简介：摘要色素失禁症(IP)是一种由IKBKG基因突变引起的影响皮肤、牙齿、眼睛和中枢神经系统的X-连锁显性遗传性疾病，95%患者为女性。皮疹是色素失禁症的突出表现和主要诊断依据，而皮肤外损害往往是影响IP预后的因素。近年来更新了色素失禁症的诊断标准，而Sanger测序仍然是检测和分析IKBKG基因突变的金标准。临床上发现IP患者应全面评估，如发现眼视网膜病变和神经系统损害应给予积极治疗。

简介：摘要γδT细胞是表达γ链和δ链的一群特殊T细胞，是参与天然免疫的重要成分，兼有天然免疫和获得性免疫特性。其在人外周血中数量较少，但功能强大，在机体的免疫调节、免疫保护、免疫监视、抗感染、细胞毒等生理功能方面具有重要作用。本文对γδΤ细胞的起源、发育与分布、生物学与免疫学功能及其与HIV-1感染的相互作用机制进行综述。

简介：摘要目的探讨沉默及过表达前列腺肿瘤过表达1(PTOV1)后对食管鳞癌细胞系Ec9706和TE-1细胞增殖和迁移能力的影响，以探究PTOV1在食管癌发生发展中的作用。方法体外培养食管鳞癌细胞系。使用慢病毒转染来敲低Ec9706细胞中PTOV1表达量，上调TE-1细胞系中PTOV1表达量，并使用Western blot检验上述细胞系中PTOV1的表达。分别采用划痕实验、Transwell细胞迁移实验、CCK8实验和集落形成实验检测不同PTOV1表达水平的同种食管鳞癌细胞增殖和迁移能力的差异。结果经Western blot检测，Ec9706细胞经慢病毒转染后PTOV1表达较空载体组显著降低，TE-1经过慢病毒转染后PTOV1表达较空载体组显著升高，证实转染成功。沉默Ec9706细胞系中PTOV1的表达后，细胞的迁移率、穿膜细胞数、增殖能力、细胞集落形成率均较空载体组下降(P<0.05)。而过表达TE-1细胞系中PTOV1后，细胞的迁移率、穿膜细胞数、增殖能力、细胞集落形成率均较空载体组增加(P<0.05)。结论PTOV1可促进食管鳞癌细胞系的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨沉默及过表达前列腺肿瘤过表达1(PTOV1)后对食管鳞癌细胞系Ec9706和TE-1细胞增殖和迁移能力的影响，以探究PTOV1在食管癌发生发展中的作用。方法体外培养食管鳞癌细胞系。使用慢病毒转染来敲低Ec9706细胞中PTOV1表达量，上调TE-1细胞系中PTOV1表达量，并使用Western blot检验上述细胞系中PTOV1的表达。分别采用划痕实验、Transwell细胞迁移实验、CCK8实验和集落形成实验检测不同PTOV1表达水平的同种食管鳞癌细胞增殖和迁移能力的差异。结果经Western blot检测，Ec9706细胞经慢病毒转染后PTOV1表达较空载体组显著降低，TE-1经过慢病毒转染后PTOV1表达较空载体组显著升高，证实转染成功。沉默Ec9706细胞系中PTOV1的表达后，细胞的迁移率、穿膜细胞数、增殖能力、细胞集落形成率均较空载体组下降(P<0.05)。而过表达TE-1细胞系中PTOV1后，细胞的迁移率、穿膜细胞数、增殖能力、细胞集落形成率均较空载体组增加(P<0.05)。结论PTOV1可促进食管鳞癌细胞系的增殖和迁移能力。

简介：摘要放疗是晚期肿瘤的主要治疗手段，然而，由于肿瘤耐受和抵抗的出现，其治疗效果不佳。因此，纠正肿瘤放疗抵抗或提高其放疗敏感性成为迫切需要解决的问题。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP) 1是一种功能丰富的核蛋白，鉴于其在染色质结构调节和DNA损伤修复等细胞过程中的重要作用，PARP-1被认为是最具有潜力的一种放射增敏靶点。笔者就靶向PARP-1调控肿瘤细胞放射敏感性的研究进展作一综述。

