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  • 简介:目的:探讨核质双向转运蛋白Importin13(IPO13)在翼状胬肉表达及意义。方法:收集2015年1月至2015年6月在中南大学湘雅医院眼科门诊确诊为"翼状胬肉"并行手术切除患者标本5例作为翼状胬肉组,收集人正常球结膜组织5例作为人正常结膜组织组,采用免疫组织化学方法检测两组结膜上皮和翼状胬肉组织IPO13、核转录因子p63、ABCG2、CD133表达。结果:IPO13及p63表达定位于结膜上皮和翼状胬肉组织上皮基底细胞核内,ABCG2表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞浆及细胞膜,CD133表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞膜。IPO13、p63、ABCG2及CD133在人正常结膜组织均呈低表达(光密度OD值IPO13:0.43±0.30;p63:139.09±40.15;ABCG2:63.63±22.56;CD133:70.31±33.41);在翼状胬肉中表达均明显增高(OD值IPO13:155.1±21.80;p63:617.35±87.43;ABCG2:214.03±34;CD133:201.05±46.38)。两组之间差异显著(IPO13:t’=15.87,P〈0.005;p63:t’=11.92,P〈0.005;ABCG2:t=8.15,P〈0.005;CD133:t=5.08,P〈0.005)。结论:IPO13、p63、ABCG2及CD133在翼状胬肉中高表达提示其可能在翼状胬肉异常增殖性病变起着正向调控作用。

  • 标签: 翼状胬肉 Importin13 P63 ABCG2 CD133
  • 简介:目的:探讨重度肺内/外源性ARDS患者行不同时间俯卧位通气治疗效果.方法:将重度30例肺内/30例外源性ARDS患者分别行2h、4h俯卧位通气,观察患者APCHEII评分,氧合指数、胸片吸收情况、心率、平均动脉压、脱机拔管时间,出ICU时间.结果:四组患者APCHEII评分、心率、平均动脉压比较差异均无统计学意义(P>0.05).肺内源性ARDS患者行2h、4h俯卧位通气均能有效改善患者氧合指数,4h组较2h组氧合指数改善、胸片吸收情况更明显,4h组在脱机时间、转出ICU时间均优于2h组(P<0.05);肺外源性ARDS患者行2h、4h俯卧位通气均能有效改善患者各项指标,但两组间无统计学差异(P>0.05),且均优于肺内源性ARDS患者(P<0.05).结论:俯卧位通气可改善重度肺内/外源性ARDS患者病情,其对肺外源性ARDS患者效果更好,2h俯卧位通气即能取得较好效果,而肺内源性ARDS患者需更长时间俯卧位通气改善病情且预后较差.

  • 标签: 急性呼吸窘迫综合征 俯卧位通气 氧合指数
  • 简介:目的:直肠腺癌组织β-catenin和NF-κB表达水平及二者与结直肠癌临床病理特征之间相关性。方法:采用免疫组化SP法检测65例结直肠腺癌和20例正常结直肠组织β-catenin与NF—κB蛋白表达水平。结果:结直肠癌和正常结直肠组织β-catenin阳性表达率分别为67.7%、0%,NF—κB阳性率分别为75.4%、15.0%,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结直肠癌组织β-catenin与NF.κB表达与患者年龄、性别、肿瘤发生部位均无关(P〉0.05),但与TNM分期和淋巴结转移显著相关(P〈0.05);NF-κB表达与组织学分化程度呈显著负相关(P〈0.05),B-catenin表达与肿瘤远处转移显著相关(P〈0.05)。结直肠腺癌组织p-catenin表达与NF—κB表达呈显著正相关(r=0.293,P=0.018)。结论:结直肠癌β—catenin与NF—κB表达异常上调,在结直肠癌发生发展起重要作用,二者联合检测有助于结直肠癌病情和预后评估。

