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  • 简介:目的探讨结肠癌细胞HCT116皮下种植瘤的组织细胞再行尾静脉注射成瘤的可行性。方法将30只裸鼠随机分为A、B、C组,每组10只。A组尾静脉注射生理盐水,B组尾静脉注射HCT116细胞悬液0.1ml,C组尾静脉注射HCT116皮下种植瘤组织悬液0.1ml。将HCT116细胞皮下种植瘤组织悬液离心分为细胞与组织悬液。另取20只裸鼠随机分为细胞组和悬液组(n=10),尾静脉注射细胞或悬液。观察各组裸鼠成瘤及转移情况。结果A组无肿瘤形成。B组裸鼠尾静脉注射HCT116细胞成功9只,8只形成肺部转移瘤,其中2只同时形成肝部转移瘤。C组裸鼠尾静脉注射HCT116皮下种植瘤组织悬液成功9只,初期有4只尾根部出现肿块,30天后5只裸鼠的骶部、颈部出现肿瘤(严重者有1只同时胸窝皮下也形成肿瘤),50天后形成肺部转移瘤,死亡;未形成皮下种植瘤的4只裸鼠中有3只形成肺部转移瘤后死亡。细胞组裸鼠注射离心后的细胞成功8只,仅1只形成肺部转移瘤。悬液组裸鼠注射离心后组织悬液无肿瘤形成。结论HCT116皮下种植瘤组织悬液尾静脉注射后,能定向地从血管迁移至裸鼠皮下组织成瘤。

  • 标签: 结肠癌 HCT116细胞 皮下种植瘤 尾静脉注射
  • 简介:目的:探讨槲寄生诱导人大肠癌HCT116细胞凋亡所涉及的信号转导途径。方法:采用MTT法测定细胞的增殖活力,琼脂糖凝胶电泳观察细胞调亡,流式细胞仪进行细胞周期分析,Westernblotting和DIG-EMSA研究细胞调亡途径。结果:槲寄生对HCT116细胞有明显的生长抑制作用,琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状条带;槲寄生可通过抑制IκBα蛋白磷酸化进而抑制NF-κB;槲寄生可增强羟基喜树碱对HCT116细胞诱导的凋亡作用。结论:槲寄生对HCT116细胞有明显的生长抑制和诱导调亡作用,并且通过抑制NF-κB活性来诱导人大肠癌HCT116细胞凋亡。

  • 标签: 槲寄生 大肠癌HCT116细胞系 核转录因子ΚB 凋亡
  • 简介:摘要目的探讨超声介导载药微泡靶向药物释放(UTMD)技术联合藤黄酸(GA)对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌HCT116细胞,用不同浓度(分别为0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0 μg/ml)的藤黄酸加入培养基培养细胞,筛选合适的藤黄酸浓度(2.0 μg/ml),将细胞分为6组,分别为GA+微泡+超声组、GA+超声组、GA+微泡组、单用GA组、单用超声辐照组、对照组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪分别检测各组细胞的生长抑制率和凋亡率及细胞周期分布,组间分析采用独立样本t检验。结果UTMD联合GA对人结肠癌HCT116细胞的生长抑制及促凋亡作用显著大于对照组与单用GA组,当处理时间为24、36、48 h时,GA+微泡+超声组的生长抑制率高于对照组(0.755±0.017比0.007±0.001、0.892±0.010比0.008±0.001、0.934±0.003比0.011±0.001,t=60.489、120.670、358.247,P<0.05)、单用GA组(0.755±0.017比0.357±0.012、0.892±0.010比0.462±0.024、0.934±0.003比0.638±0.004,t=26.643、23.719、89.067,P<0.05),差异均有统计学意义。GA+微泡+超声组的凋亡率和处于G2/M期的细胞比例高于对照组[凋亡率:(32.21±1.30)%比(3.33±0.09)%,G2/M细胞比例:(56.97±0.31)%比(18.25±0.76)%,t=31.217、66.391,P<0.05]、单用GA组[凋亡率:(32.21±1.30)%比(24.19±1.30)%,G2/M细胞比例:(56.97±0.31)%比(28.43±0.40)%,t=6.155、80.321,P<0.05],差异均有统计学意义。结论UTMD可明显提升藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞的增殖抑制及促凋亡作用。

