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  • 简介:试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板,通过设计的特异性引物PCR扩增出(NDV)HN基因片段,连接至pMD-18T载体,通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中,转化到感受态细胞Rosetta中,获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒,用lmmol/LIPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示,HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,表达产物大小约为90KD左右,western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。

  • 标签: 新城疫 原核表达 SDS—PAGE western—blotting
  • 作者: 江洁 赵林清 穆敏 王文洋 徐瑾 蔡亮 谢正德 朱贞 张燕 周杉杉 冯意 毛乃颖
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华实验和临床病毒学杂志》 2022年第02期
  • 机构:国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室 世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所麻疹室,北京 102206,首都儿科研究所病毒研究室,北京 100020,安徽理工大学医学院免疫学教研室,淮南 232001,河南省疾病预防控制中心免疫预防与规划所,郑州 450016,湖南省疾病预防控制中心微生物检验科,长沙 410005,首都医科大学附属北京儿童医院 北京市儿科研究所感染与病毒研究室,北京 100045
  • 简介:摘要目的基于血凝素-神经氨酸酶蛋白(hemagglutinin-neuraminidase,HN)基因分析我国流行人副流感病毒3型(human parainfluenza virus 3, HPIV3)的基因变异规律和进化特征。方法采用多重荧光PCR方法对2007—2020年5个省市(北京、浙江、安徽、河南、湖南)急性呼吸道感染病例的咽拭子标本进行常见病原体核酸筛查,对HPIV3阳性标本进行HN基因序列测定,与GenBank数据库的国外和我国10个省的HPIV3流行代表株HN基因序列进行比对,应用多种生物信息学方法开展分子进化分析。结果本研究期间从5个省市共获得49株HPIV3的HN基因序列,核苷酸同源性在96.6%~100%之间,其中48株为C3基因亚型,1株为C5基因亚型。系统进化分析显示,我国12个省市在2003—2020年间存在C1、C3和C5基因亚型的毒株共流行,毒株间核苷酸和氨基酸同源性分别为95.4%~99.8%和97.9%~100%,其中C3是我国的优势流行基因亚型,分属于C3a、C3b、C3c、C3e和C3f进化分支,以C3f的传播范围和流行时间最为广泛。对C3基因亚型的进化分析显示,其最近共同祖先形成时间(tMRCA)可追溯到1990年,有效群体规模在2002—2010年间逐渐扩张而后趋于平稳;C3各进化分支HPIV3的HN基因进化速率在3.69×10-4~5.82×10-4替换/位点/年之间;C3基因亚型毒株HN蛋白共享N308、N351、N485和N523潜在N-糖基化位点,选择压力以负向选择为主。结论C3基因亚型是我国的本土优势HPIV3流行型别,形成了广泛传播和持续流行态势,并在流行过程中形成多个进化分支共同循环。

  • 标签: 人副流感病毒3型 血凝素-神经氨酸酶蛋白 基因特征 贝叶斯进化分析
  • 简介:目的探索新城疫病毒HN基因核酸疫苗对Wistar大鼠C6胶质瘤生长抑制作用。方法构建荷C6胶质瘤Wistar大鼠的肿瘤模型,随机分组给予不同的处理给药,观察治疗期间及治疗后的肿瘤生长情况,通过病理组织学、超微结构分析及大鼠血清唾液酸含量的测定,检测新城疫病毒HN基因核酸疫苗在Wistar大鼠体内的抗肿瘤作用。结果pVHN组肿瘤生长速度明显受到抑制,其抑瘤率达78.35%,。病理组织学及超微结构观察到肿瘤细胞典型的凋亡特征。大鼠血清唾液酸含量测定结果显示,pVHN组动物血清唾液酸含量明显低于荷瘤对照组,与荷瘤对照组比较差异极显著(P<0.01),证明HN基因对于去除血清唾液酸具有明显的作用。结论新城疫病毒HN基因核酸疫苗对Wistar大鼠C6胶质瘤生长有抑制作用,可显著降低大鼠血清内唾液酸的含量。

  • 标签: 新城疫病毒 HN基因 荷C6胶质瘤 大鼠 治疗 肿瘤
  • 简介:摘要:为了构建新城疫病毒(NDV)HN基因与人Survivin反义核酸共表达质粒。试验以前期克隆NDV HN基因为基础,将pMD18-HN通过BamHⅠ和NotⅠ酶切后,与重组质粒pcDNA3.1-Survivin ASODN通过T4连接酶连接,然后利用多种限制性内切酶酶切鉴定。结果表明:酶切鉴定证实正确地构建了pcDNA3.1-Survivin ASODN\HN共表达质粒。该共表达质粒的构建有助于HN质粒抗肿瘤机制的深入研究。

