简介:玻璃化法作为简单方便的超低温保存方法之一,目前已成功地应用于植物茎尖、胚性细胞、原生质体、悬浮细胞等多种单一组织或细胞培养体系,但尚未见对幼苗这种复合组织的保存报道.本文研究了拟南芥(Arabidopsisthaliana,Landsbergerecta)幼苗的玻璃化保存程序并发现了一些有价值的研究现象.幼苗来自萌发的种子,种子消毒后播种在MS培养基上,4℃处理48h后转入25℃,10h光周期,萌发不同天数为实验材料.玻璃化程序包括:1)预处理———用2M甘油+04M蔗糖在20℃处理20min;2)脱水处理———用玻璃液PVS2(30%w/v蔗糖+15%w/v乙二醇+15%w/v二甲基亚砜+含04M蔗糖的MS)0℃处理50min;3)冷冻融化———玻璃液及幼苗一起投入液氮(LN2)保存,20℃室温自然融化;4)置换———用MS+12M蔗糖20℃处理30min,成活力检查;幼苗转到MS培养基培养5天,观察再生长状况.10天后转到培养土中,在生长箱中长到结实.结果表明:1)使用完整的程序,冻融后成活率最高,为765%;玻璃液处理是成功的关键,省去此处理成活率为0;冻融是造成玻璃化保存成活率降低的主要因子;2)由萌发0~2天的种子形成的幼苗便使用该技术,冻存融化后成活率分别为88%,838%和765%,结实正常;3)
简介:用X-射线微区分析方法对I-214(PopulusdeltoidesP.nigra(Dode)Guinier)和胡杨(P.euphraticaOlive)根和叶片样品中元素浓度和分布研究的结果表明,与盐胁迫处理和对照的I-214相比较,胡杨根系中具有”次生液泡”,因而Cl,Na,K和Mg离子浓度较低,而Ca离子浓度较高.在不耐盐的I-214杨中由于不具有”次生液泡”,Cl和K离子浓度较高.胡杨中的这种结构一方面可以做为Cl离子的储存场所,另一方面可以防止Cl离子在细胞核中积聚.在盐胁迫处理条件下,相对细胞壁而言胡杨表现出较强的防止细胞核中积聚Cl离子的能力,表明胡杨在离子选择吸收和区隔化方面具有较强的功能,这将有助于解释胡杨所具有的较强的耐盐性
简介:I-69杨插穗分别培养在含有不同浓度Ce(NO3)3的营养液中,经快速冷冻、冷冻干燥、无水塑料包埋及干刀薄切片法,用X-射线能谱微区分析测定Ce及其它无机离子在茎尖分生组织和叶的不同组织中细胞壁、细胞质、细胞核及叶绿体中的含量及分布。在10ppmCe(NO3)3处理下,茎尖中Ce的含量比对照组和100ppmCe(NO3)3处理组高出近1倍,叶的亚细胞中的K、P、S、Fe的含量也呈增加的趋势。特别是Mg的含量增加显著,在保卫细胞的细胞质中Mg的含量比对照组高出3.5倍,而在表皮细胞的细胞核和液泡中的含量则比对照组高出近13倍。但在100ppmCe(NO3)3处理下,无机离子在叶中亚细胞微区间的含量则显著下降