  • 标签: 超声介导载药微泡靶向药物释放 藤黄酸 人结肠癌 HCT116细胞
  • 简介:摘要目的研究下调REV7基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射敏感性影响及其机制。方法对HCT116细胞进行培养并运用RNA干扰技术实现REV7基因下调,将细胞分为空白组、转染阴性RNA oligo片段阴性对照组、转染REV7 RNA oligo的REV7基因下调组。克隆形成实验反映细胞增殖水平,蛋白印迹法检测相关基因表达水平、细胞凋亡发生水平和非同源末端连接途径发生水平。结果6Gy照后REV7 siRNA组细胞克隆形成率降低(P<0.05)。REV7 siRNA组REV7基因下调效率>60%。REV7 siRNA组γH2AX、Caspase9表达升高(P<0.05),Ku80、XRCC4表达降低(P<0.05)。结论下调REV7基因能提高HCT116细胞放射敏感性,其机制可能与下调REV7后非同源末端连接的发生被削弱有关。

  • 标签: REV7基因 HCT116细胞系 放射敏感性 非同源末端连接
  • 简介:摘要目的研究X线照射对结直肠癌HCT116细胞中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响,分析Kiss-1基因表达变化与结直肠癌侵袭、迁移潜能的关系。方法结直肠癌HCT116细胞经4Gy、8Gy剂量X线照射后24h、48h,应用免疫细胞化学法检测Kiss-1基因表达水平的变化,Transwell小室侵袭和迁移实验比较X线照射后HCT116细胞侵袭、迁移潜能的改变。结果与对照组癌细胞相比,X照射后24h、48h的4Gy、8Gy剂量组癌细胞中Kiss-1基因表达水平均明显上调(P<0.05),癌细胞的侵袭、迁移能力均明显降低(P<0.05)。结论X线照射上调结直肠癌细胞中转移抑制基因Kiss-1的表达,残存癌细胞中Kiss-1基因的表达增强有可能抑制了癌细胞的转移潜能。

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  • 简介:摘要目的研究TGF-β和Smad4在肠癌细胞HCT116中的表达及As2O3对其变化的影响,探讨肠癌发生的分子机制及As2O3的新作用靶点。方法肠癌HCT116细胞进行体外培养,将不同浓度As2O3作用于肠癌细胞后,应用免疫组化法观察TGF-β1和Smad4的含量变化;电镜下观察肠癌细胞HCT116超微结构变化。结果免疫组化显示Smad4对照组为18.64±0.25,1.5μmol/LAs2O3组为34.16±1.28,2.5μmol/LAs2O3组为39.64±1.63,与对照组比较均有统计学差异(P<0.05),TGF-β1对照组为28.47±0.35,1.5μmol/LAs2O3组为24.15±0.64,2.5μmol/LAs2O3组为21.52±0.87,与对照组比较均有统计学差异(P<0.05);电镜下As2O3作用后的肠癌细胞出现不同程度的体积变小,凋亡改变,伴有细胞的坏死。结论TGF-β、Smad4在体外培养的肠癌HCT116细胞中存在表达异常,TGF-β/Smads信号通路调节的异常很可能是肠癌发生的重要分子基础,三氧化二砷作用机制之一很可能通过改变TGF-β、Smad4在TGF-β/Smads信号通路中的传导作用,而达到抗肿瘤的作用的。