  • 标签: 新城疫病毒 人Survivin反义核酸 重组 共表达质粒
  • 简介:Wright和Borkman得出n=4,6的偶数离子与对应n=5,7的奇数离子具有相近结合能,这说明偶数氢团簇离子应该存在。研究了用相干法探测Hn^+团簇离子的方法。利用Penning阱探测到了H4+、H6+,通过分析得出结论:H4^+、H6^+与H5^+、H7^+生成机制是相同的,都可经碰撞合成反应获得;H4^+是以H3^+为核的核构型结构。

  • 标签: 相干探测法 Hn^+团簇离子 离子阱 碰撞合成反应
  • 简介:让A是现代派的pSteenrod代数学和S在p局部性的范围光谱,在p是一个奇怪的素数的地方。在2001,林在被代表由的范围的稳定的homotopy检测了一个新家庭(b_oh_n-h_1b_(n-1))∈Ext_A~(3,(p~n+p)q)(Z_p,Z_p)在亚当斯光谱顺序。同时,他证明了那i_*(h_1h_n)∈Ext_A~(2,(p~n+p)q)(H~*M,Z_p)是在亚当斯的一个永久周期光谱顺序并且收敛到重要元素ξ_n∈π_((p~n+p)q-2)M。在这糊,与林一起“s结果,我们使用亚当斯光谱顺序和5月光谱检测homotopy元素jj的一个新重要家庭的顺序”j酒吧γ~si酒吧i“在范围的稳定的homotopy组的ξ_n。新的具有度p~nq+sp~2q+spq+(s-2)q+s-6并且被h_1h_nγ_s在E_2~代表直到非零数量(s+2,*)亚当斯的术语光谱顺序,在此p≥7,q=2(p-1),n≥4和3≤s

  • 标签: 同伦群 球面 稳定性 Adams光谱序列 May光谱序列
  • 简介:摘要:随着通讯产业的迅速发展,用户的生命周期也日趋成熟,相关的网络公司、网络技术如雨后春笋一般涌现,运营商在市场上的竞争压力日益增大,但在营销方式、营销服务方面却没有取得重大突破,市场定位与传统运作方式遭到严重挑战,内外均面临着严峻的发展压力。

  • 标签: 电信 大数据 HN 研究 精准营销
  • 简介:ToanalyzetheantitumorpotentialandmechanismofactionofsimultaneousNewcastlediseasevirus(NDV)hemagglutinin-neuraminidase(HN)andhumaninterleukin18(hIL-18)genetransferinC57BL/6micewithH22hepatoma,themousemodelwithH22hepatomawasestablishedinC57BL/6mice,andtheantitumoreffectsofthecombinedapplicationofNDVHNandhIL-18wereevaluatedinvivo.Theresultsshowthatthegrowthofestablishedtumorsinmiceimmunizedwithadenovirus(Ad)-HNinconjunctionwithAd-hIL-18wassignificantlyinhibitedcomparedwiththatinmiceimmunizedwithAd-HN,Ad-hIL-18alone,ortheemptyvector(Ad-mock).Furthermore,theimmunizationofmicewithAd-HNinconjunctionwithAd-hIL-18elicitedstrongnaturalkilleractivityandH22tumor-specificcytotoxicTlymphocyte(CTL)responsesinvivo.Inaddition,TcellsfromthelymphnodesofmiceimmunizedwithAd-hIL-18orAd-HN+Ad-hIL-18secretedhighlevelsoftheTh1cytokineIL-2andinterferon-γ(IFN-γ),indicatingthattheregressionoftumorcellsisrelatedtoaTh1-typedominantimmuneresponse.TheseresultsdemonstratethatvaccinationwithNDVHNtogetherwithhIL-18maybeanovelandpowerfulstrategyforcancerimmunotherapy.

