简介：本文综述了在杀虫剂抗性中起重要作用的P450酶系研究的最新进展，内容包括：细胞色素P450酶系基因及其基因的表达与调控，P450介导抗性的分子基础。细胞色素P450表达表现出发育期，组织，品系特异性及可诱导性。P450表达的调控机制复杂，可能受顺式调控元件（如CYP6B1）或反式作用因子（如CYP6A1）或顺式，反式因子的共同调控（如CYP6D1），调控可能涉及转录增强的转录机制或mRNA稳定性增加的转录后机制。P450的超量表达是P450酶系介导抗性的主要机制，P450的氨基酸替换也可能在杀虫剂抗性中起作用。

简介：水稻P450基因家族成员CYP81A6参与稻瘟病抗性反应,为了深入研究该基因的功能,本研究利用3次克隆的策略构建了该基因的RNAi载体。首先设计带有酶切位点的基因特异性引物,以cDNA为模板扩增3’非翻译区的特异片断,将目的产物连接到T载体上,经菌落PCR和酶切鉴定后进行测序。测序结果表示,目的片断已正确克隆到T载体上。然后利用双酶切通过2次亚克隆将目的片断以反向重复克隆到RNAi载体ds1301,通过分子检测表明,CYP81A6的RNAi载体构建成功,有助于后续的基因功能和作用机理的研究。

简介：摘要目的探讨细胞色素P450 17(CYP17)基因多态性与尿道下裂的关系。方法使用病例对照研究方法，对就诊于贵州医科大学附属医院、贵州省人民医院和贵阳市妇幼保健院的尿道下裂患儿和正常对照组儿童各206例，按年龄进行配对，进行体格检查，同时对尿道下裂组患儿进行临床分型；采用聚合酶链反应(PCR)和限制内切酶(RFLP-PCR)对CYP17基因多态性进行检测；采用自动双向测通的方法对目的基因进行测序；采用化学发光法检测血清性激素水平；应用SPSS 16.0统计学软件对数据进行统计学分析。结果尿道下裂组与对照组患者A1A1、A1A2和A2A2 3种基因型频率符合Hardy-Weinberger遗传平衡法则；两组间患者基因型分布频率存在差异(χ2＝4.673，P<0.05)；两组间野生型和突变型的分布不同，对尿道下裂的患病可能产生影响(χ2＝6.773，P<0.05)。Logistic回归分析发现，野生型CYP17(A1A1)基因型可能增加了尿道下裂的患病风险[比值比(OR)＝0.111，95%可信区间(CI)＝1.140～71.038，P<0.05]；CYP17A1A1基因型增加前段型尿道下裂的风险性(OR＝2.271，95%CI＝1.231～4.846，P<0.05)；尿道下裂组T/E2低于对照组(P<0.05)。结论CYP17基因多态性可能与尿道下裂的有密切关系；CYP17(A1A1)可能是尿道下裂易感基因型。

简介：针对桂桑优12品种进行了转录组测序,本文主要分析得到的基因P45094A1的cDNA序列。通过对桂桑优12与川桑、桃树、梅树、樱桃、毛果杨、橡胶树、甜橙、葡萄、核桃等9种物种的同源序列进行生物信息学分析,结果表明测序DNA序列中存在目前P450基因家族公认的同源性保守序列,即功能域——包括P450蛋白的ExxR结构域、FxxGxRxCxG结构及DT组成的疏水区功能,并对其蛋白质的三维结构图进行了预测。

