简介：应用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,对p16抑癌基因(CDKN2)进行体外定点突变,在p16cDNA中引入第48位密码子CCG(Pro)→CTG(Leu)和第74位密码子GAC(Asp)→AAC(Asn)突变,构建了p16-P48L和p16-D74N突变体。野生型和突变型p16cDNA克隆于pcDNA3构建pCMV-p16、pCMV-p16P48L和pCMV-p16D74N真核表达载体,导入纯合缺失p16基因的人肺癌细胞株H460,经RNA点杂交、RNA印迹和细胞免疫化学染色,检测到P16表达。通过比较表达野生型和突变型P16的H460细胞在~3H-TdR掺入及细胞所在周期的差异,证实P16表达抑制细胞进入S期,而P48L和D74N突变体对细胞进入S期没有什么影响,提示P48L和D74N突变导致P16蛋白功能丧失。

简介：目的通过体外研究热灭活阿萨希毛孢子菌（Trichosporonasahii,T.asahii）孢子对健康人外周血单核源树突状细胞（dendriticcells,DCs）的表型和功能的影响,探讨DCs在T.asahii感染中可能发挥的作用。方法体外诱导培养正常人外周血DCs,与不同浓度的热灭活T.asahii孢子进行孵育,DCs与T.asahii浓度比分别为1∶1、1∶5和1∶10,RPMI-1640及脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激组分别作为空白对照及阳性对照,在显微镜下观察各组DCs形态的变化;瑞氏-姬姆萨染色观察实验组DCs对T.asahii的吞噬情况并计算吞噬率;流式细胞术检测各组DCs表面共刺激分子表达情况。结果诱导孵育过程中DCs形态发生明显改变;24h时实验组部分DCs内可观察到不止一个被吞噬的T.asahii孢子,吞噬率组间差异有统计学意义（P〈0.05）;与空白对照组相比,实验组DCs形态发生明显改变,且表面共刺激分子CD80、CD86、CD83表达水平明显升高（P〈0.05）,但升高水平低于LPS刺激组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论人外周血DCs吞噬热灭活的T.asahii孢子后,形态发生改变,表面分子表达水平升高,DCs进一步成熟。

简介：目的：观察卡维地洛对慢性心力衰竭患者神经内分泌及心功能的影响。方法：60例慢性心力衰竭患者随机分为对照组（n=30）和卡维地洛组（n=30）。对照组给予洋地黄、利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂等常规治疗；卡维地洛组在给予常规治疗的基础上加用卡维地洛，从小剂量（3．125mg，1次／天）逐渐加至靶剂量（12．5mg，2次／天或3次／天）治疗6个月。治疗前及治疗6个月后放射免疫法测定血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及内皮素-1（ET-1）水平，超声心动图检测心功能。结果：两组治疗后较治疗前AngⅡ及ET—1水平显著降低，卡维地洛组改善更明显（P〈0．01）；两组左房内径、左室舒张末期内径（LVEDD）和左室收缩末期内径（LVESD）明显缩短（P〈0．01），左室射血分数（LVEF）显著增高（P〈0．01）。结论：卡维地洛抑制心衰患者的神经内分泌激活，逆转心室重塑、改善心功能。

简介：目的：评价鼻窦功能性手术（FESS）治疗慢性鼻窦炎合并支气管哮喘的远期疗效。方法：选择自2011年1月至2013年1月我院收治的慢性鼻窦炎患者65例,行FESS治疗。根据是否合并患有支气管哮喘将患者分为观察组（慢性鼻窦炎合并支气管哮喘）和对照组（慢性鼻窦炎）,选择同期健康志愿者作为正常组。采用酶联免疫吸附测定测定白细胞介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）水平、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）和可溶性IgE低亲和力受体（sCD23）的水平,并术后随访2年观察对比慢性鼻窦炎和支气管哮喘改善情况。结果：对照组和观察组患者手术后的IL-4、sIL-2R及sCD23水平降低,IFN-γ水平升高,且与手术前的差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组患者术后2年的慢性鼻窦炎治愈率均高于术后1年;观察组患者术后1年和术后2年的哮喘完全控制率明显高于术前,且差异具有统计学意义（P〈0.05）,且术后2年哮喘完全控制率显著高于术后1年之间（P〈0.05）;观察组患者术后1年、2年哮喘平均发作率显著低于术前,且术后2年的哮喘平均发作率明显低于术后1年（P〈0.05）。结论：FESS用于治疗慢性鼻窦炎合并支气管哮喘具有良好的临床疗效,能够显著改善患者的IL-4、IFN-γ、sIL-2R及sCD23水平,且随着时间的延长,其远期疗效较满意。

