名为电子娱乐展览会。

  • 标签: 电子娱乐 展览会 英文单词 中文名
  • 简介:目的:α1-抗胰蛋白(AAT)缺乏症是一种常染色体隐性遗传病,其特征是错误折叠的AAT突变体在肝细胞内质网内聚集及血清AAT水平降低,并由此引发肝脏及肺部疾病。AAT的Z型突变(ATZ)是造成AAT缺乏的最常见突变类型。有研究已经证实泛素-蛋白体通路参与ATZ的降解。Hrd1是一种定位于内质网膜的泛素连接E3),本文旨在研究Hrd1是否可以通过内质网相关降解通路促进ATZ的降解。

  • 标签: Α1-抗胰蛋白酶 泛素连接酶 突变体 降解 细胞存活 泛素-蛋白酶体通路
  • 简介:摘要目的筛选含有WW结构域的泛素蛋白连接1(WWP1)相互作用蛋白,探讨WWP1和依托泊苷诱导蛋白24(EI24)对肝癌细胞增殖的影响。方法利用酵母双杂交的方法筛选与WWP1相互作用的蛋白,并利用免疫共沉淀来进行相互作用验证。通过体内泛素实验验证泛素连接WWP1与EI24和底物的关系。以慢病毒感染的方法建立WWP1和EI24稳定过表达或敲低表达的肝癌细胞系。通过细胞增殖实验、平板克隆实验和裸鼠成瘤实验检测WWP1和EI24对肝癌细胞增殖的影响。结果WWP1可以与底物EI24相互作用,并能够在体内将EI24泛素降解。成功构建稳定过表达或敲低表达的WWP1和EI24的肝癌细胞系HepG2。在HepG2细胞中,过表达WWP1可以降低内源EI24的蛋白水平,而敲低WWP1可以使EI24蛋白水平增加。细胞计数盒8(CCK-8)法检测结果表明,在36 h时,WWP1过表达组和shWWP1组细胞的相对增殖活性分别为(347.00±8.15)%和(187.08±4.86)%,与对照组(270.33±15.01)%比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在36 h时,EI24过表达组和shEI24组细胞的增殖活性分别为(183.75±8.11)%和(317.33±9.60)%,与对照组(270.33±15.01)%比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。克隆形成实验结果显示,对照组、WWP1过表达组和shWWP1组的克隆形成数分别为(52±7)个/视野、(76±4)个/视野和(19±3)个/视野,WWP1过表达组细胞克隆形成明显增多(P<0.05),而敲低WWP1后细胞克隆形成较对照组减少(P<0.05)。对照组、EI24过表达组和shEI24组的克隆形成数分别为(38±4)个/视野、(10±3)个/视野和(69±7)个/视野。与对照组比较,过表达EI24使细胞克隆形成明显减少(P<0.05),敲低EI24的表达使细胞克隆形成明显增多(P<0.05)。裸鼠体内实验结果显示,经过4周同等条件喂养后,对照组、WWP1过表达组和shWWP1组的裸鼠移植肿瘤体积分别为(1 400.00±43.71)mm3、(2 636.67±290.45)mm3和(642.17±36.00)mm3,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、WWP1过表达组和shWWP1组的裸鼠移植肿瘤重量分别为(1.23±0.08)g、(2.05±0.17)g和(0.88±0.09)g,差异均有统计学意义(P<0.05)。WWP1过表达组细胞成瘤能力明显增强,shWWP1组成瘤能力明显减弱。对照组、EI24过表达组和shEI24组的裸鼠移植肿瘤体积分别为(1 245.17±93.10)mm3、(662.17±60.88)mm3和(1 986.67±226.75)mm3,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、EI24过表达组和shEI24组的裸鼠移植肿瘤重量分别为(1.15±0.04) g、(0.85±0.02)g和(1.73±0.05)g,差异有统计学意义(P<0.05)。EI24过表达组细胞成瘤能力明显减弱,shEI24组成瘤能力明显增强。结论WWP1可以靶向底物EI24进行泛素降解,并促进肝癌细胞的增殖。

  • 标签: WW结构域的泛素蛋白连接酶1 依托泊苷诱导蛋白24 肝肿瘤 泛素连接酶 蛋白降解
  • 简介:目的评价连接链反应(LCR)技术对尿液中淋病双球菌诊断的意义。方法对在STD门诊就诊的276例尿道/宫颈炎患者进行分泌物细菌培养及尿液淋球菌LCR检测,对两项结果不符合的标本进行聚合链反应(PCR)检测,确定细菌培养、LCR法检测尿液中淋球菌的敏感性、特异性。结果276例患者中24例LCR检测阳性(8.7%),21例培养阳性(7.6%)。5例两项结果不符合者进行聚合链反应检测。结果表明LCR的敏感性及特异性分别为92.3%,100%。结论LCR分析法检测尿液中的淋球菌具有较高的敏感性及特异性。

  • 标签: 淋病双球菌 连接酶链反应 尿液
  • 简介:让时间回到1995年,当一个名为“电子娱乐大展”(E1ectronicEntertainmentExpo)出现在世人面前的时候,众多的参展,一商和无以数计的参观者最想说的两个字就是“震撼”——对业内人士来说,从来没有哪一个展会象E3那样使他们获得如此众多的宝贵的商业机会:对游戏爱好者来说,几乎不可能在这个世界上再寻觅到比这E3更能使他们眼界大开的“游戏盛会”了。

  • 标签: 大展抢鲜 年度大展 抢鲜尝
  • 简介:利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72~96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48~96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.

  • 标签: 犬2型腺病毒 E3区 表达载体
  • 简介:A New E Transition from 9+ Isomer in 144Pm NucleusANewETransitionfrom9+Isomerin144PmNucleus¥ZhangYuhu;Y.Gono;ZhaoQinz...

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