简介：桔小实蝇是重要的柑橘害虫,目前已对多种杀虫剂产生不同程度的抗性,化学防治方法往往效果不理想,近年来植物转基因抗虫育种技术表现出巨大的潜力,这为更好地防治桔小实蝇提供了新思路。本研究为获得桔小实蝇抗性转基因柑橘,对桔小实蝇细胞色素P450基因(cytochromeP450monoxygenases,P450)和电压门控钠离子通道基因(sodiumchannel,SC)进行核苷酸序列比对,分别克隆得到片段大小为590bp和550bp的P450基因和SC基因的正反目标片段,利用植物表达载体pFGC5941,将基因正反向片段与Intron两端连接,成功构建RNA干扰(RNAi)载体"pFGC-P1F1R1/P2F2"和"pFGC-C1R1/C2R2"。本研究利用XhoⅠ-NcoⅠ、XbaⅠ-BamHⅠ酶切位点对质粒和载体进行双酶切分析实验,克隆测序得到大小为590bp和550bp的两个酶切片段,经核苷酸序列比对分析,验证其与插入片段一致,说明RNAi载体构建成功。通过农杆菌遗传转化体系,将外源重组载体整合到柑橘基因组中,经除草剂筛选、PCR检测分别得到12株转P450基因阳性苗和9株转钠离子通道基因阳性苗,这为后期柑橘抗桔小实蝇效果评价提供了实验材料。

简介：CytochromeP450(CYP)superfamilyisoneofthemembershiplargestandfunctionmostdiverseproteinsuperfamilyrecogniozedamonglivingbeings.Membersofthissuperfamilywerefurtherassignedtodifferentfamiliesandsubfamiliesbasedontheiraminoacidsimilarities.Accordingtotheirphylogeneticrelationships,theCYPgeneswhichlikelydivergedfromcommonancestorgeneandmaysharecommonfunctionsweregroupedintooneclan.Widelydistributingscallopsareagroupofthemostconspicuousbivalve;howeverthestudiesontheirCYPisacarce.Inthisstudy,wesearchedthegenomeandexpressedsequencetagsofZhikongscallop(Chlamysfarreri)forCYPgenes.Intotal,88non-redundantCYPwereidentified,whichwerehomedin13CYPsgenefamilies.Phylogeneticanalysisdividedthesegenesinto4CYPclans.Asindeuterostomes,Clan2wasthelargest,whichcontained33genesbelongingtoCYP1,CYP2,CYP17andCYP356families.Clan3contgained19genesbelongingtoCYP3,CYP5andCYP30families.Clan4contained23genes,allbelongingtoCYP4family.ThemitochondrialCYPclancontained9genesbelongingtoCYP10andCYP24families.Incomparison,protostomes(C.farreri,D.pluex,D.melanogaster)containedmoreCYPgenesthandeuterostomes(S.purpuratusandvertebrates)inClan2butlessgenesinClan3andClan4.OurfindingswillaidtodecipheringCYPfunctionandevolutioninscallopsandbivalves.

简介：从胖身体和棉花一种蛾的幼虫的中间的勇气的细胞色素P450(Cyt-P450)蛋白质，Helicoverpa有佩带徽章权利的人一，被一套纯化过程部分分别地包括微分离心分离，小伙子的增溶，由木钉降水的蛋白质降水和DE-32柱层析净化。Cyt-P450被COdifference光谱和SDS页的方法检测。从胖身体ofH的净化的solubilized微体的部分。有佩带徽章权利的人一多于17褶层被净化。三个蛋白质乐队被SDS页与分子的群众检测70600，63300和571200Da。有63300和571200Da的分子的质量的蛋白质是Cyt-P450的isozymes，是可能的。

简介：【目的】薇甘菊颈盲蝽是入侵植物薇甘菊的天敌昆虫。CYP4家族基因在专食性昆虫与宿主植物的相互作用中发挥着极其重要的作用,探明其在不同部位的表达情况,可为薇甘菊生物控制提供科学依据。【方法】采用RACE技术克隆薇甘菊颈盲蝽CYP基因,实时荧光定量PCR检测其在不同部位的表达情况。【结果】PmCYP4C1基因全长1713bp,其中ORF长1500bp,共编码500个氨基酸,理论分子质量为57.44ku,无信号肽;与其他昆虫CYP4家族基因的同源性大于40%,与温带臭虫CYP的亲缘关系最近。该基因在雌、雄虫各部位均有表达,且都是足部的表达量明显地高于其他部位;雌、雄虫的表达差异在于雄虫翅膀中的表达量明显地高于触角和残体,但在雌虫中这3个部位的表达量无显著差异,且雄虫翅膀中的表达量显著地高于雌虫,是其2.37倍。【结论】薇甘菊颈盲蝽PmCYP4基因除参与代谢有毒物质外,其主要功能可能是编码与薇甘菊颈盲蝽运动相关的酶。

