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  • 简介:利用同源模建方法预测了t-PAK1区三维结构。通过结构叠合确定了t-PAK1、K2区,纤溶酶原K1、K4区及UKK区赖氨酸结合口袋。静电势计算及疏水性分析表明,在t-PAK2区以及纤溶酶原K1、K4区与纤维蛋白裸露赖氨酸之间存在明显静电势互补和疏水面契合。确定了影响Kringle区结合口袋与赖氨酸亲和重要氨基酸,分析了t-PAK1区、UKK区不能结合赖氨酸原因,由此设计了具有赖氨酸亲和力新型t-PAK1区及UKK区突变体。利用模拟残基突变技术预测了突变体结构变化,分析了突变后t-PAK1区及UKK区与赖氨酸亲和力变化,初步在理论上肯定了设计方案合理性。

  • 标签: 同源模建 结构功能关系的计算机模拟 分子设计 Kringle区
  • 简介:目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域原核表达载体并进行重组蛋白质原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构域序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/LIPTG诱导,用Ni—NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果:分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因长度为2571bp,编码856个氨基酸,GenBank收录号为EU180597;对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化,SDS—PAGE显示相对分子质量约43×10^3蛋白质特异表达,对表达产物进行分离纯化,获得了SRK13-b激酶结构域融合蛋白。结论:羽衣甘蓝SRK13-b基因克隆及激酶结构域原核表达,为研究SRK功能及自交不亲和奠定了基础。

  • 标签: 羽衣甘蓝 自交不亲和 S13-b位点受体激酶 原核表达 纯化
  • 简介:目的:融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原,以便与其他已知免疫显性抗原联合使用,有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验敏感性和特异性。方法:将克隆来源干结核分枝杆菌H37Rv株Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达;由于重组Rv3881c突变子抗原片段同C端6xHis标签融合表达,使用Ni-柱进行快速纯化。结果:Western印迹表明,重组Rv3881c突变子抗原同选取6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显反应。结论:重组Rv3881c突变体具有较好特异性,提示该抗原可能成为检测结核有效抗原之一。

  • 标签: Rv3881c抗原 结核分枝杆菌 融合蛋白 大肠杆菌
  • 简介:目的:研究血管平滑肌细胞内转化生长因子β(TGF-β)信号怎样调节赖氨酰氧化酶(LOX)表达。方法:分离小鼠原代血管平滑肌细胞,用携带不同Smad4干扰序列慢病毒感染原代细胞,建立Smad4敲低稳定细胞系;分别用TGF-β刺激原代细胞或对照和Smad4敲低细胞,利用免疫印迹及Real-timePCR技术检测Smad4敲低后LOX表达改变。结果:获得了Smad4敲低细胞;TGF-β能诱导LOX表达,且在Smad4敲低细胞内,LOX升高更明显。结论:TGF-β通过Smad4非依赖方式促进LOX表达。

  • 标签: 血管平滑肌细胞 SMAD4 转化生长因子Β 赖氨酰氧化酶
  • 简介:细菌脑膜炎是一类严重传染性疾病,其发病率以及后遗症率都比较高.根据其表面荚膜多糖不同可以分为13个血清群体,其中A、C、Y、W135这四种群Men是引发脑膜炎主要致病菌.目前针对这几种致病菌疫苗主要是多糖疫苗.本文在总结群脑膜炎球菌多糖疫苗研发情况以及生产进展同时着重介绍了用于测定多糖含量一种简单有效方法:免疫火箭电泳法.

  • 标签: 群脑膜炎球菌 多糖疫苗 研发生产 火箭电泳 多糖测定
  • 简介:目的:构建斑马鱼FOXP3A融合蛋白原核表达系统,诱导表达并制备多克隆抗血清。方法:选取斑马鱼foxp3a基因cDNA894bp特异区段(s-foxp3a),对该片段进行密码子优化后构建原核表达载体pET-32a-s-foxp3a,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白并纯化,纯化后蛋白免疫家兔,制备斑马鱼FOXP3A蛋白多克隆抗血清,4次免疫后取血清,采用间接ELISA法检测抗血清效价。结果:在16℃经0.5mmol/LIPTG诱导10h条件下,SDS-PAGE分析表明斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白以包涵体形式产生;间接ELISA检测结果显示,FOXP3A蛋白多克隆抗血清效价在1.6×10^5以上。结论:制备了高效价斑马鱼FOXP3A多克隆抗血清,为进一步解析斑马鱼FOXP3A蛋白功能提供了基础工具。

  • 标签: 斑马鱼 FOXP3A 密码子优化 原核表达 多克隆抗血清
  • 简介:DNA甲基化属于一种表观遗传修饰,主要发生在CpG双核苷酸序列中胞嘧啶上,是在DNA甲基转移酶催化下,以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体,将甲基转移到胞嘧啶上,生成5-甲基胞嘧啶一种反应。DNA甲基化在植物生长过程中具有极其重要作用。综述了植物DNA甲基化特征、调控机制,及其对植物基因表达影响研究进展。