  • 标签: As2O3 HCT116细胞 TGF-&beta Smad4 电镜
  • 简介:摘要目的探讨具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)感染促进TNF-α诱导的结直肠癌细胞HCT116炎症改变的机制。方法建立Fn感染细胞及TNF-α炎症诱导模型并分为4组,即未感染对照组、Fn感染组、TNF-α诱导组、Fn+TNF-α组。首先用Fn感染正常结肠上皮细胞hcoEPIC和结直肠癌细胞HCT116、LoVo,分别检测Fn对不同结肠细胞的黏附情况。TNF-α诱导HCT116细胞3 h后加入Fn感染,24 h后分别用CCK8试验和乳酸脱氢酶(LDH)活力测定法检测细胞存活率及细胞损伤情况。ELISA法检测细胞内和细胞培养上清中核转录因子(NF-κB)和细胞因子(IL-6、IL-8、IL-1β)的表达。结果Fn对结直肠癌细胞HCT116和LoVo的黏附性较强(P<0.05),但基本不表现出侵袭,反而在24 h后对正常结肠上皮细胞hcoEPIC有较高侵袭率。与未感染Fn组相比,Fn感染组细胞存活率显著降低,细胞损伤增加(P<0.001)。在TNF-α诱导3 h后,Fn感染进一步促进了细胞死亡和损伤(P<0.001)。Fn感染和TNF-α单独处理组的NF-κB表达显著高于未感染组(P<0.001, P<0.05),Fn+TNF-α组的NF-κB表达显著高于对照组和单独处理组(P<0.001)。Fn感染和TNF-α单独处理组中,IL-6和IL-8的表达均显著高于未感染组(P<0.001),IL-1β无明显改变(P>0.05)。Fn+TNF-α组中IL-6、IL-8、IL-1β的表达均显著高于正常对照组和单独处理组(P<0.05)。结论Fn能够优先黏附于结直肠癌细胞HCT116上,进而促进TNF-α诱导的细胞损伤、死亡和NF-κB及其下游促炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达和释放。

  • 标签: 具核梭杆菌 结直肠癌 NF-κB信号通路 炎症反应
  • 简介:摘要目的探讨慢病毒介导的c-Myc启动子结合蛋白1 (MBP-1)过表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的HCT116细胞分为以下3组:空白对照组,细胞未做任何处理;空载感染组,空载体对照慢病毒(LV-GFP)感染HCT116细胞;MBP-1过表达慢病毒组(MBP-1组),MBP-1过表达的重组慢病毒(LV-MBP-1-GFP)感染HCT116细胞。RT-PCR检测各组细胞中MBP-1 mRNA的表达,CCK-8实验检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞的周期变化,Western blot检测细胞中MBP-1、NF-κB p65、c-Myc、CyclinD1及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3的表达。三组间比较采用单因素方差分析,方差齐性采用F检验,若方差齐则组间比较采用LSD检验,若方差不齐则组间比较采用Dunnett检验。结果与空载感染组比较,MBP-1组在MBP-1 mRNA (1.02±0.15比4.56±1.03)、蛋白表达水平(0.18±0.01比0.72±0.10)、S期百分比[(39.12±2.18)﹪比(45.64±3.21)﹪]、G2/M期的百分比[(14.81±1.02)﹪比(23.16±2.12)﹪]、细胞中Bax蛋白(0.55±0.10比0.76±0.11)、cleaved caspase-3蛋白(0.45±0.08比0.81±0.11)表达水平均升高,差异具有统计学意义(P均< 0.001),而细胞48 h OD值(0.58±0.08比0.43±0.03)、72 h OD值(1.10±0.13比0.52±0.09)、细胞G0/G1期的百分比[(46.06±1.89)﹪比(31.36±2.02)﹪]、细胞中Bcl-2蛋白(0.52±0.10比0.23±0.02)、NF-κB p65蛋白(0.61±0.13比0.16±0.03)、c-Myc蛋白(0.79±0.15比0.43±0.05)、CyclinD1蛋白(0.62±0.09比0.32±0.01)的表达水平均降低,差异具有统计学意义(P均< 0.001);空白对照组和空载感染组之间各指标差异无统计学意义(P > 0.05)。结论MBP-1过表达可抑制HCT116细胞增殖及诱导细胞周期阻滞于S期,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。