简介：溶栓疗法不仅已被常规地用于急性心肌梗死的治疗,而且也已用于其它血栓病的治疗中,如急性缺血性脑血栓、肺栓塞、急性周围动脉血栓等。尿激酶原是双链尿激酶的单链前体,它主要激活纤维蛋白表面的纤溶蛋白原,所以具有选择性溶栓作用。临床结果表明它是一种安全有效的溶栓药物,与t-PA、链激酶或尿激酶伍用均有协同作用。本文综述它了的特性、结构与功能,以及它的药代动力学和临床的治疗效果。

简介：目的探索BALB/c和C57BL/6两个品系在有关实验中的不同作用。方法选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成的神经系统表达的一些基因的反义核酸(antisense)中的2个，用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB/c和C57BL/6小鼠的侧脑室，并分别设注射生理盐水和随机序列核酸(Scramble)的对照组。每一反义核酸实验组和对照组各注射10只小鼠，之后观察实验组与对照组在不同行为学实验中的差异。小鼠的行为学检测模型为：考察日常代谢能力的摄食量，考察Locomotionactivity(移动)的旷场行为，考察疼痛阈值的甩尾试验和考察记忆能力的步下法实验。结果注射No.1基因的反义核酸后，两品系的实验组均在测试记忆力的步下法(Step-downTest)试验中表现出记忆力减弱，且与对照组差异明显，说明No.1基因的功能确与记忆相关。注射No.2基因的反义核酸后，在测试移动能力的旷场行为(OpenFieldBehavior)试验中，BALB/c实验组跨格、直立行为均比对照组明显减少，说明受此反义核酸影响显著，而C57BL/6实验组则与对照组无大的差异。此外，在生理盐水对照组和随机序列核酸对照组的实验中以及其他行为学模型的实验中，两品系也存在着一定的差异。结论用遗传背景不同的多品系进行相关实验，可进一步建立新基因功能初筛中有显著结果的基因的复筛平台；同时，实验结果对于进一步研究什么样的品系适用于什么样的实验将具有较大的意义。

简介：目的：研究腹腔镜与开腹手术对进展期胃癌患者围手术期疗效及免疫功能的影响.方法：选择从2015年9月至到2016年8月在医院治疗的进展期胃癌患者124例作为研究对象,依照简单数字随机表法将患者分成观察组以及对照组各含62例,对观察组进行腹腔镜辅助手术,对照组则给予开腹手术,对比两组围术期疗效相关指标,手术前后的免疫功能指标CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋）,以及两组术后的并发症.结果：观察组的手术时间明显长于对照组,且切口长度、出血量少于对照组,住院时间和术后排气时间均较对照组短,差异有统计学意义（P＜0.05）.术后两组CD4＋、CD4＋/CD8＋水平均较术前明显降低,而CD8＋水平明显上升,且术后观察组CD4＋、CD4＋/CD8＋水平均显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.术后观察组并发症的总发生率是4.84％,明显低于对照组的16.13％,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：利用腹腔镜手术治疗进展期胃癌,具有较好的疗效,且对患者免疫功能产生的影响较小,安全性较高,值得给予推广.