  • 标签: Β-CATENIN NF—κB 结直肠癌 相关性
  • 简介:金属硫蛋白(MT)是一类富含半胱氨酸低分子量非酶蛋白,具有重金属解毒、调节微量元素代谢、清除自由基抗氧化等多种生物学功能。MT可作为高效内源性细胞保护剂,对多种心血管系统疾病具有重要保护作用。简要综述了MT理化性质及生物学特性,MT在心肌缺血再灌损伤、心力衰竭、阿霉素诱发心脏毒性、高血压及动脉粥样硬化等心血管疾病发病过程作用及其可能机制。

  • 标签: 金属硫蛋白 心血管系统疾病 抗氧化作用
  • 简介:目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1-105和106~187氨基酸残基2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起始位点序列与抗体轻重链基因偶联,构建成2个双顺反子表达载体pIRESLZdhfr—H和pIRESLZdhfrL。用脂质体2000转染CHO-dhfr-细胞,用无次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷IMDM筛选培养基筛选阳性克隆。结果:筛选到阳性克隆表达水平为1.47-3.5μg/(106细胞·d),经氨甲蝶呤(MTX)梯度加压,在MTX浓度为5×10^-8mol/L时,表达水平达到11.5μg/(10^6细胞·d)。结论:构建了基于亮氨酸拉链二聚化基础dhfr弱化方式双顺反子表达载体,实现了全抗体在CHO—dhfr-细胞高效表达。

  • 标签: 双顺反子表达载体 二氢叶酸还原酶基因 弱化 全抗体
  • 简介:近年来,随着我国教育改革全面推进,对高中教学质量要求也越来越高,尤其是生物教学,这在一定程度上给高中生物教学带来了新挑战.因此,本文在探讨了高中生物教学开展探究性学习存在问题之后,提出具体解决对策,以期为高中生物教学有效性提高提供一定帮助.

  • 标签: 高中生物 探究性学习 困难 对策
  • 简介:目的观察氧诱导视网膜病模型(OIR)曲安奈德(TA)对CD14+细胞聚集及VEGF表达干预作用,初步探讨曲安奈德抑制视网膜新生血管生长可能机制。方法清洁级C57BL/6哺乳期小鼠36只(共36个眼球),随机将其分为四组:①正常对照组(6个眼球),6只17日龄正常小鼠先行FFA眼底造影,然后每鼠随机摘取一个眼球,行眼球石蜡切片HE染色。②单纯高氧组(6个眼球),6只17日龄OIR模型小鼠处理同单纯对照组。③TA高氧组(12个眼球),12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射TA2μL,再于17日龄后行FFA眼底造影后摘除术眼,其中6个眼球行眼球石蜡切片HE染色及视网膜CD14和VEGF免疫组化染色,另6个眼球行视网膜VEGFmRNAreal-timePCR检测。④BSS高氧(12个眼球),12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射BSS2μL,余处理同TA高氧组。用t检验两两比较各组视网膜突破内界膜内皮细胞核数,视网膜CD14与VEGF免疫组化染色平均吸光度值(IOD/AOI),及VEGFmRNA相对含量值(2-ΔCt×105)。结果与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜内皮细胞核数目明显增多(t=29.62,P〈0.001)。与BSS高氧组相比,TA高氧组突破视网膜内界膜内皮细胞核数明显减少(t=19.879,P〈0.001)。TA高氧组和BSS高氧组小鼠视网膜神经上皮均可见VEGF,CD14阳性染色,但BSS高氧组VEGF、CD14含量明显高于TA高氧组(t=-2.743,P〈0.05;t=-3.592,P〈0.01)。并且视网膜SDF-1与CD14蛋白含量存在正相关(r=0.662,n=12,P〈0.05)。视网膜VEGFmRNA表达在BSS高氧组也明显高于TA高氧组(t=-4.754,P〈0.005)。结论TA能有效抑制小鼠视网膜新生血管形成,其机制可能是通过阻遏循环中CD14+细胞聚集,进而减少VEGF等细胞因子表达而发挥作用。

  • 标签: 曲安奈德 血管内皮细胞生长因子 基质细胞衍生因子-1 近交系小鼠
  • 简介:采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因序列,设计并合一对引物,从含人成骨蛋白基因质粒扩增获得大小420bpDNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5k为表达载体构建重组表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。