简介：维生素A是人体必不可少的一种脂溶性维生素,在体内可以代谢为生物活性更高的视黄醛和视黄酸。细胞色素P450酶是重要的药物Ⅰ相代谢酶,在人体内有广泛的分布。它不仅参与了外源性物质的代谢,在内源性物质的代谢中也有重要的作用。CYP450酶在维生素A的代谢中扮演了重要的角色。人体内参与维生素A代谢的CYP450酶主要是CYP1,CYP2C,CYP2E,CYP3A和CYP26家族。同时其代谢物视黄酸可以与核受体（维生素A酸受体,视黄醇类X受体）相结合,诱导CYP450酶的表达和活性。本文通过对近几年来维生素A代谢的研究进展做一综述,阐述了CYP1、CYP2C、CYP2E、CYP3A和CYP26家族在维生素A代谢中的作用以及视黄酸诱导CYP450酶的分子机制。

简介：目的：探讨基因芯片技术在细胞色素P4502D6基因分型中应用的可行性，研究中国人群CYP2D6的基因多态性。方法建立寡核苷酸芯片测定CYP2D6基因型的方法，测定288例中国健康志愿者CYP2D6基因分型，并使用直接测序法对结果进行验证。结果：288例中国健康志愿者中CYP2D6＊2和CYP2D6＊10的变异频率分别高达52．8％和53．5％。对部分样本采用直接测序的方法进行进一步确证，结果完全吻合。结论：基因芯片法适用于中国人群CYP2D6基因分型研究。

简介：通过对不同发育时期敏感和抗阿维菌素小菜蛾品系细胞色素P450含量的测定,以及使用不同模式底物对P450单加氧酶活性的比较研究发现:除成虫期外,不同发育时期抗性品系小菜蛾中P450和细胞色素b5的含量都高于敏感品系;抗性品系还原型辅酶Ⅱ(NADPH)-细胞色素P450还原酶活性是敏感品系的1.97倍;同时发现抗性品系中甲氧试卤灵-O-脱甲基酶(MROD)、乙氧试卤灵-O-脱乙基酶(EROD)、乙氧基香豆素-O-脱乙基酶(ECOD)以及对硝基苯甲醚-O-脱甲基酶(PNOD)的活性均明显高于敏感品系,分别为敏感品系的9.41、4.15、1.67和2.94倍.研究结果表明,细胞色素P450含量和单加氧酶活性的增高是小菜蛾对阿维菌素产生抗性的一个重要机制.

简介：细胞色素P450与外来化合物的生物转化及内源性物质的代谢有关。细胞色素P450的酶活性降低将直接或间接引起肝脏的解毒能力下降，加重肝脏损害。本文就细胞色素P450的检测方法及其与肝脏疾病的联系，做一简要综述。

简介：目的研究半枝莲水相和乙醇相提取物对人细胞色素P450主要酶活性的影响，为半枝莲的开发和合理地临床应用提供参考。方法以咪哒唑仑、甲苯磺丁脲、咖啡因、氯唑沙完、异喹呱和试卤灵为探针药，用高效液相色谱法分别测定不同提取溶质的半枝莲粗提物对人细胞色素P450主要酶活性的影响。结果①半枝莲粗提物对CYP3A4、CYP2C9、CYP1A2、CYP1A1酶的活性呈现出剂量依赖性抑制作用。②半枝莲水相粗提物比乙醇相粗提物对CYP1A1和CYP1A2酶的体外抑制作用强。结论半枝莲水相提取物和乙醇相提取物是CYP3A4、CYP2C9、CYP1A2、CYP1A1体外抑制剂。