简介：摘要目的研究乙苯染毒后耳蜗毛细胞株（HEI-OC1）细胞增殖及氧化指标的变化。方法于2019年7至12月，设置乙苯浓度分别为0、30、60、90、300、600、900 μmol/L和3、6、9、10 mmol/L，共11个浓度组，用CCK-8法测定乙苯染毒24 h后HEI-OC1细胞增殖活性；以0、1、2、4、8、16、32、64 mmol/L乙苯处理细胞24 h，计算乙苯的半数抑制浓度。用0、6、9和12 mmol/L乙苯染毒HEI-OC1细胞24 h后，测定细胞内丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力。结果与0 mmol/L浓度组比较，6、9、12 mmol/L浓度HEI-OC1细胞存活率明显降低（P<0.01）。乙苯对HEI-OC1细胞的半数抑制浓度为12.86 mmol/L（R2=99.05）。不同浓度组（0、6、9、12 mmol/L）乙苯处理HEI-OC1细胞24 h，MDA含量、SOD和GSH-Px活力差异均有统计学意义（F=65.11、6.48、22.85，P<0.05）；与0 mmol/L浓度组比较，9、12 mmol/L浓度组HEI-OC1细胞MDA含量明显升高，12 mmol/L浓度组SOD活力明显降低，6、12 mmol/L浓度组GSH-Px活力明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论乙苯可以抑制HEI-OC1细胞增殖，引起细胞氧化损伤。

简介：摘要

简介：摘要目的探讨微小RNA-155(miR-155)在转化生长因子β2(TGF-β2)诱导的人视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化过程中的作用及其机制。方法取视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞系分为对照组和TGF-β2组，分别用DMEM培养液和含10 ng/ml TGF-β2的DMEM培养液培养，另取ARPE-19细胞系分为miR-155抑制剂组和miR-155阴性对照组，分别用含miR-155抑制剂和miR-155阴性对照序列转染细胞，并在含10 ng/ml TGF-β2的DMEM培养液中培养，于培养后48 h采用逆转录PCR法检测细胞中miR-155表达，采用细胞划痕实验、Transwell小室实验分别检测细胞迁移、侵袭能力，采用Western blot法检测细胞中磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt及上皮间质化标志物钙黏蛋白E(E-cad)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、F-肌动蛋白(F-actin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白1(FN-l)和vimentin蛋白表达。利用靶基因预测库预测miR-155靶基因，荧光素酶报告载体鉴定靶基因。结果培养后48 h，对照组细胞状态良好，细胞间连接紧密，形状规则。TGF-β2组细胞呈较明显的梭形或纺锤体形状，多数细胞表现为纤维状，细胞排列松散。TGF-β2组细胞miR-155相对表达量为0.92±0.14，明显高于对照组的0.35±0.06，差异有统计学意义(t＝7.242，P＝0.003)；miR-155抑制剂组细胞miR-155相对表达量为0.21±0.03，明显低于miR-155阴性对照组的0.98±0.09，差异有统计学意义(t＝12.421，P<0.01)。TGF-β2组细胞迁移率明显高于对照组，穿过基底膜的细胞数明显多于对照组；miR-155阴性对照组细胞迁移率明显高于miR-155抑制剂组，穿过基底膜的细胞数明显多于miR-155抑制剂组，差异均有统计学意义(均P<0.01)。与对照组比较，TGF-β2组细胞PTEN蛋白相对表达量降低，PI3K相对表达量升高，p-Akt/Akt比值升高，上皮细胞标志蛋白E-cad、ZO-1、F-actin相对表达量降低，间质细胞标志蛋白α-SMA、FN-l、vimentin相对表达量升高，差异均有统计学意义(均P<0.01)。与miR-155阴性对照组比较，miR-155抑制剂组细胞E-cad、ZO-1、F-actin上皮细胞标志蛋白相对表达量升高，α-SMA、FN-l、vimentin间质细胞标志蛋白相对表达量降低，PTEN蛋白相对表达量升高，PI3K相对表达量降低，p-Akt/Akt比值下调，差异均有统计学意义(均P<0.01))。靶基因预测库预测及荧光素酶报告载体鉴定证实PTEN为miR-155下游靶基因。结论miR-155在TGF-β2诱导ARPE-19细胞上皮-间质转化的过程中具有促进作用，其作用机制可能与抑制靶基因PTEN的表达，刺激PI3K/Akt信号通路活化有关。

