简介：目的对表达hTERT基因的大鼠骨髓间充质干细胞（Bonemesenchymalstemcells,BMSCs）进行成瘤风险评估及类肝样细胞分化能力的鉴定.方法将表达hTERT基因的大鼠BMSCs进行裸鼠致瘤试验评估成瘤风险,通过序贯法诱导成肝分化,于诱导后观察细胞形态变化、检测ALB和AFP的表达、糖原染色鉴定糖原储备能力.结果裸鼠致瘤实验提示表达hTERT基因的大鼠BMSCs无成瘤风险.成肝诱导后,细胞形态逐渐变为圆形;ALB仅在诱导第21天部分阳性表达,AFP在诱导第14天起阳性表达;糖原染色阳性.结论表达hTERT基因的大鼠BMSCs无致瘤风险,且具有类肝样细胞的分化能力.

简介：1、蛋白名称都按照国际文献常用的拼写法，使读者一看就懂。名称中的英文字母一般较多地采用英文大写正体字母拼写，例如BCL-2蛋白，不要写成bcl-2或Bcl-2蛋白；又例如TfR2蛋白（转铁蛋白受体2），按国际文献的惯例，其名称拼写中兼有大小写字母。

简介：摘要目的研究分析荧光原位杂交技术在判断异基因造血干细胞移植预后中的应用效果，为异基因造血干细胞移植预后的有效判断提供相应的借鉴以及参考。方法选取本院2011年11月至2012年11月的76例异基因外周血干细胞移植、脐血移植、骨髓移植、多种干细胞联合移植标本。收集标准为融合基因（BCR/ABL、AML1/ETO）阳性表达，受体的性别需要不一致，或者是满足上述两项条件的，将这些移植标本分为同性别间干细胞移植、不同性别间干细胞移植两个组。同性别间干细胞移植者使用相应的基因探针进行检查。不同性别间干细胞移植者检测需要使用基因探针或者是联合使用XY染色体探针。结果在53例异性allo-HSCT的受者中有，31例供、受者骨髓嵌合率≥99.00%，16例早期嵌合率偏低在81.32%到97.68%，经过随访，嵌合率有了明显的上升，上升到≥99.00%，微量残留病灶(MRD)呈阴性,在接受移植之后，之前的病不再复发。6例早期嵌合率偏低分为为99.00%至100.00%,但是出现逐渐下降的趋势，其中MRD比例呈上升趋势。23例供、受者性别相同allo-HSCT受者中有16例在进行移植之后没有检测到之前的基因异常情况。3例被检出有少量的残留病灶，在接受免疫抑制剂进行减量治疗或者供者淋巴细胞输注治疗之后明显下降，现在还在缓解治疗中。4例在进行移植之后3个月左右出现原来的基因异常情况，在进行复查的时候发现为原病复发骨髓。结论荧光原位杂交技术操作简单、快捷、准确性高并且还存在很强的特异性，在判断异基因造血干细胞移植预后中，具有非常好的应用效果。

简介：根据苎麻转录组测序中的PCS基因片段,利用RT-PCR结合RACE技术从中苎1号中克隆获得了该基因的全长cDNA序列,命名为BnPCS1。该基因的cDNA序列全长为1956bp,其中开放读码框长1512bp,编码503个氨基酸,预测其分子量和等电点分别为56.02kD和7.01。与长喙田菁（ACT87974）、百脉根（Q2TSC7）、狼牙刺（AFM38979）、荷花（BAN08523）和杜梨（AEY68568）的PCS氨基酸序列相似性分别为74%、73%、75%、73%和77%。荧光定量PCR分析表明,BnPCS1在根、茎、茎尖、幼叶、成熟叶中均有表达,其中在成熟叶中的表达量最高,茎中表达量最低,并且该基因受镉和ABA诱导上调表达。BnPCS1基因的克隆将为苎麻抗重金属分子育种和进一步的功能分析奠定基础。

