简介：目的:设计合成新型2-喹诺酮类Polo样激酶1(Plk1)抑制剂。方法:以Plk1抑制剂ON01910为先导化合物,利用生物电子等排原理设计一系列2-喹诺酮类衍生物,用Autodock软件将该类化合物与Plk1进行分子对接和虚拟筛选,计算结合自由能;以取代的氯(溴)苄为起始原料,先后经巯基乙酸取代、双氧水氧化、与(对甲氧基)苯胺酰化,再经环合、水解制得目标化合物。结果:设计的化合物大多数与Plk1的结合自由能均比ON01910的低,结合强度高、稳定性好;合成了16个2-喹诺酮类衍生物,产物结构经1H-NMR确证。结论:所得化合物中有15个为新化合物,化合物的结构设计科学合理,虚拟筛选结果良好,为后续实体筛选和化合物结构优化提供了理论依据和参考。

简介：

简介：在Saccharomycescerevisiae，必要基因CDC13编码telomeric遗传上并且身体上与Stn1p和Ten1p交往的搁浅单人赛的DNA有约束力的蛋白质，并且为telomere结束保护和telomere长度控制被要求。Ten1由参予telomere长度规定和染色体结束保护的分子的机制留下逃犯。在这个工作，我们用净化的recombinantCdc13p和Ten1p在胶化过滤分析观察了Cdc13p和Ten1p的一个弱相互作用。Ten1p本身展出一项弱DNA有约束力的活动，但是提高telomericTG1鈥吗？Cdc13p的DNA有约束力的能力。Cdc13p是有Ten1p的co-immunoprecipitated。在变异的ten1-55或ten1-66房间，在Ten1p和Cdc13p之间的损害相互作用与telomericDNA导致长得多的telomeres，以及Cdc13p的一个减少的协会。一致地，Ten1-55和Ten1-66异种蛋白质没能刺激telomeric在vitro的Cdc13p的DNA有约束力的活动。这些结果建议Ten1p提高telomericCdc13p到的DNA有约束力的活动否定地调整telomere长度。

简介：TounderstandtheDNA-methylationmediatedgenesilencingmechanisms,weanalyzedincellcultureofthepromoterfunctionoftheMAGE-A1gene,whichisfrequentlydemethylatedandover-expressedinhumanhepatocellularcarcinoma.WehaveestablishedthecorrelationoftheDNAmethylationofthepromoterCpGislandwithexpressionstatusofthisgeneinapaneloftheestablishedlivercancercelllines.ThecrucialCpGdinucleotide(s)withintheminimalpromotersubjectedtothecontrolmediatedbyDNAmethylationwithprofoundbiologicalfunctionswasalsodelineated.Furthermore,anovelsequence-specificDNA-proteininteractionatthe-30CpGdinucleotideupstreamofthegenewasfoundhavingavitalparttoplayintheDNAmethylationmediatedtranscriptionsilencingoftheMAGE-A1gene.OurresultswouldnotonlyprovidenewinsightsintotheDNAmethylationmediatedmechanismsovertranscriptionoftheMAGE-A1gene,butalsopavethewayforfurtherdefiningthecross-talkamongDNAmethylation,histonemodificationandchromatinremodelingindetail.

简介：报道1例55岁男性农民，因右小腿溃疡4个月余就诊。取其溃疡组织作真菌培养和病理检查，真菌培养在含氯霉素、放线菌酮和不含氯霉素、放线菌酮的沙堡弱培养基中27℃都长出白色棉絮状菌落，而在不含氯霉素、放线菌酮条件下生长更好；在马玲薯培养基中长出镰刀状大分生孢子，菌种鉴定为茄病镰刀菌。8d后从溃疡处再取标本培养仍为茄病镰刀菌生长。病理切片经银染色后发现念珠状分隔菌丝，用透射电镜对病变组织内的菌体形态进行了超微结构研究。予伊曲康唑口服治疗，但患者未复诊而失访。