简介：目的：通过探讨缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者的疗效及对心功能的影响,为临床治疗提供依据。方法：选择2010年1月~2014年12月我院收治的高血压伴左心室肥厚患者共120例,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组。对照组患者给予氨氯地平,观察组患者缬沙坦联合氨氯地平治疗,治疗6个月后,观察两组患者舒张压（DBP）、收缩压（SBP）、心率（HR）、室间隔厚度（IVST）,左室后壁厚度（LVPWT）、左室舒张末期内径（LVDd）和左室重量指数（LVMI）。结果：治疗后,两组患者SBP、DBP和HR均较治疗前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者SBP、DBP和HR均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后,两组患者IVST、IVPWT、LVDd和LVMI均较治疗前显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者IVST、IVPWT、LVDd和LVMI均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者,能够降低患者血压、逆转左心室肥厚,改善患者心功能,疗效优于氨氯地平单独治疗,值得临床推广应用。

简介：目的：比较连续股神经阻滞（CFNB）与静脉自控镇痛（PCIA）在全膝关节置换术中的应用效果及对患者凝血功能的影响。方法：选取2014年1月至2015年12月间我院行单侧全膝关节置换术的患者80例,按照随机数字表法分为CFNB组和PCIA组,每组各40例,两组患者分别接受CFNB和PCIA治疗。观察两组患者术后6h、12h、24h、48h视觉模拟疼痛评分（VAS）,两组患者分别于麻醉前（T1）、术毕（T2）、术后1d（T3）、术后2d（T4）进行血栓弹力图检查,观察两组凝血功能变化。并于术后随访1年,比较两组患者膝关节功能。结果：术后6h、12h、24h、48hCFNB组患者VAS评分显著低于PCIA组患者（P〈0.05）。T2、T3、T4时点CFNB组患者凝血反应时间（R）、血凝块形成时间（K）较T1升高,血凝块聚合形成速率（α角）、血凝块最大振幅（MA）较T1降低,PCIA组患者R、K较T1降低,α角、MA较T1升高,T2、T3、T4时点CFNB组患者R、K高于PCIA组患者,α角、MA低于PCIA组患者,差异均有统计学意义（P〈0.05）。两组患者术后均完成1年的随访,两组患者KSS评分、膝关节最大屈曲度、膝关节最大伸直度比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：CFNB对于全膝关节置换术术后患者镇痛效果优于PCIA,有利于改善患者凝血功能,不影响术后患者膝关节功能的恢复。

简介：目的研究携载两性霉素B的聚乳酸纳米粒（AmB-PLA-NP）对大鼠肝、肾及血液系统的影响。方法将大鼠随机分4组,分别经尾静脉注射AmB、AmB-PLA-NP、PLA-NP（聚乳酸纳米粒）及表面活性剂聚山梨酯-80,定时取血检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）及红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）等指标。结果AmB组大鼠给药前及给药后1d、1周的RBC分别为（5.84±0.37）×10^12/L、（4.302±0.3）×10^12/L和（3.3±0.37）×10^12/L,AmB-PLA-NP组分别为（6.142±0.55）×10^12/L、（6.38±0.35）×10^12/L和（6.14±0.18）×10^12/L,溶血反应明显降低;AmB组给药后ALT及AST水平显著升高,分别为（1059.2±119.22）μmol/L、（466.6±357.30）μmol/L（给药1d后）和（1755±175.39）μmol/L、（2684.2±494.74）μmol/L（给药1周后）,而AmB-PLA-NP组、PLA组及聚山梨酯-80组的大鼠肝、肾功能未发生明显变化。结论AmB-PLA-NP能够显著降低AmB对肝、肾及血液系统的毒副作用。

简介：【目的】为探究转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育及其捕食功能的影响。【方法】以转Cry1Ac/1Ab基因棉与其亲本常规棉为实验材料,利用取食不同棉花品种叶片的棉铃虫饲喂异色瓢虫幼虫。【结果】与常规亲本棉相比,取食饲喂转基因棉花叶片的初孵棉铃虫幼虫的异色瓢虫幼虫从1龄发育至化蛹期时间延长0.77d,但差异不显著;除1龄幼虫体重增加(0.0773mg)外,其余各龄期幼虫体重均有所下降,但差异均不显著;异色瓢虫1、2、3、4龄幼虫对初孵棉铃虫捕食量均随棉铃虫密度的增加而增加,捕食功能反应均符合HollingⅡ圆盘方程。【结论】转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育无显著影响,饲喂取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花的棉铃虫对异色瓢虫捕食功能无显著差异。