简介：目的：研究武汉地区人群HPA-1-17基因的多态性及其表达频率,建立HPA基因型资料库。方法：采用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）对284名健康的已加入中华骨髓库的血小板捐献者HPA基因进行分型,计算基因型频率、基因频率。结果：武汉地区健康血小板捐献者中检测出HPA-a基因中的1a-17a基因;各基因独立的分布频率中,HPA-1a（98.77%）、2a（97.01%）、3a（59.68%）、4a（99.82%）、5a（99.82%）、6a（98.42%）、15a（49.47%）,HPA-7a-14a、16a和17a均为100%。仅检测出HPA-b基因中HPA-1b（1.23%）、2b（2.99%）、3b（40.32%）、4b（0.18%）、5b（0.18%）、6b（1.58%）、15b（50.53%）,未检测出HPA-7b-14b、16b和17b。文中调查和分析了HPA基因组合型及其频率,发现武汉地区HPA基因有28种组合型,其中仅有3种基因组合型频率〉10%（44%）,另外25种基因组合型的频率均〈9%（56%）。在与国内外不同地区人群HPA基因多态性分布的比较分析中发现,武汉地区人群中HPA基因频率与上海、成都地区人群没有差异性,与美国、英国、欧洲人群有较有明显差异,而与日本人群的差异较小。结论：HPA-3、15系统具有多态性,在随机血小板输注中,供受者HPA-3、HPA-15系统不配合的机会分别为36.54%、37.50%,是HPA配合性输注关注重点。HPA基因多态性研究数据有利于指导地区性血小板供者库库容的设计,配合临床开展选择适合性血小板输注具有重要意义。

简介：【目的】克隆黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列，了解牛Sycp2基因序列特征和组织表达特征，分析睾丸组织中Sycp2基因的表达水平。【方法】采用电子克隆和克隆测序技术获得黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列，利用生物信息学方法分析其序列特征；采用RT—PCR分析牛Sycp2基因的组织表达特征：

简介：目的建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列，设计特异引物和TaqMan—MGB探针，建立和优化反应体系，用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性，用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线，对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验，并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较，配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异。结果采用TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40min，与25种非目标菌无交叉反应，仅对克罗诺杆菌有特异性扩增；所构建方法线性关系良好，相关系数r2=0．999，扩增效率为99．972％，对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝／反应、3．8和38cfu／ml；与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比，TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR的Q值更小、△Rn值更高，灵敏度和分辨率差异均有统计学意义（Ct：t=-14．406，P〈0．01；△Rn：t：14．230，P〈0．01）。结论本研究建立的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因，可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定，具有较大的的应用价值和推广价值。

简介：摘要目的观察和研究新生儿肺炎病原学分析及革兰阴性菌耐药基因，指导临床合理选用抗生素治疗。方法选择2011年6月～2013年12月对临床诊断为感染性肺炎的新生儿患者，无菌取痰进行普通培养和高渗培养，用法国生物梅里埃系统鉴定细菌，以K-B法进行药敏分析。结果160株革兰阴性病原菌主要分布为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、嗜麦芽寡养食单胞菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌等。药敏结果显示对β-内酰胺类抗菌药物（加酶抑制剂除外）普遍耐药，对喹诺酮类和氨基糖苷类较敏感。结论新生儿感染性肺炎分离出的革兰阴性杆菌耐药情况严重，临床应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物，避免诱导型耐药菌的产生。