简介：目的：筛选1型人免疫缺陷病毒（HIV-1）中国流行株中包膜蛋白gp41的优势抗原片段,构建具有区域流行代表性的HIV-1gp41重组抗原,为改进现有HIV-1初筛试剂盒中使用的同类抗原奠定基础。方法：利用免疫斑点杂交和生物信息学方法,从收集自重庆、广州、上海的区域代表性150份HIV-1感染者血清标本中筛选gp41抗原性强的候选样本,利用RT-PCR及巢式PCR方法扩增包含重要抗原表位决定蔟的gp41基因片段,与原核表达载体pQE30连接,转化大肠杆菌M15构建gp41重组抗原表达菌株,表达后经亲和层析纯化、SDS-PAGE和Western印迹鉴定。结果：兔源HRP标记的gp41多抗能识别标本中gp41抗原性差异,得到候选样本,扩增包含gp41主要抗原表位片段;构建了包含gp41抗原表达簇的重组原核表达质粒,表达、纯化后经His标签抗体Western印迹鉴定为阳性。结论：高纯度的重组优势gp41抗原的构建和鉴定,为进一步改进现有HIV初筛诊断奠定了基础。

简介：目的比较了不同遗传背景小鼠对禽流感H5N1亚型病毒的致病敏感性,为H5N1禽流感模型制作和机理研究提供依据。方法近交系BALB/c、C57BL/6和封闭群ICR、NIHSwiss和KMSwiss共五个不同品系小鼠。每个品系实验动物30只,分接毒组20只,空白对照组10只,每组雌雄各半。病毒株为A/Goose/Guangdong/NH/2003（H5N1）,经测定TCID50为10-4.875/mL。接毒组通过鼻腔接种0.1mL病毒液,对照组接种正常鸡胚尿囊液。小鼠接毒后连续观察14d,观察记录临床症状、体温、体重变化,对在实验期间死亡和实验14d结束后仍然存活的小鼠均进行组织器官病理取材,进行RT-PCR病毒分离检测、HE染色及H5N1抗原特异性免疫组化染色。结果①临床症状：H5N1禽流感病毒能感染五个品系的小鼠,引起呼吸急促等症状和一过性体重、体温下降。②死亡情况：小鼠在接毒后第1天即出现死亡,死亡的高峰期集中在接毒后第3～6天。五个品系小鼠死亡率存在差异,BALB/c为70%,ICR为50%,NIHSwiss为40%,C57BL/6为25%,KMSwiss为10%;③病毒分离：各组接毒小鼠在死亡后均进行了病毒分离,死亡小鼠的肺脏均分离到病毒,其他脏器未分离到病毒。④病理变化：实验期间五个品系死亡小鼠肺脏病理改变相近。大体观：死亡小鼠肺部淤血,呈暗红色,体积增大,局部肺组织实变。镜下观：死亡小鼠的共同病理改变为间质性肺炎,具体表现为肺泡腔及间质出血、炎性细胞浸润;间质增生,肺泡隔增宽;肺泡腔中见纤维素性渗出,透明膜形成。⑤免疫组化结果：在死亡小鼠的气管上皮细胞和肺巨噬细胞可观察到H5N1禽流感病毒阳性表达。结论小鼠作为H5N1禽流感病毒模型具有普适性,不同品系小鼠感染鹅源H5N1禽流感病毒的临床症状、病程和病理变化与人禽流感病例相似。不同品系小鼠的死亡比例有明显差别,可以根据不同的实验目的,选择不同品系的小鼠制作H

简介：在生长因素刺激之上，支架蛋白质，Gab1，是酷氨酸phosphorylated并且随后适配器蛋白质，Crk，从Gab1播送信号。我们以前证明了没有细胞外的刺激，Crkoverexpression，在各种各样的人的癌症可检测，导致Gab1的酷氨酸phosphorylation。在现在的学习，内在的机制进一步被调查。CrkII的Mutational分析证明SH2领域，然而并非SH3(N)或CrkII的规章的Y221残余，为Gab1-Y307phosphorylation的正式就职是批评的。CrkII的SH2变化也减少了和Gab1的相互作用。在GST下拉试金，而Crk-SH3(N)与Gab1异种交往了，Crk-SH2跳了到野类型的Gab1，它缺乏聚类的酷氨酸区域(残余242-410)。Gab1的酷氨酸phosphorylation被表明适配器的所有Crk家庭蛋白质，然而并非另外的包含SH2导致。Src家庭kinase禁止者，PP2，废除Gab1的导致Crk的酷氨酸phosphorylations。Y307phosphorylation在缺乏Src，是，和Fyn的成纤维细胞是无法发现的，甚至在Crk的overexpression之上，而缺乏仅仅是和Fyn的房间仍然与phosphorylatedY307包含了Gab1。而且，Crk导致了Src-Y416的phosphorylation；因此，在Crk和Csk之间的相互作用被增加。Gab1-Y307F异种没能近甚至在HGF之上本地化血浆膜刺激和减少的房间移植。而且，Gab1-Y307F扰乱了Crk，FAK，和paxillin的本地化，它是焦点的粘附的典型部件。一起拿，这些结果显示Crk通过Src便于Gab1-Y307的酷氨酸phosphorylation，贡献焦点的粘附和提高的房间移植的组织，可能从而支持人的癌症开发。