简介：摘要目的探讨miR-145-5p对胶质细胞源性神经营养因子受体（glial cell-derived neurotrophic factor receptor，GFR）α1表达的调控及其与先天性巨结肠（Hirschsprung's disease，HSCR）的关系。方法选择2016年3月至2018年6月湖南省儿童医院新生儿外科收治的HSCR患儿巨结肠根治术后痉挛段结肠组织为HSCR组，同期新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）患儿手术切除坏死肠段两端正常结肠组织为NEC组作为对照，进行前瞻性研究。采用实时定量聚合酶链反应检测两组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1表达水平，荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系；采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后miR-145-5p及GFRα1表达水平，CCK8法检测转染后SH-SY5Y细胞活力。结果HSCR组24例，NEC组18例。HSCR组miR-145-5p mRNA水平明显高于NEC组［（5.62±2.04）比（1.11±0.48）］，GFRα1 mRNA水平明显低于NEC组［（0.39±0.18）比（1.00±0.37）］，差异有统计学意义（P<0.01），且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平成负相关（r=-0.676，P<0.01）。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后GFRα1的表达水平明显降低（P<0.01），SH-SY5Y细胞活力下降。结论GFRα1是miR-145-5p的靶基因，HSCR患儿病变结肠组织中GFRα1低表达可能与miR-145-5p高表达有关。

简介：摘要目的研究悬浮去白细胞红细胞输注对骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血血红素加氧酶-1（HO-1）的表达及T淋巴细胞亚群的影响。方法选取2016年1月至2019年12月山东省血液中心治疗的MDS患者50例作为研究对象，根据血液成分输注不同随机分为观察组和对照组，每组25例，观察组给予悬浮去白细胞红细胞输注治疗，对照组给予洗涤红细胞输注治疗，采用酶联免疫吸附法分别于输血前后测定两组患者血清HO-1、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平，并采用流式细胞术测定T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平。结果两组患者输血前血清HO-1、IL-6及TNF-α水平比较差异无统计学意义（P>0.05）；观察组与对照组输血后7 d比较血清IL-6和TNF-α显著降低[（152.10 ± 21.89） ng/L比（201.14 ± 28.90） ng/L、（1.34 ± 0.45）ng/L比（2.89 ± 1.01）ng/L]，而HO-1显著升高[（78.91 ± 15.74）μg/L比　（58.99 ± 13.33） μg/L]，差异有统计学意义（P<0.05）；两组患者输血前免疫功能比较差异无统计学意义（P>0.05）；经输血后，观察组患者CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平与对照组比较均显著升高[（49.11 ± 19.13）%比（47.13 ± 12.84）%、（25.23 ± 10.80）%比（21.09 ± 12.28）%、（24.74 ± 10.84）%比（21.88 ± 11.18）%、1.02 ± 0.25比0.96 ± 0.20]，差异有统计学意义（P<0.05）。结论悬浮去白细胞红细胞输注能够提高MDS患者外周血HO-1的表达水平及免疫功能。