  • 标签: 慢病毒 结肠癌 c-Myc基因 细胞增殖 凋亡 NF-κB信号通路
  • 简介:Consideringthegreatpotentialofnaturalproductsasanticanceragents,thepresentstudywasdesignedtoexplorethemolecularmechanismsresponsibleforanticanceractivitiesofMesuaferreastembarkextractagainsthumancolorectalcarcinoma.BasedonMTTassayresults,bioactivesub-fraction(SF-3)wasselectedforfurtherstudiesusingHCT116cells.Repeatedcolumnchromatographyresultedinisolationoflessactiveα-amyrinfromSF-3,whichwasidentifiedandcharacterizedbyGC-MSandHPLCmethods.α-amyrinandbetulinicacidcontentsofSF-3weremeasuredbyHPLCmethods.Fluorescentassaysrevealedcharacteristicapoptoticfeatures,includingcellshrinkage,nuclearcondensation,andmarkeddecreaseinmitochondrialmembranepotentialinSF-3treatedcells.Inaddition,increasedlevelsofcaspases-9and-3/7levelswerealsoobservedinSF-3treatedcells.SF-3showedpromisingantimetastaticpropertiesinmultipleinvitroassays.Multi-pathwayanalysisrevealedsignificantdown-regulationofWNT,HIF-1α,andEGFRwithsimultaneousup-regulationofp53,Myc/Max,andTGF-βsignallingpathwaysinSF-3treatedcells.Inaddition,promisinggrowthinhibitoryeffectswereobservedinSF-3treatedHCT116tumourspheroids,whichgiveahintaboutinvivoantitumorefficacyofSF-3phytoconstituents.Inconclusion,theseresultsdemonstratedthatanticancereffectsofSF-3towardscoloncancerarethroughmodulationofmultiplemolecularpathways.

  • 标签: Mesua ferrea a-Amyrin APOPTOTIC Antimetastatic Molecular
  • 简介:每个人在自己的人生旅途中都有几件难忘的事情。作为一名在军队新闻工作战线上工作了20多年的编采人员,我最难忘的事情之一,就是自己写的稿件第一次见报的情形。

  • 标签: 军队新闻工作 稿件 旅途 作战 个人 台阶
  • 简介:摘要目的探讨应用RNAi技术降低神经纤毛蛋白-2(NRP-2)表达后对结肠癌细胞HCT-8增殖和凋亡的影响。方法通过脂质体lip2000分别将NRP2-siRNA和NControl-siRNA转染入HCT-8中作为转染组和阴性对照组,加入磷酸盐缓冲液作为空白对照组,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法验证转染效果,采用细胞计数试剂盒(CCK)法、平板克隆实验和Ki-67蛋白染色实验检测3组细胞的增殖情况,吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)荧光染色实验检测3组细胞的凋亡情况。结果RT-qPCR和Western印迹法结果表明转染组细胞NRP-2 mRNA相对表达量和NRP-2蛋白含量降低(0.46±0.05比0.99±0.05和1.00±0.06,1.04±0.06比1.73±0.09和1.65±0.11)(均P<0.05),CCK法表明,转染组各时段的增殖能力较阴性对照组和空白对照组显著降低(24 h为0.53±0.04比0.82±0.07和0.87±0.07,48 h为0.54±0.05比1.00±0.09和1.17±0.05,72 h为0.75±0.05比1.31±0.13和1.50±0.03,96 h为1.05±0.04比1.46±0.09和1.86±0.06)(均P<0.05);平板克隆实验显示转染组细胞较其他两组克隆形成能力显著下降(134.67±8.74比245.33±19.14和300.33±14.01,P<0.05);Ki-67蛋白检测显示与对照组相比,转染组的细胞Ki-67含量显著下降(5.93±0.22比8.36±0.09和8.70±0.21,P<0.05);AO/PI实验显示转染组较对照组相比凋亡细胞/活细胞比例显著上升(0.43±0.07比0.14±0.04和0.11±0.04,P<0.05)。结论降低NRP-2表达可使结肠癌细胞HCT-8的增殖能力下降,凋亡能力上升。