简介：Leptospirosisisrecognizedasthemostwidespreadzoonosiswithaglobaldistribution.Inthisstudy,theantigenicvariationinLeptospirainterrogansandLeptospiraborgpeterseniiisolatedfromhumanurineandfieldratkidneywaspreliminarilyconfirmedbymicroscopicagglutinationtestusingmonoclonalantibodies,andwasfurthersubjectedtoamplificationandidentificationofoutermembranelipoproteinswithstructuralgenevariation.Sequencesimilarityanalysisrevealedthattheseproteinsequences,namelyOmpL1,LipL32andLipL41,showednomorehomologiestooutermembranelipoproteinsofnon-pathogenicLeptospiraandothercloselyrelatedSpirochetes,butshowedastrongidentitywithinL.interrogans,suggestingintra-specificphylogeneticlineagesthatmightbeoriginatedfromacommonpathogenicleptospiralorigin.Moreover,theompL1geneshowedmoreantigenicvariationthanlipL32andlipL41duetolessconservationinsecondarystructuralevolutionwithincloselyrelatedspecies.Phylogenetically,ompL1andlipL41ofthesestrainsgaveaconsiderableproximitytoL.weiliiandL.santarosai.TheompL1geneofL.interrogansclustereddistinctlyfromotherpathogenicandnon-pathogenicleptospiralspecies.ThediversityofompLgeneshasbeenanalyzedanditenvisagedthatsequence-specificvariationsatantigenicdeterminantsiteswouldresultinslowevolutionarychangesalongwithnewserovaroriginationwithincloselyrelatedspecies.Thus,acrucialworkoneffectiverecombinantvaccinedevelopmentandengineeredantibodieswillhopefullymeettosolvethetherapeuticchallenges.

简介：【背景】抗除草剂转基因作物是全球种植面积最大的一类转基因植物,以除草剂抗性基因作为检测靶标的分子鉴定方法的研究与应用,对转基因生物安全的检测与监测有重要意义。【方法】根据除草剂抗性基因aad1和dmo的核苷酸序列设计PCR检测引物,并进行PCR反应体系优化、方法特异性、灵敏度、再现性等方面的测试,分别建立aad1基因和dmo基因的特异性PCR检测方法。【结果】建立的PCR检测方法在56~64℃的退火温度范围内均能获得一致性结果,具有良好的稳健性。该方法可将含有aad1基因和dmo基因的转基因作物与其他转基因作物区分开,其灵敏度可分别达到20个拷贝和40个拷贝。通过将aad1基因和dmo基因的检测引物放入同一管PCR反应体系中,还能在一次PCR中同时检测这2个靶标基因,双重PCR的检测灵敏度与单一PCR一致。【结论与意义】建立的分子方法可精准检测出含有aad1基因和dmo基因的转基因作物,具有特异性强、灵敏度高的特点,为抗除草剂转基因作物的筛选检测提供了可靠的技术支撑。

简介：目的测定SPF级C1型尼曼-匹克病小鼠（Npc1-/-小鼠）的生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人的研究提供理论性的基础资料。方法（1）选取077日龄Npc1-/-、Npc1＋/-和Npc1＋/＋小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;（2）Npc1-/-小鼠由Npc1＋/-小鼠交配繁殖产生,统计Npc1＋/-小鼠连续4代的繁殖数据;（3）检测60日龄Npc1-/-和Npc1＋/＋小鼠的血液生理生化指标。结果（1）Npc1-/-小鼠的体重在7周前随着日龄的增加而增加,7周后随着日龄的增加而减少,直至11周左右死亡。Npc1＋/＋和Npc1＋/-小鼠的体重均随着日龄的增长而逐渐增加,两者之间并没有显著差别。4周后雄性比雌性体重增加明显比雌性小鼠快;（2）Npc1＋/-小鼠不同代内交配分娩间隔、窝产仔数、离乳仔数、离乳仔数中雌雄数量及阳性数量差异无显著性（P〉0.05）,而第2代的离乳率明显大于第1代（P〈0.05）;（3）Npc1-/-和Npc1＋/＋小鼠血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量（MCH）和平均过氧化物酶指数（MPXI）差异有显著性（P〈0.05）,其余差异无显著性（P〉0.05）。生化指标中尿素（UREA）差异有极显著性（P〈0.01）,而天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、葡萄糖（GLU）、乳酸脱氢酶（LDH）、钾（K）和铜（Cu）等差异有显著性（P〈0.05）,其余差异无显著性（P〉0.05）。结论（1）Npc1-/-、Npc1＋/-和Npc1＋/＋小鼠的生长曲线因基因型和性别的不同而存在差异;（2）Npc1＋/-小鼠不同代的繁殖能力差异无显著性;（3）Npc1-/-和Npc1＋/＋小鼠的部分血液生理生化指标差异有显著性。