简介：目的克隆版纳微型猪近交系（BMI）不育和可育公猪TDRP1基因,分析其序列及mRNA表达水平上的差异,预测其蛋白质功能,并检测该基因在可育公猪中的组织表达分布情况。方法以猪NM_001198925序列为模板,设计特异引物,采用RT-PCR方法结合测序获得TDRP1的cDNA序列并进行生物信息学分析;采用半定量PCR方法检测TDRP1在不育和可育公猪睾丸中的表达规律,分析该基因在可育公猪17种组织中的表达特征。结果获得了BMITDRP1基因的编码区序列（GenBank登录号：KJ186786）,生物信息学分析表明其编码186个氨基酸,蛋白质相对分子质量（Mw）为20.49×10^3,等电点（pI）为5.86,无信号肽,有94.1%的概率位于细胞核,含有1个亮氨酸富集的核输出信号。不同物种的氨基酸序列比对表明猪TDRP1与人、恒河猴、小鼠和大鼠等哺乳动物的TDRP1相似性在73%-83.2%之间,其中与人、恒河猴的相似性较高。mRNA表达分析表明,TDRP1在BMI不育和可育公猪睾丸间表达水平差异无显著,在精囊腺和前列腺中高表达,在睾丸和小脑中中度表达,在大脑和肾脏中低表达,在其余组织中不表达。结论成功克隆了BMITDRP1基因的全长编码区序列并发现了BMI特有的2个SNP位点;TDRP1基因在BMI不育和可育公猪间序列完全一致,睾丸mRNA表达水平差异无显著性,多组织转录谱分析表明该基因存在明显的组织差异表达现象,在精囊腺和前列腺中有较高表达量,为深入研究TDRP1基因在精子发生方面的作用奠定了基础。

简介：目的：了解大连地区非综合征性耳聋者及直系亲属耳聋基因突变情况。方法收集大连地区非综合征型耳聋患者及部分直系亲属共108例（患者98例，亲属10人），行纯音测听、声导抗测听及脑干诱发电位等听功能检查,采集末梢血用Iontorrent半导体测序方法，检测GJB2、GJB3、GJB6和SLC26A4基因的全外显子和线粒体12SrRNA基因的2个突变位点。结果病理性基因突变在108例受检者中检出率为41.7%（45/108）,98例患者中检出率为38.8%（38/98），涉及3个基因23个突变位点，发现1例非常罕见的SLC26A4IVS15-2A＆gt;T剪接位点杂合突变。38例患者中34例（89.5%，34/38）为单基因突变，其中13例为复合杂合突变、6例为纯合突变；另外4例（10.5%，4/38）有两个基因同时发生突变。38例患者的42例次基因突变中，27例次（64.3%,27/42）为GJB2基因突变，12例次（28.6%，12/42）为SLC26A4基因突变，3例次（7.1%，3/42）为GJB3基因突变，没有检测到GJB6、12SrRNA基因突变；听力筛查不通过、经ABR测试为中重度感音神经性耳聋患儿33例，15例（45.5%，15/33）检测到病理性基因突变；成人散发性双耳感音神经性耳聋患者62例，病理性基因突变检出20例（32.3%，20/62）。结论大连地区98例非综合征性耳聋者，超过1/3检测到病理性耳聋基因突变，并以GJB2基因突变最常见。听力筛查通过的高危儿童及原因不明的双侧感音神经性耳聋者，实施热点致聋基因测序可以提高耳聋的病因诊断率。

简介：摘要目的探讨γ干扰素(IFN－γ)基因多态性与弥漫性毒性甲状腺肿(Gravesdisease，GD)发病易感性的关系。方法选择汉族GD患者和正常人各100例，采用序列特异性引物聚合酶链反应检测等位基因和基因型。结果GD组IFN－γ基因+874位点A等位基因的频率明显高于正常对照组(83.5%对70.5%，P<0.05)；GD组IFN－γ+874AA基因型频率显著高于对照组(72%对51%，P<0.05)。结论在中国汉族人群中，GD患者和正常人之间存在IFN－γ基因+874位点A等位基因分布的差异。IFN－γ基因+874位点单核苷酸多态性可能是GD的易感因素。