简介：摘要目的研究悬浮去白细胞红细胞输注对骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血血红素加氧酶-1（HO-1）的表达及T淋巴细胞亚群的影响。方法选取2016年1月至2019年12月山东省血液中心治疗的MDS患者50例作为研究对象，根据血液成分输注不同随机分为观察组和对照组，每组25例，观察组给予悬浮去白细胞红细胞输注治疗，对照组给予洗涤红细胞输注治疗，采用酶联免疫吸附法分别于输血前后测定两组患者血清HO-1、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平，并采用流式细胞术测定T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平。结果两组患者输血前血清HO-1、IL-6及TNF-α水平比较差异无统计学意义（P>0.05）；观察组与对照组输血后7 d比较血清IL-6和TNF-α显著降低[（152.10 ± 21.89） ng/L比（201.14 ± 28.90） ng/L、（1.34 ± 0.45）ng/L比（2.89 ± 1.01）ng/L]，而HO-1显著升高[（78.91 ± 15.74）μg/L比　（58.99 ± 13.33） μg/L]，差异有统计学意义（P<0.05）；两组患者输血前免疫功能比较差异无统计学意义（P>0.05）；经输血后，观察组患者CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平与对照组比较均显著升高[（49.11 ± 19.13）%比（47.13 ± 12.84）%、（25.23 ± 10.80）%比（21.09 ± 12.28）%、（24.74 ± 10.84）%比（21.88 ± 11.18）%、1.02 ± 0.25比0.96 ± 0.20]，差异有统计学意义（P<0.05）。结论悬浮去白细胞红细胞输注能够提高MDS患者外周血HO-1的表达水平及免疫功能。

简介：摘要目的探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)调节巨噬细胞极化在海水淹溺引起的急性肺损伤中的作用及意义。方法用人工海水(seawater, SW)分别刺激Raw264.7细胞8、24和72 h，将这些细胞分为对照组、SW 8 h组、SW 24 h组和SW 72 h组，观察细胞形态变化，检测细胞凋亡、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和HO-1蛋白含量。肺泡巨噬细胞条件性Hmox1基因敲除Hmox1flox/floxCre+/-Hmox1-/- (HO-1M-KO)小鼠随机分为HO-1flox/flox对照组、HO-1flox/flox SW 24 h组、HO-1M-KO对照组和HO-1M-KO SW 24 h组(每组n＝6)。小鼠置于镂空的容器中，置于水深6 cm、温度(25±2)℃的人工海水中28 s，建立小鼠海水淹溺性急性肺损伤(acute lung injury, ALI)模型。淹溺24 h后取材进行肺泡灌洗，检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中细胞总数和蛋白浓度，观察肺组织的病理变化和肺组织中iNOS的蛋白含量。结果海水刺激Raw264.7细胞后不规则细胞增多，细胞数量减少；对照组、SW 8 h组、SW 24 h组和SW 72 h组的凋亡率分别为(5.99±0.23)%、(16.71±1.16)%、(41.80±2.50)%和(77.84±1.59)%，凋亡率随淹溺时间增加(P<0.01)。对照组、SW 8 h组、SW 24 h组和SW 72 h组细胞中HO-1蛋白含量分别为(1.07±0.06)、(1.42±0.01)、(2.77±0.22)和(0.99±0.10)，SW 8 h组和SW 24 h组的HO-1蛋白含量高于其他2组(P<0.05)。对照组、SW 8 h组、SW 24 h组和SW 72 h组细胞中iNOS蛋白表达量分别为(0.94±0.10)、(3.44±0.32)、(1.52±0.09)和(2.26±0.11)，SW 8 h组、SW 24 h组和SW 72 h组iNOS蛋白表达量均高于对照组(P<0.01)。但是SW 24 h组相较于SW 8 h组，HO-1蛋白表达量显著上升，iNOS表达量下降(P<0.01)。HO-1M-KO小鼠淹溺后肺组织损伤明显加重，肺泡腔塌陷、缩小，肺泡腔内出血，肺泡间隔明显增厚，炎性细胞浸润，BALF中的细胞数量和蛋白浓度显著升高(P<0.01)，肺组织中iNOS含量显著上升(P<0.01)。结论HO-1可通过抑制M1巨噬细胞极化，减轻海水淹溺引起的小鼠ALI。