简介：目的：研究塞米松棕榈酸酯、维生素B12、利多卡因联合使用对膝骨性关节炎的疗效及对血清白介素-1（IL-1）、软骨基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的影响.方法：选取2014年8月至2015年7月新疆医科大学第六附属医院收治的84例膝骨性关节炎患者,根据入院顺序分为观察组和对照组,42例每组.观察组采取塞米松棕榈酸酯、维生素B12、利多卡因进行关节腔内注射,对照组采取中药涂抹方案.评判患者治疗后的临床疗效,比较两组患者治疗前和治疗1个月后血清IL-1、MMP-3、TIMP-1水平、视觉模拟（VAS）评分的变化.结果：治疗后,观察组临床总有效率显著高于对照组（P＜0.05）,两组患者的血清IL-1、MMP-3、VAS评分均显著低于治疗前（P＜0.05）,血清TIMP-1水平明显高于治疗前,且观察组的IL-1、MMP-3、TIMP-1、VAS评分水平显著低于对照组,血清TIMP-1水平明显高于对照组（P＜0.05）.结论：采取塞米松棕榈酸酯、维生素B12、利多卡因关节腔内注射治疗膝骨性关节炎患者能有效降低患者血清IL-1、MMP-3水平,升高TIMP-1水平,缓解患者疼痛感,临床疗效良好.

简介：航线发炎是许多呼吸障碍的特点，例如气喘和膀胱的纤维变性。在发炎触发的航线基因表示的变化在这些疾病的致病起一个关键作用。基因连接研究建议ESE-2和ESE-3，编码上皮特定的Ets-domain-containing抄写因素，是候选人气喘危险性基因。我们这里报导et家庭抄写因素ESE-1的另一个成员的表示，以及ESE-3，起来在支气管的上皮的房间线由煽动性的cytokinesinterleukin-1beta(IL-1beta)和肿瘤坏死factor-alpha(TNF-alpha)调整了。有IL-1beta和TNF-alpha的这些房间的处理为ESE-1和ESE-3导致了信使rna表示的戏剧的增加。我们证明导致的表示被抄写因素NF-kappaB的激活调停。我们描绘了ESE-1和ESE-3倡导者并且识别了为导致cytokine的表达式被要求的NF-kappaB有约束力的序列。另外，我们也表明那ESE-1在上面调整ESE-3表示，down由cytokines调整它的自己的正式就职。最后，我们在Elf3显示出那(对人的ESE-1相应)猛烈老鼠，煽动性的cytokineinterleukin-6(IL-6)的表示是调整的down。我们的调查结果建议ESE-1和ESE-3在航线发炎起一个重要作用。

简介：目的：探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗中的意义。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果：脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者（P〈0.05,Log-rank检验）。结论：MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,可能与肿瘤的发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。

简介：在已明确我国存在甲霜灵抗性菌株的基础上，通过单游动孢子分离技术获得马铃薯晚疫病菌DZO1和HZO1无性后代菌系。研究了无性单游动孢子后代菌系的生物学特性及甲霜灵抗性，主要结果如下：对无性后代菌系的菌落形态、生长量和产孢能力进行测定，发现被测的DZO1和HZO1无性后代菌系大部分菌株的生物学性状与亲本菌株相比没有发生明显的变异，个别菌株的生物学性状与亲本菌株有显著差异。说明晚疫病菌的无性繁殖未引起较大的变异；对后代菌系的甲霜灵抗性水平进行测定，结果表明DZO1和HZO1无性后代菌系的甲霜灵抗性水平与其对应的亲本菌株基本相同。

