简介:目的:构建miR-15a-5p和miR-16-5p的荧光素酶报告载体,利用此载体分析并验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因3'-UTR区域的确切结合位点,探讨miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的相互作用关系。方法:通过Pubmed和miRBase数据库分别寻找到CCND1基因3'-UTR区域碱基序列和miR-15a-5p、miR-16-5p的碱基序列。找出理论结合位点后,构建荧光素酶报告载体,并用荧光素酶报告基因方法验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因之间的作用关系。结果:通过基因测序表明,本实验成功构建了CCND1a/Ma和CCND1b/Mb荧光素酶报告基因表达载体。将上述载体应用于荧光素酶报告基因实验,结果发现CCND1b组的荧光素酶表达强度显著降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的3'-UTR区域存在结合位点,其具体结合位置在CCND1b区。这在理论上意味着miR-15a-5p和miR-16-5p可以抑制CCND1基因的表达。
简介:目的:研究miR-17-3p在寻常型银屑病皮损及外周血中的表达情况,探讨其参与寻常型银屑病的发病机制。方法:收集寻常型银屑病患者(17例)的皮损组织和外周血及正常对照组(4例)皮肤组织和外周血,提取miRNA。采用Real-timePCR技术检测miR-17—3pmiRNA的表达并进行比较。免疫组化法检测寻常型银屑病皮损组织(25例)和正常皮肤组织(15例)中miR-17—3p的可能靶基因FNIPl蛋白的表达,Pearson相关分析银屑病患者外周血中miR-17-3p的表达水平与患者PASI评分的相关性。结果:Real.timePCR显示miR-17—3pmiRNA在寻常型银屑病患者组皮损及外周血中表达量较正常对照组均明显降低(t值分别为34.62、9.16,P值均〈0.05)。miR-17-3p外周血中表达量与患者PASI评分呈负相关(r=-0.56,P=0.019)。寻常型银屑病患者皮损中FNIP1蛋白表达阳性率明显高于对照组(x^2=9.72,P〈0.05)。结论:寻常型银屑病患者皮损及外周血中miR-17-3p表达下调可能与银屑病的发病有关,miR-17-3p可能通过调节靶基因FNIPl参与银屑病发病。通过检测外周血中miR-17—3p的表达量可能可以评估患者病情严重程度。
简介:目的:研究miR-495-3p对脂多糖(LPS)刺激人牙周膜细胞(hPDLC)增殖及炎性因子表达的影响。方法:分离培养原代hPDLC,然后给予10μg/mL的LPS处理及miR-495-3p模拟物(mimic)转染。实时定量RT-PCR检测LPS处理后miR-495-3p及Toll样受体4(TLR4)的表达;MTT法检测hPDLC细胞增殖;ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;双荧光素酶报告基因检测miR-495-3p与TLR4的靶向关系;Westernblot法检测miR-495-3pmimic转染后TLR4及磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)的表达。结果:LPS处理后,miR-495-3p的表达显著下降,TLR4的表达显著上升。过表达miR-495-3p可显著促进hPDLC细胞的增殖,抑制IL-6及TNF-α的产生;miR-495-3p可靶向结合到TLR4的3'UTR区,并下调TLR4的表达;过表达miR-495-3p可显著抑制p-IκBα的表达。结论:miR-495-3p可通过靶向下调TLR4的表达,抑制核转录因子-κB(NF-κB)通路,进而抑制炎性因子的产生,促进hPDLC的增殖。
简介:摘要在英语教学过程中,与学生关系最为密切的就是英语教师。处在成长期中的高中学,无论是学识水平、人生阅历,还是情感价值观都存在着局限性,要想促进他们全方位地健康发展,这就需要英语教师发挥其教育、示范、指导作用。但是,作为学习主体和教学对象的学生是活生生的有思维,有情感的个体,要想让教师对他们产生最积极、最有效的影响,笔者认为只有那些真正有魅力的英语教师才能做到。所谓魅力,是指人有很强的吸引力和诱惑力。古人云“亲其师,信其道,爱其业。”笔者试图从personality(个性魅力),profession(学识魅力)和performer(角色魅力)这三个方面浅要谈谈魅力英语教师的修炼。
简介:摘要目的针对肺癌患者在临床上病理特征研究的过程中,确定微小miR-340-5p血清在患者体内的表达,并充分确定其与患者相关临床病理特征之间的相关性,分析其是否能够作为潜在肿瘤的早期诊断依据。方法采用逆转录方式的定量聚合酶链式反应进行分析,将我院在2015年6月至2016年5月期间收治的108名患者作为研究对象,所有患者中55例为肺癌患者,21例健康患者,其余32名患者患有良性的肺部疾病,良性肺部疾病患者采用miR-340-5p检测,确定两组患者血清中miRNA的表达水平,并根据研究过程中确定的表达谱进行比对,为肺癌的诊断提供临床参考价值。在研究过程中,将t检验作为统计学意义检测。结果肺癌患者血清中的miR-340-5p检测水平显著高于健康组以及良性疾病患者,具有统计学研究意义(P<0.05)。结论miR-340-5p指标在肿瘤患者中表达程度较高,在临床诊断的过程中具有一定的特异性以及灵敏性,是目前对于肺癌诊断的有效指标。