简介：目的：评价HPPH在体外对大鼠及人肝微粒CYP450酶的6种亚型酶活性的影响,预测使用HPPH可能出现的药物相互作用.方法：将注射用HPPH与CYP450酶的6种亚型的特异性探针底物非那西汀（CYP1A2）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、S-美芬妥因（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、咪达唑仑（CYP3A4）和睾酮（CYP3A4）与大鼠及人肝微粒进行孵育反应,采用HPLC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物（对乙酰氨基酚、羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、O-去甲基右美沙芬、6-羟基氯唑沙宗、1＇-羟基咪达唑仑、6β-羟基睾酮）的浓度.结果：在本实验条件下,HPPH浓度为1.00～50.00μmol·L-1时,未发现其对大鼠的CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4产生抑制作用.在本实验条件下,HPPH浓度为0.50～10.00μmol·L-1时,未发现其对人CYP1A2产生抑制作用;但对人CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1均存在抑制作用;对人CYP3A4,对底物咪达唑仑存在抑制作用,对底物睾酮未发现抑制作用.结论：HPPH对CYP450酶的抑制作用存在种属差异,在人体内HPPH与CYP450酶作用有待体内实验进一步证明.

简介：

简介：摘要目的综述大鼠肝微粒体中细胞色素CYP450活性研究方法。方法查阅国内外文献，对肝微粒体CYP450进行介绍，并总结和归纳中药在CYP450酶活性研究方法的应用。结果CYP450研究方法主要包括体外实验CO吹泡法，化学显色法，体外温孵和体内cocktail探针实验。该方法的应用从中药单体成分逐渐发展到中药提取物、中药复方。结论随着科研水平的提高，体外方法对CYP450研究越来越深入，合体内cocktail探针法，提高药物体内代谢清除预测的准确性。

简介：人体内细胞色素P4503A（CYP3A）是细胞色素P450酶系中最主要的一类。评价CYP3A的活性可用于研究药动学、药物或毒物的代谢、药物相互作用、药物代谢酶的遗传多态性及疾病与代谢酶的相互影响，从而预测最佳给药剂量，达到提高药物治疗效果和减少不良反应的目的。评价CYP3A的活性一般采用探针法，其评价结果的优劣取决于探针的特异性、安全性和方法的科学性。本文就目前被广泛应用的几种CYP3A探针的研究进展作一综述和评价。

简介：以抗氰戊菊酯棉铃虫六龄幼虫中肠组织总RNA为模板，采用特异性引物，通过对反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）的条件进行不断探索和优化，成功克隆出全长为1557bp的基因片段（GenBank登录号DQ497428）。该片段包括一个完整的开放阅读框架（1515bp）及5′端的42个碱基，编码504个氨基酸残基。与国外报道的细胞色素P450CYP6B7基因（GenBank登录号AF031468）的核苷酸、氨基酸同源性分别为97．75％和98．81％，为CYP6B7的等位基因。Northern杂交分析表明，抗性品系棉铃虫中肠组织中CYP6B7mRNA的表达量明显高于敏感品系的，初步表明CYP6B7在棉铃虫对氰戊菊酯的抗药性中起着重要作用。

简介：药用辅料可显著影响药物代谢酶（CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4）的活性，进而影响药物的代谢、疗效和安全性。药用辅料的生物学效应研究引起重视。本文查阅了国内外发表的相关性文献，进行了分析、综合。

简介：目的采用Cocktail探针药物法研究毛冬青胶囊对大鼠CYP1A2、CYP3A2、CYP2C6、CYP2D1、CYP2D2和CYP2E1体内代谢活性的影响.方法：分别以茶碱、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬和氯唑沙宗作为探针底物,将大鼠随机分为3组：空白对照组、毛冬青的低剂量组和高剂量组.低、高剂量组每日分别灌胃给予毛冬青胶囊1.8、3.6g·kg^-1空白对照组每日给予与低剂量组等体积的生理盐水,各组均为1次/天,连续14d.各组分别于第15天给予Cocktail探针药物,于给药前、后不同时间点取血,用LC-MS/MS检测各探针药物的血药浓度,计算药代动力学参数.结果：茶碱低剂量组^、AUCVe有极显著差异（P矣0.01）;甲苯磺丁脲高剂量组和氯唑沙宗低剂量组AUQm有显著差异（P矣0.05）;其他无统计学差异.结论：毛冬青胶囊对大鼠体内CYP2C6和CYP1A2有强诱导作用,对CYP2E1有中强诱导作用,其他亚型基本无影响.