简介：AbstractObjective:This study was designed to evaluate whether p62/SQSTM1 (hereafter referred to as p62) is involved in the immune response of macrophages against challenge by Candida albicans (C. albicans).Methods:We cultured bone marrow-derived macrophages (BMDMs) to investigate the immune response to challenge by C. albicans. The p62 gene was knocked down by transfection with p62 small interfering RNA (siRNA) in the p62 siRNA group. BMDMs transfected with nonsense siRNA served as the negative control (NC) group. These two groups of BMDMs were challenged with C. albicans in vitro. We detected p62 expression through quantitative reverse transcription PCR and western blotting. The phagocytosis ability of BMDMs was evaluated by flow cytometry and microscopic examination using an Olympus FV1000 laser scanning confocal microscope. Moreover, we determined the level of reactive oxygen species (ROS) in BMDMs. The mRNA levels of proinflammatory cytokines were determined by quantitative reverse transcription PCR.Results:After stimulation by C. albicans, the relative expression of p62 mRNA was increased in a dose-dependent manner, the relative expression of p62 and the ratio of BMDMs to C. albicans is 1.893 ± 0.2156 (1:1, P < 0.05), 2.873 ± 0.4787 (1:3, P < 0.05) and 3.556 ± 0.2892 (1:5, P < 0.01). The p62 protein level was also increased. After transfection with p62 siRNA, the mRNA and protein levels of p62 were significantly decreased in BMDMs (P < 0.05). After 0.5, 1 and 2 hours of co-culture of BMDMs with C. albicans, flow cytometry showed that the phagocytosis rates of C. albicans by BMDMs were significantly lower in the p62 siRNA group than in the NC group (39.70 ± 1.69% vs. 55.23 ± 0.72%, 46.70 ± 0.89% vs. 60.80 ± 1.78%, 51.90 ± 0.98% vs. 64.43 ± 2.0%, respectively, all P < 0.05). Consistent results were seen in the production of ROS (4269 ± 392.6 vs. 13426 ± 1859.7, 4967 ± 721.2 vs. 13687 ± 2611.2, 7647 ± 1950.0 vs. 17719 ± 1814.2, respectively, all P < 0.05). The ROS levels were higher in BMDMs of the NC group than in BMDMs transfected with p62 siRNA at 0.5, 1, and 2 hours after treatment with C. albicans. BMDMs was co-cultured with C. albicans for 4 and 12 hours, the mRNA levels of interleukin-1β and interleukin-18 in NCs were also higher than p62 siRNA group, interleukin-1β: (6.14 ± 1.63 vs. 12.12 ± 0.54, 8.81 ± 0.86 vs. 26.2 ± 4.67, respectively, all P < 0.05), IL-18: (0.38 ± 0.02 vs. 0.97 ± 0.06, 0.44 ± 0.02 vs. 2.23 ± 0.46, respectively, all P < 0.05).Conclusion:p62 plays an important role in the process of phagocytosis in BMDMs challenged by C. albicans through ROS production and expression of proinflammatory cytokines.

简介：摘要细胞早衰是指细胞在非端粒信号刺激下发生的增殖能力和生理功能下降，提前进入衰老状态。电离辐射可以引起细胞DNA损伤，随后经过细胞周期永久性停滞或启动SASP来诱导细胞早衰。其信号通路较为复杂，p53、p16、p38MAPK、p62等信号分子参与该过程。本文总结了辐射诱导p62介导的细胞早衰研究进展。

简介：摘要探讨p62蛋白在肺腺癌（lung adenocarcinoma，LUAD）中的表达情况。采用横断面研究，选择2011年12月至2013年5月上海市同济大学附属同济医院诊治的60例肺腺癌患者组织标本进行石蜡包埋和组织芯片制作，采用免疫组织化学技术（immunohistochemistry，IHC）检测肺腺癌患者癌组织和癌旁组织中p62的表达，分析p62表达与肺腺癌患者临床病理特征及生存预后的关系；同时以随机抽样的方式选取6例肺腺癌癌组织和癌旁组织通过蛋白免疫印迹（Western Blot，WB）检测p62蛋白并进行灰度值分析。收集2018年4月至2019年10月初诊的肺腺癌住院患者术前检查标本，以及健康体检者血浆标本，酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）分别检测肺腺癌患者和健康体检者血浆中p62的表达情况。IHC结果显示癌组织中的p62阳性表达率显著高于癌旁组织，差异有统计学意义（t=5.593，P<0.001）；同样，WB结果显示癌组织p62蛋白表达明显高于癌旁组织差异有统计学相关（t=2.238，P=0.049）。p62表达与肺腺癌患者肿瘤大小、临床病理分期及有无淋巴结转移差异有统计学相关（均P<0.05），p62高表达的肺腺癌患者总生存期差于p62低表达患者（95%CI为0.238~0.870，P=0.028），提示p62高表达与肺腺癌患者不良预后有关。肺腺癌患者血浆中的p62蛋白水平显著高于健康对照组，差异具有统计学意义（t=8.533，P<0.001），受试者工作特征曲线下面积为0.835（95%CI为0.779~0.891，P<0.001），明显高于CEA、CA125、CA153等单项传统指标，四项指标联合检测诊断效能则最高。p62在癌组织和血清中均呈高表达状态，与肺腺癌患者不良预后和总生存期相关。

