简介:P28,a28kDproteinfromtoad(Bufobufogargarizans)oocytes,wasidentifiedbyusingP13^suc1-agaroseaffinitychromatography.Sequencehomologyanalysisofthefull-lengthcDNAofP28(GeneBankaccessionnumber:AF314091)indicatedthatitencodesaproteincontaining224amino-acidswithabout55%iden-titiesandmorethan70%positivestoencodesaproteincontaining224amino-acidswithabout55%iden-titiesandmorethan70%positivestohuman,ratormouseUCH-L1,andcontainshomologicalfunctionaldomainsofUCHfamily.Anti-p28monoclonalantibody,oninjectingintotheoocytes,couldinhibittheprogesterone-inducedresumptionofmeioticdivisioninadose-dependentmanner.TherecombinantproteinP28showedsimilarSDS/PAGEbehaviorstothenativeone,andpromotedubiquitinethylesterhydrolysis,aclassicalcatalyticreactionforubiquitincarboxylterminalhydrolases(UCHs).Theresultsinthispaperrevealthatanovelprotein,p28,existsinthetoadoocytes,isaUCHLlhomolog,wasengagedintheprocessofprogesterone-inducedoocytematurationpossiblythroughaninvolvementinproteinturnoveranddegradation.
简介:Thesurfaceglycoproteinhemagglutinin(HA)helpstheinfluenzaAvirustoevadethehostimmunesystembyantigenicvariationandisamajordrivingforceforviralevolution.Inthisstudy,theselectionpressureonHAofH5N1influenzaAviruswasanalyzedusingbioinformaticsalgorithms.Mostoftheidentifiedpositiveselection(PS)siteswerefoundtobewithinoradjacenttoepitopesites.SomeoftheidentifiedPSsitesareconsistentwithpreviousexperimentalstudies,providingfurthersupporttothebiologicalsignificanceofourfindings.ThehighestfrequencyofPSsiteswasobservedinrecentstrainsisolatedduring2005–2007.PhylogeneticanalysiswasalsoconductedonHAsequencesfromvarioushosts.Viraldriftisalmostsimilarinbothavianandhumanspecieswithaprogressivetrendovertheyears.OurstudyreportsnewmutationsinfunctionalregionsofHAthatmightprovidemarkersforvaccinedesignorcanbeusedtopredictisolatesofpandemicpotential.
简介:提炼俄语的小麦蚜虫(RWA),Diuraphisnoxia(Mordvilko)(Homoptera:Aphididae),是小谷物的一个主要害虫。就象喂植物的蚜虫一般来说,在RWA和主人植物之间的相互作用被管理在昆虫方面上,由在口水的蛋白质和酶。在这个工作,我们在编码RWA唾液的腺的蛋白质和酶的抄本检验了顺序变化。我们在1和2份使用的教材从豌豆蚜虫orthologs导出的RWA遗传因子型进行了反向的抄写聚合酶链反应,并且克隆17个通常认为的唾液的腺抄本的区域。为四个抄本,我们没在在二遗传因子型之间的序列观察差别。为另外的13个抄本,例如编码蔗糖酶,trehalase和蛋白质C002的抄本,在每遗传因子型以内并且在二遗传因子型之间,大量变化被观察。通常,二遗传因子型分享了仅仅一变体,它典型地是在两遗传因子型的最普通的变体。大多数抄本比同义的codon在他们的变体之中变化的有非同义的更多。我们的结果为区分二遗传因子型和卓见进他们的进化提供可能的分子的标记。
简介:γ-AminobutyricacidandGABAergicreceptorswerepreviouslyreportedtobedistributedinreproductivesystemsbesidesCNSandpredictedtoparticipateinthemodulationoftesticularfunction.γ-Aminobutyricacidtransporterwasimplicatedtobeinvolvedinthisprocess.However,thepotentialroleofγ-aminobutyrictransporterintestishasnotbeenexplored.Inthisstudy,weinvestigatedtheexistenceofmouseγ-aminobutyricacidtransportersubtypeI(mGAT1)intestis.Wild-typeandtransgenicmice,whichoverexpressingmGAT1inavarietyoftissues,especiallyintestis,wereprimarilystudiedtoapproachtheprofileofmGAT1intestis.MicewithoverexpressedmGAT1developnormallybutwithreducedmassandsizeoftestisascomparedwithwild-type.Testicularmorphologyoftransgenicmiceexhibitedovertabnormalitiesincludingfocaldamageofthespermatogenicepitheliumaccompaniedbycapillariesproliferationandincreaseddiameterofseminiferoustubuleslumen.Reducednumberofspermatidswasalsofoundinsomeseminiferoustubules.OurresultsclearlydemonstratethepresenceofGAT1inmousetestisandimplythatGAT1ispossiblyinvolvedintesticularfunction.