简介:Inthisstudy,weinvestigatetheinfluenceofdopingonthechargetransferanddevicecharacteristicsparametersinthebulkheterojunctionsolarcellsbasedonpoly(3-hexylthiophene)(P3HT)andamethanofuUerenederivative(PCBM).Organicsemiconductorsarealsoknowntobenotpureandtheyhavedefectsandimpurities,someofthemarebeingchargedandactasp-typeorn-typedopants.Calculationsofthesolarcellcharacteristicsparametersversusthep-dopinglevelhavebeendoneatthreedifferentn-dopings(N_d)thatconsistof5×10~(17)cm~(-3),10~(18)cm~(-3),and5×10~(18)cm~(-3).Weperformtheanalysisofthedopingconcentrationthroughthedrift-diffusionmodel,andcalculatethecurrentandvoltagedopingdependency.Wefindthatatthreedifferentn-dopantlevels,optimump-typedopingisaboutN_p=6×10~(18)cm~(-3).Simulationresultshaveshownthatbyincreasingdopinglevel,V_(oc)monotonicallyincreasesbydoping.CellefficiencyreachesitsmaximumatsomewhathigherdopingasFFhasitspeakatN_p=3×10~(18)cm~(-3).Moreover,thispaperdemonstratesthattheoptimumvalueforthep-dopingisaboutN_p=6×10~(18)cm~(-3)andoptimumvalueforn-dopantisN_d=10~(18)cm~(-3),respectively.Thesimulatedresultsconfirmthatdopingconsiderablyaffectstheperformanceoforganicsolarcells.
简介:Inthispaper,wedeterminedanearthquakesequencelocationintheXingfengjiangareafromJune,2007toJuly,2014andthe3DP-wavevelocitystructurebyasimultaneousinversionmethod.Onthatbasis,westudiedtheoccurrencefeaturesofactivetectonicsandtheearthquakesourcemechanism.Theresultsshowthatthereservoirfracturesystemhasatendencytoincreasewithgradualdepthfromsoutheasttonorthwest,consistentwithgravitationalfieldresearchresults.Thereare4highvelocityzones(HVZ)underthedepthofthe7km-12kmcrustbetweentheXinfengjiangReservoirdamandXichangDistrict,Dongyuan.ThemaxvelocityofthebiggestHVZwhichisunderXichangis6.3km/s.Underthereservoirdamthereisastrongtectonicdeformationzone,asthecenterexitRenzishifault(F2),Nanshan-Aotoufaults(F4),Heyuanfault(F1)andShijiao-Xingang-Baitianfault(F5),7earthquakeswithML≥5.0(includingM6.1inMarch,1962)occurredatthehighgradientzoneoftheHVZⅢandHVZⅣedgewhichhasbeenunderthereservoirdamsince1960,withrelativityenergyreleasingmorethoroughly.ModerateseismicactivityoccurredattheHVZⅠedgewhichhasbeenunderXichangsince2012,andisadangerzoneforM5.0earthquakesinthefuture.
简介:目的:探讨miRNA-1246(miR-1246)促进食管癌细胞转移的作用及其机制。方法:Realtime-PCR法检测miR-1246在癌旁组织、食管癌组织、正常食管上皮和食管癌细胞系中的表达差异。Transwell侵袭实验观察转染miR-1246mimics或inhibitors对食管癌细胞EC109转移能力的影响;裸鼠尾静脉转移实验观察稳定表达miR-1246对食管癌转移能力的影响;生物信息学分析miR-1246的候选靶基因为GSK3β,荧光素酶报告基因实验检测过表达miR-1246后EC109细胞中野生型和突变型GSK3β的荧光素酶活性。Westernblot检测miR-1246对GSK3β蛋白表达的影响。结果:食管癌组织中的miR-1246表达显著高于癌旁组织(P〈0.05);多个食管癌细胞中miR-1246的表达比正常食管上皮细胞Het-1A明显增高(P〈0.05)。与阴性对照相比,miR-1246mimics显著促进EC109细胞的侵袭能力(P〈0.05)。反之,miR-1246inhibitors明显抑制EC109细胞的侵袭能力(P〈0.05);体内实验发现稳定过表达miR-1246明显升高EC109细胞的肺转移能力。荧光素酶报告基因结果证实miR-1246能够抑制GSK3β的3'-UTR区荧光素酶活性;转染miR-1246后,EC109细胞中的GSK3β蛋白水平明显低于对照组;miR-1246过表达显著抑制GSK3β-wt,而不能抑制GSK3β-mut的蛋白表达。结论:miR-1246能够通过靶向GSK3β促进食管癌转移,抑制miR-1246的表达或增加GSK3β的表达可能是抑制食管癌转移的有效手段。