  • 标签: 鸡新城疫病毒 抗肿瘤作用 免疫反应 hIL 细胞毒性T淋巴细胞 人白细胞介素18
  • 简介:摘要:防黄剂HN-150是当前全球使用最为广泛的一种氨纶专用的黄变防止剂,其作为一种可燃性粉尘在加工过程中往往以粉尘云的状态存在。鉴于防黄剂HN-150在生产加工等工艺中存在的未知爆炸危险性,特针对防黄剂热解特性进行了相关研究,结果表明:防黄剂HN-150在不同升温速率下的热解过程都产生了四个失重阶段,且热解反应的失重趋势随着温度的升高逐渐连续化,溢出的气体产物主要有CH4、CO、CH2O、N2O、CO2、NO2、C2H7N和H2O。

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  • 简介:摘要生态旅游农业是一种以保护自然生态环境为基础,以开发田园旅游资源为重点的新型艺术农业,它集生态效益、经济效益、社会效益和文化生活于一体,是一种高层次的农业。本文以HN省作为研究对象,阐述了其农业旅游的发展现状及存在的问题,并且提出了发展策略。

  • 标签: 生态保护 农业旅游 开发
  • 简介:Usingamicrowavegenerator,chlorinedilutedbyheliumwasdissociatedtochlorineatomsthatsubse-quentlyreactedwithhydrogenazidetoproducetheexcitedstatesofNCl(a1△).Meanwhile,moleculariodinewithcarriergasofheliumreactedwithatomicchlorinetoproduceatomiciodinewhichthenwaspumpedtoexcitedstateofI(2P1/2)byanenergytransferreactionfromNCl(a1△).Inthispaper,thechangesofNCl(a1△)andNCl(bi∑)emissionintensityispresentedwhenI2/HeisintroducedintothestreamofCl/Cl2/He/HN3/NCl(a1△)/NCl(b1∑).ThedependencesofatomiciodineI(2P1/2)onflowratesofgaseswerealsoinvestigated.TheoptimumparametersforI(2P1/2)productionaregiven.

  • 标签: 化学激光器 微波发生器 实验研究
  • 简介:摘要:随着国内汽车行业的快速发展,消费者对汽车的各项要求也随之提高,特别是随着新技术的快速迭代,汽车项目开发的周期也随之急剧缩短,比如某车型的项目开发周期已从之前的36个月调整为24个月。在汽车项目快速开发的过程中,实验室由于其自身可以严格控制较多外部变量的优势而体现出越来越重要的作用。实验室运行质量的好坏密切关系着汽车开发的质量,而实验室的管理水平和试验的完成质量主要通过实验室质量体系来体现,所以它的作用至关重要。

  • 标签: HN汽车检测实验室 质量管理体系 改进研究
  • 简介:摘要: 随着新零售时代的到来,消费者的购物习惯和需求逐步转变,线上线下相融合、智能化服务与个性化体验的消费模式逐渐成为主流。为了提升市场竞争力,卷烟零售终端亟需创新营销策略,特别是在体验式营销方面进行深入探索。本文以HN县为例,通过问卷调查和调研,系统分析了当地卷烟零售终端在适应新零售环境中的不足与挑战。研究发现,零售终端在内外部布局、服务意识、营销思维、营销方式和产品文化深度方面尚需优化。本文针对性地提出了相应的策略,如“优化终端建设,提振营销效能”,“盘活营销沟通渠道,强化客户关系关联”等,以期能构建更加多元化和个性化的营销模式,提升消费者的满意度和忠诚度。

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  • 简介:摘要:遗传学研究生物的遗传、变异及其规律;人类对遗传的研究从性状开始的,遗传因子的发现到证明遗传密码的存在并破译遗传密码的过程是人们认识遗传的物质基础并揭示遗传规律的过程,在此过程当中遗传基因这个抽象的概念在思维上和实质上逐渐接近染色体、DNA;然后科学家们证明基因是有遗传效应的DNA的片段,从此基因不再是抽象的概念,以后人们又发现性状的表达离不开蛋白质(酶)合成,于是科学家们推测并证明基因通过指导蛋白质的合成而控制生物的性状,于是最终孟德尔的假设得到了科学解释。人民对遗传学的研究是实质上揭示基因表达的过程,这是生物学史上的重大发现。

  • 标签: 性状 基因 基因的表达 启动 结构基因 基因表达的调控
  • 简介:Sinee1988,theauthorhastreatedmi-grain。,namelyangioneurotieheadaehe,usinginjeetionoffleabaneinjeetiointoFengchi(GB20)andTaiyang(EX一HNS)pointswithasat-isfaetoryeffeet.ThiswasrePortedasfollows.GENERAL

  • 标签: VOMITING NAUSEA PAROXYSMAL inserted SOMETIMES bilateral