  • 标签: 结肠肿瘤 Neuropilin-2 细胞增殖 细胞凋亡
  • 简介:几个最前沿的可穿戴电子技术项目可穿戴技术不仅仅是智能手表或计步器,在北卡罗来纳州大学的研究人员正在开发功能性、高效性、创新性和实用性的技术。这里有几个最前沿的项目:纳米扩展纺织品(NEXT:Nano-ExtendedTextiles),寻找有用的和经济的方式将电子产品纳入服装,如采用网版印刷传感器于服装,穿戴者的心跳异常会使LED灯闪烁和传输到智能手机,

  • 标签: 网版印刷 电子产品 NEXT 北卡罗来纳州 金属纳米线 铟锡氧化物
  • 简介:摘要目的对1998.1-2007.1在鞍山市中心医院消化内科住院的116例非肝硬化所致腹水患者的临床资料进行了回顾性的分析和总结,为该病症尽快确定病因、提高诊断的准确性、避免延误诊治提供一定参考。方法对腹水产生病因、检测确诊方法等相关资料采用描述性统计方法和方差分析。结果116例非肝门脉疾病所致腹水患者中恶性肿瘤66(56.9%)、其次是结核30(25.9%)、不明原因20(17.2%);其确诊时间明显高于肝门脉系统疾病(p<0.05)且标记检测方法对其确诊的意义和使用率也在逐年增加(p<0.05)。结论引起腹水的常见病因主要是肝门脉疾病,但是非肝门脉疾病由于疾病多样,病情复杂,往往造成误诊,因此应引起消化内科医生的高度重视。

  • 标签: 肝门脉系统 腹水
  • 简介:摘要目的回顾性分析锁骨骨折切开复位克氏针与重建钢板内固定的临床疗效。方法手术切开复位克氏针内固定38例,重建钢板内固定78例。结果术后获随访68例,大部分病例骨折愈合时间3~4个月,肩关节功能基本正常。结论锁骨骨折采用手术切开复位治疗,克氏针与重建钢板能达到治疗目的,能够收到良好的治疗效果。

  • 标签: 锁骨骨折 内固定 重建钢板 克氏针
  • 简介:目的观察白虎加桂枝汤加减对传染性单核细胞增多症(IM)的临床治疗效果。方法将2007-01~2009—07本院收治的116例患儿,随机分为观察组60例.对照组56例,分组时临床表现相同.具有可比性。两组在相同的抗病毒等治疗措施基础上.观察组加用中药汤剂口服或灌肠,比较两组的临床疗效。结果观察组体温恢复正常。咽峡炎缓解,淋巴结和肝脾缩小,异型淋巴细胞恢复正常,肝肾功能及心肌酶谱恢复正常、住院时间均较对照组缩短(均P〈0.05)。观察组效果明显(均P〈0.05).临床疗效优于对照组(P〈0.05)。结论中药汤剂对小儿TM有很好的辅助治疗作用,值得临床推广应用。

  • 标签: 传染性单核细胞增多症/中西医结合疗法 白虎加桂枝汤 传染病 儿童
  • 简介:摘要术中使用微量离心动态测定仪动态监测Hb/Hct对血液保护具有实用性、可靠性、准确性及快速性,能够指导围术期需不需要输血、输什么血、输多少血、输什么成分血,避免了不必要的输血给患者带来的危害。

  • 标签: 术中 动态监测 Hb/Hct 血液保护
  • 简介:2010年7月3日的UFC116因为UFC重量级冠军布洛克·莱斯纳(BrockLesnar)的回归而令人期待万分。布洛克在2008年11月的UFC91中赢得UFC重量级冠军头衔,接着在2009年7月的UFC100中2回合击溃曾经制服过自己的夙敌弗兰克·米尔,风头一时无二。原本定于2009年11月在UFC106中出战肖恩·卡文(ShaneCarwin)的布洛克却因突发疾病不得不退出第2场卫冕战。这

  • 标签: 布洛克 选手 优势 突发灾难 战斗 肠道疾病