简介：摘要p62是机体内普遍存在的一种含有6个结构域的多功能蛋白。p62参与选择性自噬降解泛素化底物，并已成为监测细胞自噬的重要生物标志物。除此之外，p62还参与氧化应激、细胞营养感知、细胞凋亡和代谢重编程等众多生物学过程。p62的表达受TFEB等转录因子的调控。既往研究发现p62基因突变与神经系统等疾病密切相关，近来还发现p62参与维护肾小球足细胞、系膜细胞和肾小管上皮细胞的正常功能。基于p62蛋白功能的多样性与重要性，该蛋白有望成为治疗肾脏疾病的靶点之一。

简介：无

简介：摘要目的探讨自噬相关基因Beclin-1、LC3和p62在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及意义。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月解放军陆军第八十一集团军医院接受手术治疗的112例原发性ESCC患者的临床资料。免疫组织化学法检测112例ESCC组织及31例癌旁正常食管黏膜组织中Beclin-1、p62和LC3蛋白的表达情况，分析3种自噬相关标志物在ESCC中的表达及其与患者临床病理特征的关系。结果112例ESCC组织中Beclin-1、LC3和p62阳性表达率分别为32.14%（36/112）、37.50%（42/112）和63.39%（71/112），31例癌旁正常食管黏膜阳性表达率分别为61.29%（19/31）、64.52%（20/31）和32.26%（10/31），差异均有统计学意义（χ2值分别为8.715、7.216、9.584，均P<0.01）。Beclin-1、LC3在ESCC中的阳性表达率均低于癌旁正常食管黏膜，p62在ESCC中的阳性表达率则高于癌旁正常食管黏膜。Beclin-1表达与ESCC患者组织学分级、肿瘤浸润深度、TNM分期、是否存在淋巴结转移均有关（均P<0.05）；LC3表达与ESCC患者肿瘤浸润深度、TNM分期均有关（均P<0.01）；p62表达与ESCC患者是否存在淋巴结转移有关（P<0.01）。在ESCC中，LC3与Beclin-1的表达呈正相关（r＝0.731，P＝0.001），而与p62的表达呈负相关（r＝-0.215，P＝0.023）。结论自噬在ESCC的发生、发展中发挥一定作用，联合检测自噬相关基因Beclin-1、p62和LC3可辅助临床诊断并指导后续综合治疗。

简介：摘要选择性自噬通过降解聚集体蛋白、受损或多余的细胞器等细胞质物质维持细胞内稳态，其正常功能的维持必须确保自噬受体能够有效识别和隔离待降解物质。作为重要的自噬受体蛋白，p62通过介导多种信号通路参与选择性自噬过程。纤维化是大多数慢性炎症性疾病的病理特征，当其持续较长时间发展时，会继发实质性瘢痕形成并最终导致细胞功能障碍和器官衰竭。p62在肺、肝、肾组织等纤维化疾病中均发挥着重要作用，p62的积累、过表达、异位表达均可加重这些疾病的发生发展。因此，进一步探究p62在选择性自噬中的分子机制及其在纤维化疾病中的作用具有重要作用。