  • 标签: 人成骨蛋白成熟肽基因 毕赤酵母 序列分析 基因克隆
  • 简介:采用MTT法对从瓦宁木层孔菌子实体中分离得到化合物樱花亭、7-甲氧基二氢莰非素、4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮、二氢莰非素、hispolon进行了体外抗肿瘤活性研究。试验结果表明:当质量浓度为100μg/mL时,化合物4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮和hispolon对人肝癌细胞SMMC-7721抑制率分别为34.83%和48.09%,对人乳腺癌细胞MCF-7抑制率分别为71.09%和74.57%;半数抑制量IC50分别为69.48,61.57,30.22,24.68μg/mL。说明化合物4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮和hispolon对SMMC-7721细胞和MCF-7细胞增殖均有良好抑制作用。

  • 标签: 瓦宁木层孔菌 MTT法 SMMC-7721细胞 MCF-7细胞
  • 简介:以真菌性皮肤病为例,试从诊断性评价视角论述该课程教学实践要点和具体教学策略,对医学生进行了科学、公正、客观评价。同时,对涉及诊断性评价课程设计进行总结和反思,说明将诊断性评价适时纳入医学生多元化评价体系重要性和必要性。

  • 标签: 教学评价 诊断性评价体系 皮肤性病学 真菌性皮肤病
  • 简介:蛋白质组学新技术为我们研究细胞内信号转导过程提供了更广泛和崭新思路,它克服了传统技术局限性,实现了对蛋白高通量分析。简要综述了蛋白质组学技术在信号转导过程中信号分子的确定、定量,磷酸化等翻译后修饰识别,以及蛋白质之间相互作用研究等方面的应用。

  • 标签: 蛋白质组学 信号转导
  • 简介:目的对中国实验小型猪内源性反转录病毒存在与mRNA表达进行检测,摸清中国实验小型猪内源性反转录病毒携带情况.方法根据已发表PERV序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)存在与表达;同时,根据目前通用env基因分型方法合成了三对用于分型检测引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品均检出了PERV特异性DNA存在;同样,在被检RNA样品均有PERV特异性RNA表达,且所表达PERV均为A型和B型,在所有样品均未检出C型PERV表达.结论初步表明中国实验小型猪存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA形式表达,这一结果为我国特有小型猪开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.

  • 标签: 内源性逆转录病毒 中国实验小型猪 聚合酶链反应
  • 简介:利用ISSR分子标记技术对59份玉米自交系和1份大刍草材料进行遗传多样性分析.21对ISSR引物共扩增出475条不同位置带,平均22.6条;多态性带469条,平均22.3条,百分率高达98.7%;不同引物多态性信息指数(PIC)在0.84~0.94之间.60份材料遗传相似系数在0.23~0.48之间.经聚类分析,可将这些材料分成两大组,共9个亚组,并且在一定程度上与血缘和系谱是一致,也存在一些例外.结果表明,ISSR标记尽管可以用于进行遗传多样性分析,但并不是最好分子标记类型.综合考虑不同分子标记类型优缺点,认为ISSR标记在遗传研究较少作物上应用潜力较大.

  • 标签: 遗传多样性 玉米 自交系 种质资源 ISSR ISSR分子标记技术
  • 简介:缺血性卒是临床常见疾病,且致死致残率高,幸存患者预后多不同程度患有偏瘫等后遗症,但目前还没有好治疗方法。很长一段时间以来,卒治疗关注点在于神经元保护,割裂了神经元和周围细胞联系。2001年,“神经血管单元”概念提出为缺血性卒临床治疗提供了新角度。此外,有研究表明Notch信号通路参与了神经、血管再生过程,对于卒后神经血管单元修复有调节作用。因此,本文从神经血管单元和Notch信号通路两个切入点综述了二者在缺血性卒中发生后作用。