简介：目的：探讨BNP和D二聚体对老年心功能不全严重程度的关系及预后的影响。方法：以2010年1月-2012年12月来我院就诊的慢性心功能不全患者为观察对象，根据心功能不全程度分为无症状组、心功能不全II级、III级、IV级3，另取健康体检者为对照，比较各组间BNP、D二聚体水平及相关性分析。结果：各患者组BNP和D二聚体水平与对照组相比明显增加（P〈0．05）；BNP与心功能不全分级、LVEDD、LAD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈直线负相关关系（P〈0．05）；D二聚体与心功能不全分级、LVEDD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈呈直线负相关关系（P〈0．05），与LAD直线关系无统计学意义（P〉0．05）；BNP水平1000pg／mL以下治疗有效率80．2％，疗效优于1000pg／mL以上者（Riditz=15．245，P=0．000），D二聚体5μg／mL以下者治疗有效率85．4％，疗效优于5μg／mL以上者（Riditz=26．354，P=0．000）。结论：BNP和D二聚体与老年心功能不全严重程度和超声心动图指标密切相关，可以作为疾病预后预测。

简介：目的：研究双歧杆菌三联活菌片对溃疡性结肠炎患者免疫功能及Fas/FasL表达的影响.方法：选取2014年7月至2015年6月本院收治的84例溃疡性结肠炎患者,根据患者入院顺序分为观察组（42例）和对照组（42例）两组.对照组采取美沙拉秦肠溶片进行治疗,观察组在此基础上结合双歧杆菌三联活菌片进行治疗.分析两组患者治疗前和治疗2个月后炎症因子水平、T细胞亚群以及Fas/FasL表达情况,并比较两组患者的临床疗效.结果：观察组总的有效率显著高于对照组（P＜0.05）.治疗后,观察组的血清白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著低于对照组（P＜0.05）,CD4＋、CD4＋/CD8＋T细胞亚群显著高于对照组,CD8＋、Fas/FasL表达显著低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：使用双歧杆菌三联活菌片治疗溃疡性结肠炎患者能改善患者的免疫功能及Fas/Fasl表达,减轻炎症反应,临床效果良好.

简介：目的：初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞（HUVEC）功能的信号通路作用机制。方法：首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径，进而通过real—timePCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响，最后采用Western印迹观察BPC-157对候选信号通路中相关蛋白的磷酸化水平影响。结果：10μg／mLBPC-157作用于HUVEC24h后，信号转导通路发现者芯片结果显示，与18条信号转导通路相关的96个关键基因中分别有4个基因的mRNA表达水平上调和下调，其中与MAPK信号通路相关的3个关键基因c—ns、c—Jun和Egr-1的mRNA表达水平显著性上调；低剂量BPC-157（1Ixg／mL）作用于HUVEC12h后，能够促进早期即刻基因c—ns、c—Jun和酝卜1的mRNA表达水平；10μg／mLBPC-157作用于HUVEC30min后，可明显促进ERKl／2、p38蛋白磷酸化。结论：BPC-157可能通过活化MAPK信号转导通路途径后，激活下游早期即刻基因转录，启动靶基因的表达，从而发挥促进HUVEC增殖、迁移等功能。

简介：目的：探讨老年代谢综合征（MS）患者颈动脉内膜中层厚度（IMT）与血管内皮功能及血管粘附因子-1（VCAM-1）的相关性。方法：选取2013年1月~2014年10月我院收治的50例MS患者分为老年组（n=25）和中青年组（n=25）,又根据IMT分为正常组和增厚组两个亚组。比较老年组和中青年组患者的临床资料,采用放射免疫分析法检测所有患者内皮素-1（ET-1）水平,采用分光光度计间接比色法检测一氧化氮（NO）水平,采用ELISA法检测VCAM-1水平,采用超声诊断仪检测IMT。结果：老年MS组和中青年MS组临床资料比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;MS患者IMT增厚组的NO水平均低于IMT正常组,而ET-1和VCAM-1水平均高于IMT正常组,比较差异有统计学意义（均P〈0.05）。IMT增厚组间比较,老年MS组的NO水平低于中青年MS组,VCAM-1水平高于中青年MS组,比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;老年MS组和中青年MS组的IMT与NO水平呈负相关（r=-0.415,-0.411;P=0.043,0.049）,与ET-1和VCAM-1水平呈正相关（r=0.585,0.576;P=0.030,0.036;r=0.547,0.552;P=0.033,0.031）。结论：血管内皮功能障碍和动脉粥样硬化等多重因素促进了MS患者IMT增厚中病理过程的发生和发展。