简介：【摘要】目的 探讨分析对乳腺脓肿患者采用安珂手术进行治疗的临床疗效，并观察对其细胞粘附分子1水平造成的影响。方法 本次研究对象均选自本院2019年5月到2020年11月期间收治的乳腺脓肿患者，共150例，按照患者的入院时间分组，先入院的75例为参照组实施常规手术治疗，后入院的75例为研究组实施安珂手术进行治疗，观察对两组的治疗效果。结果 比较两组的各项手术指标以及各项炎症因子水平，研究组均优于参照组（P＜0.05）。结论 根据本次研究的结果可以确认，对乳腺脓肿患者采用安珂手术进行治疗的临床疗效十分确切，值得在临床上大力推广。

简介：摘要目的研究氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）对小鼠皮肤鳞状细胞癌（cSCC）的免疫效应。方法建立紫外线诱导的SKH-1无毛小鼠cSCC模型，进行ALA-PDT治疗，在治疗前及治疗后1、3、6、12、24 h和3 d、7 d各取5 mm3大小皮肤组织，采用免疫组化及流式细胞仪检测不同时间点小鼠肿瘤组织免疫细胞浸润情况，包括中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞、B细胞、自然杀伤细胞和树突细胞。采用SPSS16.0软件进行两样本均数t检验。结果与治疗前相比，小鼠cSCC肿瘤局部中性粒细胞和巨噬细胞数量及比例在ALA-PDT治疗后1 h增高最明显[免疫组化结果（每400倍视野细胞数量）：61.22 ± 6.65比22.56 ± 4.13，59.67 ± 4.30比21.89 ± 3.26，均P<0.05；流式细胞仪结果：（35.64 ± 15.33）%比（5.46 ± 2.44）%，（12.15 ± 4.86）%比（1.98 ± 1.49）%，均P<0.05]。同时，免疫组化和流式细胞仪检测均显示肿瘤局部T细胞、B细胞、自然杀伤细胞及树突细胞在治疗后6 h表达显著增高（均P<0.05）。达峰后，肿瘤组织中上述细胞数量和比例下降，但仍高于治疗前，并持续至本研究终点（治疗后第7天）。结论ALA-PDT通过招募免疫细胞发挥抗肿瘤作用，其中以中性粒细胞和巨噬细胞最为明显。

简介：摘要Ⅱ型格里塞利综合征作为罕见病，容易继发噬血细胞综合征，临床进程凶险，病死率高，且易漏诊。本研究通过报道苏州大学附属儿童医院收治1例经过基因筛查明确诊断的患儿的发病过程和预后转归，提高了临床医师对此疾病的诊治水平。患儿临床表现为银色头发、睫毛，反复肺部感染，高热不退，铁蛋白明显升高，纤维蛋白原下降。基因检测结果示患儿RAB27A基因发生纯合子突变，分别来自于父母，p.P126Qf3*3移码突变，符合Ⅱ型格里塞利综合征诊断。父女人类白细胞抗原(HLA)为7/10，遂予患儿来自于父亲的骨髓造血干细胞移植，移植后2年随访，患儿健康存活中。