简介:目的探讨微小RNA-769-5p(miR-769-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)技术检测miR-769-5p在5种NSCLC细胞(A549、NCI-H1299、NCI-H157、ANIP-973和GLC-82)中的相对表达量,选择相对表达量最低和最高的细胞株分别转染miR-769-5pmimics/miR-769-5pinhibitor,另设miRNAmimicscontrol/inhibitorcontrol对照组;采用MTS实验、克隆形成实验及Transwell小室实验检测miR-769-5p对NSCLC细胞增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力的影响。结果miR-769-5p在A549、NCI-H1299、NCI-H157、Anip-973及GLC-82细胞中的相对表达量分别为0.06、0.40、0.09、1.04和2.31。在miR-769-5p表达水平最低的A549细胞中瞬时转染miR-769-5pmimics,在miR-769-5p表达水平最高的GLC-82细胞中瞬时转染miR-769-5pinhibitor。MTS结果显示,与对照组比较,miR-769-5pmimics能够抑制A549细胞的增殖(P〈0.05),而miR-769-5pinhibitor能够促进GLC-82细胞的增殖(P〈0.05)。平板克隆实验结果显示,与对照组比较,miR-769-5pmimics能够抑制A549细胞的平板克隆形成数(124.7±14.7绑.399.4±46.0,P〈0.05);而miR-769-5pinhibitor能够促进GLC-82细胞的平板克隆形成数(555.74-29.7%366.3±28.7,P〈0.05)。Transwell实验结果显示,与对照组迁移和侵袭跨膜细胞数比较,miR-769-5pmimics能够抑制A549细胞的迁移和侵袭(94.4±18.1VS.157.8±22.9,84.4±15.1vs.135.6±16.7,P〈0.05);miR-769-5pinhibitor能够促进GLC-82细胞的迁移和侵袭(226.7±40.3VS.153.3±38.7,196.7±39.1伽.138.9±40.4,P〈0.05)。结论miR-769-5p可以抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移,可能成为NSCLC的潜在靶点。
简介:目的研究miR-17在血管平滑肌细胞(VSCM)增殖中的作用,以及转录因子核因子(NF)-κB调控miR-17的作用机制。方法将miR-17mimics转染人VSCM,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期。生物信息学预测NF-κBp65与miR-17启动子区存在结合位点,将pcDNA3.1-p65与报告基因载体pGL3-miR-17启动子区共转染至293T细胞中,通过检测荧光素酶报告基因Luc活性分析NF-κBp65对miR-17启动子区的影响。脂多糖(LPS)刺激细胞后,检测NF-κBp65、miR-17的表达水平。结果与miR-NC组相比,转染miR-17mimics后,VSMC增殖能力增强,差异具有统计学意义(P〈0.05),细胞周期G0/G1期明显减少,S与G2/M明显增加,差异具有统计学意义(P〈0.05)。与miR-17启动子区结合位点突变型(Mutant)组相比,转染miR-17启动子区野生型(Wild)组荧光素酶Luc活性增高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。与对照组相比,LPS刺激细胞后,NF-κBp65、miR-17表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论NF-κB通过直接结合miR-17启动子区,促进miR-17的表达从而促进VSMC的增殖。
简介:Theefficiencyofthepoly(3-hexylthiophene)(P3HT)and[6,6]-phenylC61-butyricacidmethylester(PC61BM)basedorganicsolarcellswasenhancedbyusing1,2,4-trichlorobenzene(TCB)asaprocessingadditivetocontroltheblendmorphology.TheadditionofTCBimprovedthearrangementofP3HTwhichresultedingoodphaseseparatedblendfilms.Correspondingly,theoptimizedsolarcellsshowedapowerconversionefficiency(PCE)of4.17%withafillfactor(FF)of0.69,whichwerehigherthanthoseofcommonthermalannealingdevices(PCE3.84%,FF0.67).Theefficiencywasfurtherimprovedto4.74%bythermalannealingat150°Cfor10minwithahigherFFof0.74.
简介:这天一大早,阿P的手机就陆续收到短信,他这才想起,今天是自己的生日,短信都是各种平台和公众号发来的温馨祝贺。一时之间,阿P心里暖暖的。小兰瞄了阿P一眼,说:'阿P,今天生日打算咋过?'阿P满不在乎地说:'简单点吧,下班时我买个蛋糕,回家小小地庆祝一下就可以了,也不打算在
简介:富强乡财政紧张,新来的乡长急得团团转,听说阿P足智多谋,便把他找来想对策。阿P一直是乡里的红人,对乡长说:'其实对策我早就想好了,现在流行众筹,咱们何不尝试一下?'乡长心头一动,称赞道:'这主意好啊,只是众筹的数额有点大,行得通吗?'阿P笑着说:'乡长发令有什么行不通的?谁能不给乡长面