简介：摘要目的探究SQSTM1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1侵袭和迁移能力的影响。方法采集2019年4至6月郑州大学第一附属医院收治的21例甲状腺乳头状癌患者切除手术的癌组织和癌旁组织，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）方法检测组织中SQSTM1的表达情况；通过慢病毒转染在TPC-1细胞中构建SQSTM1缺失细胞系SQSTM1-KD-TPC-1， RT-qPCR从基因水平检测SQSTM1在TPC-1 和SQSTM1-KD-TPC-1细胞中的表达；transwell法检测SQSTM1敲低前后TPC-1侵袭和迁移的变化情况；MTT和平板克隆形成实验检测SQSTM1敲低后TPC-1细胞增殖能力的变化；通过RT-qPCR检测增殖相关蛋白的表达情况，从基因水平进一步验证肿瘤细胞对增殖能力的影响。结果甲状腺乳头状癌组织中SQSTM1的表达明显高于正常癌旁组织，有76.2%（16/21）的患者mRNA呈现高表达；敲低SQSTM1明显抑制肿瘤增殖、侵袭和迁移的能力，且增殖相关蛋白表达明显减小（P均<0.01），表明SQSTM1参与增殖相关通路机制的调控。结论SQSTM1在甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1中明显促进细胞侵袭、迁移和增殖，可能是潜在的基因治疗靶点。

简介：摘要目的研究高糖微环境下P62蛋白对人表皮细胞株HaCaT迁移和运动性的影响及其可能的分子机制，以探讨糖尿病足创面难愈合的机制。方法采用实验研究方法。取对数生长期HaCaT进行实验。取细胞，按随机数字表法（分组方法下同）分为正常对照组（培养液含终物质的量浓度5.5 mmol/L的葡萄糖）及高糖（培养液含终物质的量浓度30.0 mmol/L的葡萄糖）24 h组、高糖48 h组、高糖72 h组。正常对照组细胞行常规培养72 h，高糖72 h组细胞行高糖培养72 h，高糖48 h组细胞先常规培养24 h再高糖培养48 h，高糖24 h组细胞先常规培养48 h再高糖培养24 h后，采用蛋白质印迹法检测P62蛋白表达。取细胞，分为正常对照组、高糖组，分别同前培养48 h后，采用免疫荧光法检测P62蛋白表达（以绿色荧光表示）。取细胞，分为阴性对照小干扰RNA（siRNA）组、P62-siRNA-1组、P62-siRNA-2组、P62-siRNA-3组，并转染相应试剂，于转染后72 h，采用蛋白质印迹法检测P62蛋白表达。取细胞，分为正常糖+阴性对照siRNA组、正常糖+P62-siRNA组、高糖+阴性对照siRNA组、高糖+P62-siRNA组，并行相应处理，于转染后72 h，采用蛋白质印迹法检测P62蛋白表达；行划痕试验检测并计算划痕后24 h细胞迁移率（样本数为9）；在活细胞工作站下，观察3 h内细胞运动范围并计算运动速度（正常糖+阴性对照siRNA组、正常糖+P62-siRNA组、高糖+阴性对照siRNA组、高糖+P62-siRNA组观察细胞数分别为76、75、80、79个）。取细胞，分为正常糖+磷酸盐缓冲液（PBS）组、高糖+PBS组、高糖+N-乙酰半胱氨酸（NAC）组，行相应处理后，于培养48 h，分别采用蛋白质印迹法及免疫荧光法检测P62蛋白表达。除划痕试验外，其余实验各组样本数均为3。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果与正常对照组比较，高糖24 h组、高糖48 h组及高糖72 h组细胞P62蛋白表达量均明显增加（P<0.01）。培养48 h，高糖组细胞中P62的绿色荧光强于正常对照组。转染后72 h，与阴性对照siRNA组比较，P62-siRNA-1组、P62-siRNA-2组和P62-siRNA-3组细胞P62蛋白表达量均明显减少（P<0.01）。转染后72 h，与正常糖+阴性对照siRNA组比较，正常糖+P62-siRNA组细胞P62蛋白表达量明显减少（P<0.01），高糖+阴性对照siRNA组细胞P62蛋白表达量明显增加（P<0.01）；与高糖+阴性对照siRNA组比较，高糖+P62-siRNA组细胞P62蛋白表达量明显减少（P<0.01）。划痕后24 h，与正常糖+阴性对照siRNA组［（55±7）%］比较，正常糖+P62-siRNA组细胞迁移率明显升高［（72±14）%，P<0.01］，高糖+阴性对照siRNA组细胞迁移率明显下降［（37±7）%，P<0.01］；与高糖+阴性对照siRNA组比较，高糖+P62-siRNA组细胞迁移率明显升高［（54±10）%，P<0.01］。观察3 h内，高糖+阴性对照siRNA组细胞运动范围较正常糖+阴性对照siRNA组缩小，正常糖+P62-siRNA组细胞运动范围较正常糖+阴性对照siRNA组增大，高糖+P62-siRNA组细胞运动范围较高糖+阴性对照siRNA组增大。与正常糖+阴性对照siRNA组比较，正常糖+P62-siRNA组细胞运动速度明显增加（P<0.01），高糖+阴性对照siRNA组细胞运动速度明显下降（P<0.01）；与高糖+阴性对照siRNA组比较，高糖+P62-siRNA组细胞运动速度明显增加（P<0.01）。培养48 h，与正常糖+PBS组比较，高糖+PBS组细胞P62蛋白表达量明显增加（P<0.01）；与高糖+PBS组比较，高糖+NAC组细胞P62蛋白表达量明显减少（P<0.01）。培养48 h，高糖+PBS组细胞中P62的绿色荧光强于正常糖+PBS组，而高糖+NAC组细胞中P62的绿色荧光弱于高糖+PBS组。结论在HaCaT中，高糖微环境可促进P62蛋白表达；敲减P62蛋白可促进其迁移并增加运动性；高糖微环境下活性氧增加可能是P62表达增加的潜在机制。