  • 标签: DNA甲基化 植物发育 调控
  • 简介:车站编组自动化设备应用极大地提高了列车编组安全和效率,使用DYT可控停车防溜器制动防溜,减轻了作业人员工作条件和劳动强度,提高了站场自动化作业水平。文章对DYT停车器维修与管理进行了探讨与研究,提出设备更新时一些改进思路。

  • 标签: DYT可控停车防溜器 维修 保养 管理 改进
  • 简介:在高职院校英语教学中,怎样解决存在问题,转变教学观念,改进教学方法,提高教学质量,使英语教学达到学以致用目的,本文就此进行了探讨。

  • 标签: 英语教学 问题 对策
  • 简介:环境是一种特殊资产,生态破坏、环境污染直接导致经济损失与财富流失,明显影响了我国现期经济指标和预计经济趋势.因此,我国林业生态建设迫在眉睫.基于此,本文作者作为神农架林区工作人员,并结合实际工作经验,对神农架林区林业生态建设发展进行了分析,提出了自己见解,供同行参考.

  • 标签: 神农架林区林业 生态建设 发展 思考
  • 简介:目的:为进一步研究CLP(coactosin-likeprotein)与5’-脂氧合酶、肌动蛋白相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度CLP,并对其生物化学特性进行分析测定。方法:从人胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过GlutathioneSepharose4B亲和层析和Su-perdex75分子筛纯化,得到高纯度CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果。结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在可能,且线性化程度较高。结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质可能,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白作用模型奠定了一定数据基础。

  • 标签: 人源CLP 表达 纯化 生化特性
  • 简介:本文根据高校女生生理及心理特点,说明从需要,目标,语言,情感等几方面对学生加以激励,对学生体育学习可以起到事半功倍作用。

  • 标签: 激励法 体育教学 高校女生
  • 简介:危急值通知服务管理在医院信息化建设今天起到了越来越重要作用,已经是LIS不可缺少一个模块,在与HIS集成度也是要求越来越高,依赖于现在实验室管理系统自动判定结果和不断完善网络建设,危急值通知服务也越来越快捷准确。

  • 标签: 危急值 LIS 医院信息管理
  • 简介:影响抗癫病药物不良反应因素有年龄、性别、先前存在疾病、遗传易感性以及服用抗癫病药物不同时期。年龄和性别年龄和性别是影响抗癫病药物不良反应重要因素。

  • 标签: 抗癫痫药物 不良反应
  • 简介:Epitomics已经开发了用于制造兔子单抗专利方法,兔子单抗有着特殊优点,包括更多抗原决定簇识别,需要更少免疫抗原和良好应答反应,大大改善对啮齿动物蛋白反应,所有EpitomicsRabMAbs提供抗体具有高亲和力和高特异性,

  • 标签: 信号传导途径 单抗 兔子 细胞 应答反应 抗原决定簇
  • 简介:随着国家工业化进程不断加快,越来越多地区呈现石漠化问题,岩溶石漠化是西南地区生态环境建设最为突出矛盾和问题,已经给经济和社会带来极大危害,严重制约经济社会和人类可持续发展.结合多年以来治理石漠化治理经验,提出合理解决方案,配合政府管理,让石漠化地区恢复生态平衡,满足群众发展和生存需要,实现统筹治理,协调发展治理策略,促进人与自然和谐发展.

  • 标签: 岩溶石漠化 治理措施 森林保护
  • 简介:蔗糖磷酸合成酶(sucrosephosphatesynthase,SPS)是高等植物体内控制蔗糖合成关键酶之一,它主要通过异构调节和磷酸化修饰在酶水平调节蔗糖合成。本文简要介绍SPS家族成员、SPS蛋白上3个磷酸化位点,以及SPS生物学功能、SPS与磷酸蔗糖磷酸酶关系等。

  • 标签: 蔗糖磷酸合成酶 磷酸化位点 14—3—3蛋白 磷酸蔗糖磷酸酶
  • 简介:类型1:考虑好处,不考虑害处多发生于出于某一种用途引进某物种,后来却发现其对别的物种生存威胁甚大。

  • 标签: 入侵生物 类型 物种
  • 简介:生物芯片是上世纪末发展起来一种微量分析技术,因具有准确、快速、信息量大等特点而发展迅速。简要介绍了生物芯片基本原理、种类及其X-作原理与应用前景,并深入探讨了生物芯片在食品检测中应用,包括对转基因食品、食品微生物、食品营养成分、食品原料等检测;对现今生物芯片应用中存在问题与未来发展前景做了分析展望。

  • 标签: 生物芯片 食品检测 应用 展望