简介：摘要目的探讨"5M1E"[人员（man）、机器（machine）、材料（material）、方法（method）、环境（environment）和测量（measurement）]分析法联合人文关怀教育对眼科规范化培训护士的应用价值。方法将2015年7月至2020年7月到空军军医大学第一附属医院眼科参加规范化培训的48名护士纳入研究；按照参加培训的先后顺序分为对照组和研究组，每组24人；对照组采用临床传统带教，研究组采用"5M1E"分析法联合人文关怀教育。培训结束后，比较两组护士学员的考核成绩和对教学的总体评价。采用SPSS 22.0进行t检验和卡方检验。结果研究组护士学员在理论考核、眼科专科操作技能考核、综合护理能力考核及人文关怀意识考核方面成绩得分均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.001）。眼科规范化培训教学反馈情况：对照组一般17人、良好5人、优秀2人，研究组一般4人、良好7人、优秀13人，组间比较差异有统计学意义（χ2=16.448，P<0.001）。结论"5M1E"分析法联合人文关怀教育有助于提高眼科护士规范化培训的理论知识水平、专科操作技能、综合护理能力及人文关怀意识，对提高眼科护士教学质量具有非常重要的意义。

简介：摘要目的观察微小RNA（miRNA，miR）-1277-5p过表达对卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法将对数生长期的SKOV-3细胞分为NC组和miR-1277-5p组，分别转染对照模拟物和miR-1277-5p模拟物。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组SKOV-3细胞miR-1277-5p表达水平。集落形成实验检测各组SKOV-3细胞增殖。流式细胞术检测SKOV-3细胞凋亡变化。RNAhybrid预测miR-1277-5p的靶基因。qRT-PCR和蛋白质印迹（Western blot）检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果NC组和miR-1277-5p组SKOV-3细胞中miR-1277-5p的表达分别为（1.22±0.42）和（13.22±1.42），NC组明显少于miR-1277-5p组（P＜0.01）。与NC组比较，miR-1277-5p组集落的数量较少（P＜0.01），细胞凋亡率明显较高（P＜0.01）。miR-1277-5p的靶基因可能是PHD锌指蛋白8（PHF8）。与NC组比较，miR-1277-5p组SKOV-3细胞中PHF8基因表达明显降低（P＜0.01）。结论miR-1277-5p可能通过抑制PHF8基因表达，降低卵巢癌SKOV-3细胞的增殖并促进其凋亡。

简介：摘要目的探讨谷氨酰胺酶2(GLS2)对肝胆管癌细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的作用及其机制。方法TIMER数据库检索GLS2在泛癌中表达水平，通过蛋白质印迹法(Western blot)、免疫组织化学检测进一步验证GLS2在胆管癌组织(2014年1月至2019年4月扬州大学附属医院苏北人民医院行胆管癌根治术患者)表达水平及临床意义。分析GLS2和P-糖蛋白(MDR1)在胆管细胞癌组织中表达相关性。运用pcDNA过表达RBE细胞株GLS2表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞对化疗药物5-Fu的化疗敏感性。组间比较采用t检验，临床资料采用χ2检验。结果在肝胆管细胞癌组织中GLS2表达显著高于正常组织(0.42±1.20比1.71±0.83，t＝2.974，P<0.05)，并且GLS2表达与肝胆管细胞癌患者肿瘤数量、有无包膜、淋巴结转移、临床分期、糖类抗原19-9明显有关(χ2＝6.17、5.84、7.15、8.24、8.21，P<0.05)。进一步分析表明GLS2表达与MDR1表达明显负相关(r＝-0.536，P<0.05)。过表达RBE细胞GLS2表达可下调MDR1表达(0.90±0.12比0.22±0.21，t＝3.213，P<0.05)，并提高RBE细胞对5-Fu化疗敏感性。结论GLS2通过介导MDR1表达提高肝胆管癌细胞化疗敏感性，并且GLS2的表达与肝胆管细胞癌患者恶性表型显著相关。