简介：目的：探讨经椎旁肌间隙入路治疗胸腰椎骨折的临床疗效及对Cobb’S角与椎体功能的影响。方法：选择2013年8月至2015年8月我院接诊的94例胸腰椎骨折患者，通过随机数表法分为观察组（n=47）和对照组（n=47），观察组使用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术，对照组使用传统开放式置入椎弓根螺钉内固定术。比较两组围术期情况及术前术后视觉模拟评分法（VAS）、下腰痛功能障碍指数（ODD、Cobb’S角和椎体前缘高度的变化。结果：观察组切口长度、手术时间、住院时间、卧床时间均明显短于对照组，术中出血量明显少于对照组（P〈0．05）；两组手术前VAS评分、ODI评分、Cobb’S角、椎体前缘高度比较差异均无统计学意义（P〉0．05），手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均较治疗前显著降低（P〈0．05），手术后1个月、1年时Cobb’S角、椎体前缘高度均显著改善（P〈0．05），且观察组手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均明显低于对照组（P〈O．05），手术后1个月时Cobb’s角、椎体前缘高度均优于对照组（P〈0．05），但两组手术后1年时Cobb’S角、椎体前缘高度比较无显著差异（P〉O．05）。结论：在胸腰椎骨折患者中应用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术效果显著，其具有创伤小、手术时间短、出血量少、术后椎体功能恢复快等优点。

简介：目的：探讨二甲双胍对多囊卵巢不孕患者卵巢功能、雌激素水平及胰岛素抵抗的影响。方法：选取我院收治的多囊卵巢不孕症患者72例，根据用药不同分为对照组与实验组，每组36例。对照组患者给予来曲唑促排卵治疗，实验组患者在对照组基础上予以二甲双胍治疗。观察并比较治疗前后两组患者的卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况。结果：与治疗前比较，两组患者治疗后卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况均得到改善，差异具有统计学意义（（P〈0．05）；与对照组比较，实验组患者治疗后卵巢功能显著改善，雌激素水平显著提高，胰岛素抵抗情况明显好转，受孕情况显著改善，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：二甲双胍能够调节多囊卵巢不孕症患者的卵巢功能，提高雌激素水平，改善胰岛素抵抗，提高受孕率，值得临床推广应用。

简介：T细胞表位在抗病毒的T细胞免疫中发挥核心作用，目前已在多种病原微生物的蛋白序列上发现存在T细胞表位的聚集现象。本文建立了一套功能学与结构学结合的策略鉴定病原体上细胞毒性T细胞（CytotoxicTLymphocyte，CTL）表位富集区的方法，并以严重急性呼吸道综合征（SARS）相关冠状病毒（SARS．CoV）的M蛋白为例，成功地鉴定了一个HLA—A2限制性的表位富集区。首先通过生物信息学的方法预测并合成M蛋白跨膜区的HLA—A2潜在结合多肽，通过体外复性实验和T2细胞结合实验验证多肽与HLA．A2的结合力；然后在HLA—A2．1／Kb转基因小鼠中检测这些多肽的免疫原性；最后通过x射线衍射技术，成功解析了其中一条多肽与HLA—A＊0201的复合物结构，其结构显示该多肽具有典型的HLA—A＊0201表位的结构特点，但却呈现出与以往鉴定多肽不同的构象和锚定残基。本文对于理解机体对SARS—CoV等病原体产生的T细胞免疫反应，以及为更广泛的人群设计T细胞疫苗具有重要意义。