简介：摘要目的观察慢性氟中毒大鼠肝脏微管相关蛋白1轻链3（LC3）B、P62、Beclin1的蛋白和mRNA表达，探讨自噬在氟中毒肝损伤发病机制中的作用。方法采用成组设计，54只SD大鼠，按照体重（100 ~ 120 g）采用随机数字表法分为9组，每组6只，雌雄各半，分别为对照组（NC组）、低氟组（LF组）、高氟组（HF组）、NC +雷帕霉素（RAP）组、LF + RAP组、HF + RAP组、NC +氯喹（CQ）组、LF + CQ组、HF + CQ组。NC组饮用自来水（氟离子浓度< 0.5 mg/L），LF和HF组分别饮用氟离子浓度为5.0、50.0 mg/L含氟水；NC + RAP、LF + RAP、HF + RAP组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射1.5 mg/kg RAP，共10 d；NC + CQ、LF + CQ、HF + CQ组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射60 mg/kg CQ，共10 d。采集各组大鼠四肢骨、24 h尿液，检测骨氟、尿氟含量；苏木素-伊红染色法观察肝组织形态学变化；免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法检测肝脏LC3B、P62、Beclin1蛋白和mRNA表达情况。结果染氟后，与NC组比较[（0.03 ± 0.00）mg/kg、（0.34 ± 0.08）mg/L]，HF组骨氟[（3.86 ± 0.08）mg/kg]、尿氟含量[（1.11 ± 0.16）mg/L]均较高（P均< 0.05）。光镜下，NC组大鼠肝组织小叶结构清晰，肝索排列整齐，细胞结构正常，LF、HF组出现不同程度的肝细胞水肿；给予RAP后，与相应染氟组比较，肝细胞形态未见明显变化；给予CQ后，与相应染氟组比较，可见肝细胞明显水肿，随染氟浓度增加水肿程度加重。与NC组比较，HF组LC3B、Beclin1蛋白表达量较高（P均< 0.05），P62蛋白表达量较低（P < 0.05）。腹腔注射RAP后，与LF组比较，LF + RAP组LC3B、P62蛋白表达量较低（P均< 0.05）；与HF组比较，HF + RAP组LC3B、Beclin1蛋白表达量较低（P均< 0.05）。腹腔注射CQ后，与LF组比较，LF + CQ组P62蛋白表达量较高（P < 0.05）；与HF组比较，HF + CQ组P62蛋白表达量较高（P < 0.05）。结论早期（3个月）氟摄入可促进大鼠肝细胞自噬，引起肝细胞水肿，RAP有类似作用；CQ可能通过抑制肝细胞自噬而诱导肝脏损伤。