简介：摘要目的探讨circ-PRKDC对肺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响及分子机制。方法培养正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975。将NCI-H1299细胞分为si-NC、si-PRKDC、pcDNA-NC、pcDNA-PRKDC、miR-NC、miR-505-3p、anti-miR-NC、anti-miR-505-3p、si-PRKDC+anti-miR-NC、si-PRKDC+anti-miR-505-3p组。RT-qPCR检测circ-PRKDC和miR-505-3p的表达水平；蛋白质印迹法检测蛋白表达；MTT检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；平板克隆形成实验检测细胞放射敏感性；双荧光素酶报告实验检测circ-PRKDC和miR-505-3p的靶向关系。结果与BEAS-2B细胞相比，NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975细胞circ-PRKDC表达水平升高(3.65、3.10、2.67∶1.00，P<0.05)，miR-505-3p表达水平降低(0.42、0.50、0.54∶1.02，P<0.05)。低表达circ-PRKDC后CyclinD1表达水平降低(0.42∶0.81，P<0.05)，Cleaved-caspase-3和γ-H2AX表达水平升高[(0.71∶0.33，P<0.05)和(0.89∶0.465)，P<0.05]；细胞A值降低(0.413∶0.839，P<0.05)；细胞凋亡率升高(20.35∶6.21，P<0.05)；细胞存活分数降低(P<0.05)；β-catenin表达水平降低(0.35∶0.73，P<0.05)。miR-505-3p高表达后CyclinD1表达水平降低(0.34∶0.83，P<0.05)，Cleaved-caspase-3(0.65∶0.32，P<0.05)和γ-H2AX (0.96∶0.45，P<0.05)表达水平升高，细胞A值降低(0.386∶0.851，P<0.05)，细胞凋亡率升高(16.38∶6.20，P<0.05)，细胞存活分数降低(P<0.05)。与miR-NC比较，miR-505-3p组转染circ-PRKDC野生型报告质粒的细胞荧光素酶活性降低(0.44∶1.00，P<0.05)。下调miR-505-3p能逆转circ-PRKDC低表达对NCI-H1299细胞增殖、凋亡和放射敏感性以及β-catenin表达的影响。结论低表达circ-PRKDC可能通过上调miR-505-3p抑制肺癌细胞增殖，促进凋亡以及增强细胞的放射敏感性，且其可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-5590-3p对转化生长因子βⅡ型受体(TGFBR2)基因表达的抑制作用及对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响。方法体外培养胃癌细胞系，实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胃癌组织和细胞系中miR-5590-3p的表达。采用脂质体转染法分别转染miR-NC和miR-5590-3p模拟物至胃癌细胞HS-746T中，分别命名为miR-5590-3p组和miR-NC组。qRT-PCR检测转染效果。Transwell实验和CCK-8实验检测转染后胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖能力。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因系统验证miR-5590-3p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞中TGFBR2及下游蛋白的表达。结果miR-5590-3p在胃癌组织的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)。miR-5590-3p在胃癌细胞系的表达明显低于正常胃黏膜上皮细胞(P<0.05)，在HS-746T细胞中表达最低(P<0.01)。转染后miR-5590-3p组miR-5590-3p的表达(11.76±0.21)明显高于miR-NC组(1.06±0.21)，差异有统计学意义(P<0.01)。miR-NC组和miR-5590-3p组侵袭细胞数量分别为(101.20±15.47)个和(26.53±6.53)个，miR-5590-3p组细胞侵袭能力明显下降(P<0.01)。与miR-NC组比较，miR-5590-3p组细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。生物信息学软件显示miR-5590-3p的靶基因是TGFBR2。双荧光素酶报告基因系统证实miR-5590-3p可靶向结合TGFBR2基因(P<0.01)。Western blot结果显示，与miR-NC组比较，miR-5590-3p组HS-746T细胞中TGFBR2的表达明显降低(P<0.01)。肿瘤侵袭相关蛋白ZEB-1、ZEB-2表达降低，细胞周期相关蛋白CDK1和Cyclin B表达降低。结论miR-5590-3p可通过靶向结合并调控TGFBR2基因的表达，抑制胃癌细胞HS-746T的侵袭和增殖能力。