简介：为获得快速生长的泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clariasgariepinus)生长激素(growthhormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区,构建一个长为2418bp的GH重组基因DPRK。首先,构建了以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因的重组表达载体pAF(pβ-actinpromoter-EGFP),然后转染DF1真核细胞,同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼(Daniorerio)和泥鳅的受精卵中,以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次,将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示:泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达;泥鳅的荧光表达率(78.44%)显著高于斑马鱼(29.62%);泥鳅受精卵显微注射DPRK20d后,在mRNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性,且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达,为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。

简介：摘要目的探讨冠心病患者PCI术后根据CYP2C19酶基因多态性给予氯吡格雷、阿司匹林联合抗血小板治疗后血小板聚集率变化及CR的发生情况。方法所有入选患者入院后立即服用300mg负荷量的阿司匹林、氯吡格雷，并于次日起每日服用100mg阿司匹林、75mg氯吡格雷，尽早行PCI治疗及CYP2C19酶基因多态性检测，根据CYP2C19酶基因多态性检测分快代谢型EM组、中间代谢型IM组、慢代谢型PM组，所有入选患者分别于服用氯吡格雷前及服用维持量75mg,5天后采用比浊法测定ADP诱导的血小板聚集率。结果慢代谢型、中间代谢型、快代谢型服药前的血小板聚集抑制率分别为17.5%、20.6%、21.9%（P＞0.05）差异无统计学意义，服药后CR发生率分别为42.86%、18.97%、12.96%（P＜0.05）差异有统计学意义。结论CYP2C19基因的多态性尤其是CYP2C19*2的缺失是导致氯吡格雷抗血小板效应减弱、氯吡格雷抵抗发生率高的重要危险因素。

简介：摘要目的探讨含钾通道四聚化结构域15（KCTD15）基因单核苷酸多态性位点rs29941与壮族儿童单纯性肥胖的相关性。方法对200名柳州某区小学学龄前儿童（年龄均小于7岁）分别检测身高和体重，计算体重指数。利用SNaPshot技术分析100例单纯性肥胖儿童和100例健康对照儿童的KCTD15基因型及等位基因频率分布状况。结果肥胖组和健康对照组KCTD15基因T/T型、T/C型及C/C型基因型频率分别为60.7%、34.6%、4.7%和55.4%、39.6%、5.0%，两组等位基因频率分别为78.0%、22.0%和75.2%、24.8%，C等位基因的OR值为1.169，95%的可信区间为0.742-1.842。两组基因型与等位基因频率差异均无统计学意义（P>0.05）；肥胖组的体重指数水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。而肥胖组中各基因型间体重指数水平的差异没有统计学意义（P>0.05）。经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验，其等位基因在两种人群中的分布符合遗传平衡，说明样本具有群体代表性。而该位点的等位基因及基因型频率在所收集的肥胖组与对照组样本中分布未见显著异常。结论KCTD15基因rs29941位点多态性与广西壮族学龄前儿童单纯性肥胖无相关性。

简介：【背景】转基因抗除草剂水稻种植将导致连年连续使用单一目标除草剂,势必会影响杂草群落结构的变化,但其变化规律至今还不十分明确。【方法】于2011~2013年,连续3年在直播种植抗草铵膦转基因Bar68-1水稻田中,使用灭生性除草剂草铵膦,持续观察期间杂草群落结构变化,并与常规选择性除草剂丙草胺—苄嘧磺隆（丙·苄）的应用情况进行对比,以揭示由于种植转基因抗除草剂水稻而使用单一除草剂对稻田杂草群落结构的影响。【结果】草铵膦和丙·苄连续使用后,杂草的物种丰富度和总杂草密度均逐年显著降低。随草铵膦使用年限增加,控草效果持续提高并达到优良水平,而常规选择性除草剂丙·苄的长期使用,致使多年生杂草双穗雀稗演替为群落的优势种,杂草密度呈逐年增加的趋势,导致生物多样性指数显著降低。【结论与意义】抗除草剂转基因水稻种植,在抗性杂草演化之前,不会因单一灭生性除草剂的应用而导致杂草群落迅速朝不良方向演替。长期的群落演替还需要进一步研究观察。