  • 标签: 神经血管单元 NOTCH信号通路 缺血性卒中
  • 简介:目的:探讨survivin在肺鳞癌、腺癌组织表达、临床意义及其与P53表达临床病理相关性。方法:采用免疫组织化学(Envision二步法)检测survivin和P53在65例肺鳞癌、腺癌组织及15例肺良性病变组织表达情况。结果:survivin、P53阳性率分别为58.5%(38/65)、53.8%(35/65),显著高于肺良性病变组织0(0/15)、0%(0/15);survivin表达与肺鳞癌、腺癌低分化(P〈0.05)、淋巴结转移呈正相关(P〈0.05),与患者预后负相关(P〈0.O5);P53表达与肺癌组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移均有关(P〈0.05);并且Survivin表达与P53表达呈正相关(P〈0.05)。结论:Survivin表达与肺鳞癌、腺癌低分化、淋巴结转移正相关;过度表达提示预后不良;Survivin有望成为肺癌诊断和基因治疗新靶点;survivin和p53协同表达可能是促进肺癌恶性进展重要因素。

  • 标签: SURVIVIN P53 肺癌 免疫组织化学
  • 简介:目的:融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原,以便与其他已知免疫显性抗原联合使用,有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验敏感性和特异性。方法:将克隆来源干结核分枝杆菌H37Rv株Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b,并在大肠杆菌BL21获得高效表达;由于重组Rv3881c突变子抗原片段同C端6xHis标签融合表达,使用Ni-柱进行快速纯化。结果:Western印迹表明,重组Rv3881c突变子抗原同选取6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显反应。结论:重组Rv3881c突变体具有较好特异性,提示该抗原可能成为检测结核有效抗原之一。

  • 标签: Rv3881c抗原 结核分枝杆菌 融合蛋白 大肠杆菌
  • 简介:用原子吸收光谱法测定了铜、铁、锌、锰、铬、镁、铅、钾在SPF大鼠心、肝、肾、肺、脾含量,发现铜、锌、铁、锰、在肝脏浓度晟高(P<0.001);铬、钾在肺脏浓度最高(P<0.001);镁、铅在各脏器浓度无显著性差别(P>0.05)。

  • 标签: 大鼠 脏器 微量元素 含量测定 原子吸收光谱法
  • 简介:组织胞浆菌(Histoplasmacapsulatum)是一种深部真菌,可引起人体深部组织胞浆菌病。最近我们从1例患者骨髓涂片瑞氏染色、PAS染色、骨髓病理活检检出组织胞浆菌,现予报道。

  • 标签: 组织胞浆菌病 两性霉素B 治疗
  • 简介:目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存真核表达载体pEGFP-N1,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、Western印迹检测蛋白表达。结果:构建了真核表达载体pEGFP-N1-mpafp698,在转染后24h可检测到绿色荧光表达,而对照组则没有检测到荧光蛋白;Western印迹结果显示表达蛋白相对分子质量约37000。结论:为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白细胞表达及功能研究奠定了基础。

  • 标签: 准噶尔小胸鳖甲 抗冻蛋白 细胞表达
  • 简介:目的:探究在胃溃疡疾病治疗应用雷贝拉唑、克拉霉素和阿莫西林药物进行联合治疗效果.方法:选择我院于2013年6月到2015年4月收治96例胃溃疡患者,将其随机分为实验组与参照组,每组各48例.两组患者均予以阿莫西林与克拉霉素,实验组患者配合使用雷贝拉唑进行三联治疗,参照组患者配合使用奥美拉唑进行三联治疗.对比两组患者治疗效果,患者腹痛缓解时间以及不良反应发生情况予以分析.结果:实验组总体治疗有效率为95.84%,高于参照组81.25%(X^2=5.03,P〈0.05);实验组疼痛缓解率为95.83%,高于参照组81.25%,且实验组疼痛缓解时间更短(X^2=5.03,t=28.92,P〈0.05);实验组不良反应发生概率为12.50%,低于参照组35.42%(X^2=6.92,P〈0.05).结论:在胃溃疡疾病治疗应用雷贝拉唑、克拉霉素和阿莫西林药物进行联合治疗,能够取得较好治疗效果,安全性也相对较高,值得被推广应用.

  • 标签: 雷贝拉唑 克拉霉素 阿莫西林 胃溃疡治疗