简介：摘要目的分析血清高尔基体蛋白73（GP73）和血清自噬相关蛋白p62水平对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭（ACLF）患者短期预后的临床价值及预测差异。方法回顾性分析本院2018年10月- 2020年4月收治的HBV相关ACLF患者32例的临床资料（A组），选择同期乙型肝炎肝硬化患者65例（其中Child-Pugh A级为B组34例、Child-Pugh B/C级为C组31例），另选同期健康体检者30名为对照组（D组）。测定四组入选者血清GP73与p62水平，对ACLF组患者随访3个月以分析患者预后情况；并比较死亡和生存患者入院时血清GP73与p62的水平。对数据进行单因素方差分析、独立样本t检验、Pearson相关性分析；采用受试者操作特征曲线（ROC）分析GP73与p62水平对生存患者的预测价值。结果A、B、C、D四组GP73水平分别为（284.30±70.55）ng/ml、（125.33±20.57）ng/ml、（159.82±31.20）ng/ml、（45.46±10.22）ng/ml；p62水平分别为（1.30±0.35）ng/ml、（2.88±0.58）ng/ml、（2.02±0.54）ng/ml、（4.68±1.03）ng/ml。GP73检测值A组显著高于其他三组（P < 0.05），D组显著低于其他三组（P < 0.05），C组显著高于B组（P < 0.05）。p62检测值A组显著低于其他三组（P < 0.05），D组显著高于其他三组（P < 0.05），B组略高于C组，差异有统计学意义（P < 0.05）。GP73与p62呈现负相关关系（r = -0.695，P < 0.001）。ACLF组中生存患者GP73水平显著低于死亡患者[（212.17±22.47）ng/ml与（340.08±32.91）ng/ml，t = 12.493，P < 0.05]；p62水平显著高于死亡患者[（1.46±0.28）ng/ml与（1.18±0.35）ng/ml，t = 2.445, P < 0.05]。据ROC曲线分析结果显示：GP73的曲线下面积（AUC）为0.865、p62的AUC为0.750，两项联合AUC为0.968。结论GP73与p62均对HBV相关ACLF患者近期预后具有一定预测价值，但两项指标联合预测价值更高。

简介：摘要：高层建筑是现代城市发展的标志，其建造过程中需要使用不同的建材和施工工艺来保证工程的效率和质量。模板作为高层建筑结构体系中极其重要的施工工具，直接关系到建筑的结构和外观质量。传统木模板因其重量大、施工周期长、易受潮等缺点正被新材料所替代，铝合金模板则以轻质、耐用、易于加工、稳定性和承载力高、可重复使用等特点被广泛应用于高层建筑施工中。本文重点探析了铝模板施工工艺，旨在为提高工程效率、保证建筑质量提供指导。

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简介：【摘要】页岩气属于非常规的天然气资源，我国在页岩气勘探、开发方面近年取得了重大突破，储量丰富的页岩气资源有助于缓解长期以来的能源短缺矛盾，推动新型能源体系建设进程。本文简述了国内页岩气资源的开采现状、所存问题，提出打破技术设备瓶颈、控制勘探开采成本、开展对深层及非海相页岩气等项目的攻关研究等策略，意在推进页岩气这种清洁能源早日成为国内常规能源的替代品。

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简介：【摘要】目的：观察社区联合医院风湿科护理综合服务模式对于痛风性关节炎患者的护理效果。方法：选取2023年2月至12月期间在我院风湿科接受治疗的痛风性关节炎患者100例，随机分为实验组和对照组，每组各50例。对照组患者采用传统护理模式，实验组患者采用社区联合医院风湿科护理服务模式。结果：社区联合护理模式在改善患者疼痛程度、降低痛风复发率、提高患者生活质量等方面的功效均优于传统护理模式。结论：推广社区联合医院风湿科护理服务模式对于提高痛风性关节炎患者的护理效果具有重要意义。

简介：【摘要】目的：探讨健康生活方式宣教干预在高血压高危人群中的实施效果。方法：选取2022年12月至2023年12月期间，在我中心接受健康检查的200名体检人员作为研究对象。随机将他们分为宣教干预组、对照组，每组各100人。干预组在接受常规体检护理及健康指导的同时，再实施健康生活方式宣教干预。结果：干预组在宣教后的血压控制率、健康生活方式知晓率及遵医行为等方面均优于对照组。结论：健康生活方式宣教干预能够有效促进高血压高危人群的生活方式改善，有利于他们的血压控制并降低心血管风险，提升其自我管理意识和能力，在体检护理中具有积极的临床推广应用价值。

简介：【摘要】目的：探讨中药煎煮管理新模式在提高中药民族药煎煮质量中的效果。方法：从本院2022年1月-12月收治的患者中抽取200例并等分为对照、实验两组，每组100例。对照组饮用传统模式煎煮的中药民族药，实验组饮用新模式煎煮的中药。结果：实验组成品药液有效成分提取率提高15%，杂质含量降低20%，批次间一致性显著改善，煎煮时间缩短30%，P＜0.05。结论：新模式提升了煎煮过程标准化水平，增强了质量控制准确性，患者接受度和满意度均有所提高。在提高中药煎煮质量方面具有显著优势，能为中药产业的现代化、标准化发展提供支持。

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