简介：乳铁蛋白（Lactoferrin,LF）是牛子宫分泌物中一种重要的抗菌化合物,LF等位基因多态性会影响子宫感染的敏感性和耐药性。本次试验以89头荷斯坦奶牛为研究对象,通过AS-PCR方法和基因测序技术研究了牛LF基因5’非编码区的SNPs。研究结果表明,感染疾病组和未感染疾病组的LF基因5’-UTR扩增片段均发生G→C碱基突变。统计分析表明LF基因5’UTR的SNP与子宫感染没有显著相关性（P〉0.05）,CC基因型个体和CG基因型个体在输精次数和空怀天数水平上显著低于GG基因型个体（P〈0.05）,此外,产后第一次配种时间在3种基因型间没有显著差异（P〉0.05）。

简介：目的：探讨胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901的多药耐药相关基因的表达与其侵袭转移能力的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901的多药耐药相关基因（包括ABCB1、MMP2、CDH1、CD44）的mRNA表达水平。采用细胞划痕实验、Transwell迁徙实验评价两株胃癌细胞的侵袭转移能力，进而探讨胃癌细胞多药耐药相关基因的表达与侵袭转移能力的关系。结果荧光定量PCR实验发现胃癌细胞株BGC-823的ABCB1、CDH1、CD44基因表达较SGC-7901高，而MMP2基因的表达在SGC-7901中较高。细胞划痕实验及Transwell迁徙实验显示胃癌细胞株BGC-823的迁徙能力比SGC-7901强。结论胃癌细胞的多药耐药与侵袭转移有一定的关系，CD44的高表达在胃癌细胞的侵袭转移中可能起主要作用。

简介：很多人对索尼的制播系统Sonaps和非，线性编辑系统XpriNS可能并不陌生，因为世界范围r8已经有相当数量的权威电视台采用了这两个系统，如美国Belo电视台集团、瑞士SRG集团等。

简介：摘要目的构建并包装大鼠Six2基因过表达慢病毒及建立稳定过表达Six2基因的MES23.5细胞株。方法采用RT-PCR方法扩增Six2基因片段并将其连接于含有嘌呤霉素抗性的pLV-CS2.0-N-HA载体质粒，采用慢病毒包装四质粒系统（pRRE/pVSVG/pREV/pLV），用转染试剂Lipofectamine2000将四质粒按一定比例转染293T细胞；收集慢病毒上清并感染MES23.5细胞株，嘌呤霉素筛选稳定表达Six2的MES23.5细胞株，Westernblotting检测Six2蛋白的表达。结果限制性内切酶酶切结果表明在900bp处有一明显条带;Six2测序结果显示序列与genebank上的序列完全一致；嘌呤霉素筛选病毒感染的MES23.5细胞，传代筛选第5代后细胞几乎无死亡现象；Westernblotting结果显示，在分子量为23.4kDa处有相应条带。结论成功构建过表达Six2基因的慢病毒表达载体；得到了较高滴度的病毒悬液；建成稳定表达Six2基因的MES23.5细胞株，此研究为进一步探讨Six2基因的功能提供了良好的研究工具。

简介：文化是一个民族的血脉基因,是一支军队的精神旗帜。军校文化是军事人才成长的空气和土壤,建设什么样的校园文化、用什么样的文化育人,关系培养什么样的人才、锻造什么样的队伍。培养能打仗、打胜仗高素质新型军事人才,必须大力弘扬革命英雄主义精神,精心培植军校英雄文化沃土,通过英雄文化的熏陶,不断催生军校学员爱党报国的坚定信念、励志精武的拼搏精神、敢打必胜的战斗豪情和英勇果敢的过硬作风,使军校真正成为新型优秀军事人才锻炼的熔炉和成长的摇篮。