简介:目的建立人结肠癌多药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌多药耐受性动物模型,利用VCR和CTX的肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-timePCR和West-ernblotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因和蛋白的表达。结果肿瘤抑制实验结果显示,MDR和敏感型结肠癌模型的肿瘤生长速度差异不显著,MDR结肠癌动物模型对于VCR和CTX的耐药性均有较大程度的提高;表达分析结果显示,人结肠癌MDR动物模型的P-gp/MDR1表达水平有较大提高,而MRP1表达没有显著变化。结论人结肠癌多药耐受性动物模型具有较好的多药耐受性,其多药耐受性表型主要是由于P-gp/MDR1过量表达所导致。
简介:糖苷水解酶第一家族(GH1)β-葡萄糖苷酶(BGL1)有葡萄糖耐受性,进口端位点对酶活性及葡萄糖耐受性有很大影响,但具体作用机制尚不清楚。对嗜热革节孢GH1BGL1进口端的W168、L173、F348、W349、C169、F180、D237、Y179、A260、H307、N335和E437这12个氨基酸残基进行定点突变,将突变酶与野生酶(WT)在毕赤酵母中表达,表达产物纯化后进行酶活性和葡萄糖耐受性测定。与WT相比,所有突变酶活性均有所降低,其中W168H、N335F和W349G几乎丧失活性。突变F180H、D237S、A260N和H307Y的Km低于WT,所有突变的kcat都降低。除L173Q外,其余突变都保持葡萄糖耐受性,在高浓度(400mmol/L)葡萄糖时,Y179F和D237S酶活受到显著抑制。本研究表明,进口端位点对酶活性及葡萄糖耐受性均具有一定影响,催化活性通道的结构特异性可能是葡萄糖耐受机制。
简介:人的免疫不全病毒类型1(HIV-1)Vpr导致房间死亡在哺乳动物并且分裂酵母房间,建议那Vpr可以影响一个保存细胞的过程。然而,导致Vpr的酵母房间死亡是否在哺乳动物的房间模仿调停Vpr的apoptosis,是不清楚的。我们最近识别了很多Vprsuppressors不仅在分裂酵母压制导致Vpr的房间死亡,而且在哺乳动物的房间堵住导致Vpr的apoptosis。这些调查结果建议在酵母的导致Vpr的房间死亡可以类似于一些哺乳动物的房间的apoptotic过程。这研究的目标是为apoptosis的未来研究开发并且验证一个分裂酵母模型系统。类似于在哺乳动物的房间的导致Vpr的apoptosis,我们这里证明在分裂酵母的Vpr支持phosphatidylserine外表表现并且导致线粒体的hyperpolarization,导致mitochondrial膜潜力的变化。而且,反应的氧种类(ROS)的Vpr扳机生产,显示象apoptotic一样细胞死亡可能被ROS调停。有趣地,Vpr在可以为在分裂酵母测量象apoptotic一样过程提供一个简单标记的线粒体导致唯一的词法变化。验证这可能性,我们测试了二Vprsuppressors(EF2和Hsp16)除了最新识别的Vprsuppressor(Skp1)在哺乳动物的房间压制导致Vpr的apoptosis。所有三蛋白质废除了房间死亡由Vpr调停了并且在酵母房间恢复了正常mitochondrial形态学。在结论,在分裂酵母的导致Vpr的房间死亡类似于哺乳动物的apoptotic过程。分裂酵母可以潜在地因此为Vpr和另外的proapoptotic代理人导致的象apoptotic一样过程的未来学习被用作一个简单模型有机体。
简介:Insulinsecretorygranules(ISGs),agroupofdistinguishingorganellesinpancreaticβcells,areresponsibleforthestorageandsecretionofinsulintomaintainbloodglucosehomeostasis.ThemolecularmechanismsofISGbiogenesis,maturation,transportation,andexocytosisarestilllargelyunknownbecausetheproteinsinvolvedinthesedistinctstepshavenotbeenfullyidentified.Subcellularfractionationbydensitygradientcentrifugationhasbeensuccessfullyemployedtoanalyzetheproteomesofnumerousorganelles.However,useofthismethodtoelucidatetheISGproteomeislimitedbyco-fractionatedcontaminantsbecause1SGsareverydynamicandhaveabundantexchangesorcontactswithotherorganelles,suchastheGolgiapparatus,lysosomes,andendosomes.Inthisstudy,wedevelopedanewstrategyforidentifyingISGproteinsbyproteincorrelationprofiling(PCP)-basedproteomics,whichincludedISGpurificationbyOptiPrepdensitygradientcentrifugation,label-freequantitativeproteome,andidentificationofISGproteinsbycorrelatingfractionationprofilesbetweencandidatesandknownISGmarkers.Usingthisapproach,wewereabletoidentify81ISGproteins.Amongthem,TM9SF3,anine-transmembraneprotein,wasconsideredahighconfidenceISGcandidateproteinhighlightedinthePCPnetwork.FurtherbiochemicalandimmunofluorescenceassaysindicatedthatTMgSF3localizedinISGs,suggestingthatitisapotentialnewISGmarker.
简介:以夏大豆杂交种杂优豆1号及亲本(W931A和WR016)为材料,进行了光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、胞间CO2值、水分利用效率(WUE)、光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)、光合势等光合特性的测定,以探究杂优豆1号光合特性方面的杂种优势规律,为大豆的高光效育种提供理论指导。结果表明:杂优豆1号的净光合速率日变化呈现单峰曲线,在8:00时净光合速率显著高于W931A和WR016;杂优豆1号与亲本相比具有较低的光补偿点和较高的光饱和点,从而说明杂优豆1号较强利用强光和弱光的能力;从群体光合势分析,杂优豆1号的叶面积指数和光合势在盛花期、结荚期、鼓粒期3个不同时期都显著高于W931A和WR016,从盛花期到结荚期、结荚期到鼓粒期叶面积指数和光合势都呈现逐渐上升的趋势。杂优豆1号较强的光利用能力、较高的叶面积指数和光合势有利于产量的提高。