简介：目的：获得齐口裂腹鱼过氧化物酶体增殖物激活受体Y辅助活化因子1a（PGC-1a）cDNA序列，探讨其在齐口裂腹鱼肌肉组织中的表达规律。方法：根据斑马鱼基因PGC-1a序列设计引物，提取齐口裂腹鱼肌肉组织总RNA，经RT-PCR扩增PGC-1a仪基因序列；利用半定量RT-PCR分析齐口裂腹鱼PGC-1a基因在红肌和白肌中的mRNA表达特性。结果：获得齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列2633bp，GenBank登陆号为JNl95738，其中ORF为2631bp，编码876个氨基酸残基，与同鲤科的斑马鱼、草鱼和金鱼的同源性较高，为88％～93％，但与哺乳动物和禽类如人、小鼠、大鼠、猪、牛和鸡的同源性较低，为49％～50％。在基础状态下，PGC-1a在齐口裂腹鱼红肌中的表达显著高于白肌，禁食可显著诱导PGC-1a在红肌和白肌中的表达水平。结论-首次克隆得到齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列，其在红肌中的表达显著高于白肌中，禁食可显著诱导其在红肌和白肌中的表达，为研究PGC-1a在齐口裂腹鱼肌肉中的作用提供了理论依据。

简介：目的构建人胰岛素基因真核高效表达载体,为胰岛素转基因研究奠定基础.方法用限制性内切酶SpeⅠ和HindⅢ消化pEF1α-GFP,回收1.2kbEF1α启动子,插入到pCMV-mINS的NruⅠ和HindⅢ位点中,获得重组质粒pEF1α-mINS;将pCMV-mINS和pEF1α-mINS分别转染BHK细胞,用G418筛选,阳性克隆传至20代后,分别用放免方法和免疫组化法分析胰岛素和/或胰岛素原在BHK细胞中的表达情况.结果经放免测定,pCMV-mINS和pEF1α-mINS在BHK细胞中胰岛素和/或胰岛素原的表达量分别为4.077μIU/ml和6.897μIU/ml.经免疫组化分析,pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为190.0±19.56;pEF1α-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为181.4±18.45,在BHK细胞核中表达水平的灰度值为155.4±11.66.结论在BHK细胞中启动子EF1α启动胰岛素基因表达的活性比启动子CMV高.

简介：目的:探讨核酸适体KMF2-1a为基础的乳腺癌细胞靶向化疗药物载体的应用价值。方法:采用细胞仪检测人体乳腺癌MCF-1OAT1细胞内吞KMF2-1a的药物载体的作用,其结果以分光光度计检测。结果:核酸适体KMF2-1a及其药物载体可被MCF-1OAT1细胞特异性内吞。结论:核酸适体KMF2-1a可用于靶向治疗乳腺癌。

简介：利用同源模建方法预测了t-PAK1区的三维结构。通过结构叠合确定了t-PAK1、K2区,纤溶酶原K1、K4区及UKK区的赖氨酸结合口袋。静电势计算及疏水性分析表明,在t-PAK2区以及纤溶酶原K1、K4区与纤维蛋白裸露的赖氨酸之间存在明显的静电势互补和疏水面契合。确定了影响Kringle区结合口袋与赖氨酸亲和的重要氨基酸,分析了t-PAK1区、UKK区不能结合赖氨酸的原因,由此设计了具有赖氨酸亲和力的新型t-PAK1区及UKK区突变体。利用模拟残基突变技术预测了突变体的结构变化,分析了突变后t-PAK1区及UKK区与赖氨酸亲和力的变化,初步在理论上肯定了设计方案的合理性。

简介：[目的]新型转基因棉花在进入大规模商业化应用前，需对其生态环境安全性进行评价；同时，经基因改造的新型转基因抗虫棉花可能影响抗虫棉的次生代谢，进而导致一些综合的生态学效应，致使棉花生理上发生改变，这也是转基因植物安全性评价研究的重要内容。[方法]比较了不同关键时期新型转Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉花与转Cry1Ac基因棉花和非转基因棉花叶片的鲜重、干重和干鲜比、主要酶[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和谷胱甘肽还原酶（GR）]活性、营养物质（蛋白质、氨态氮、脯氨酸和可溶性糖）和次生代谢产物（棉酚和单宁）含量的差异及其对棉田不同昆虫营养层昆虫个体总数和物种数的影响。[结果]棉花生长的蕾期、花期和花铃期，转Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉花、转Cry1Ac基因棉花和非转基因棉花叶片的鲜重、干重和干鲜比呈先升高后降低的趋势；SOD和POD活性在花铃期明显升高，CAT、APX和GR活性无显著变化；蛋白质、氨态氮含量无明显变化，脯氨酸和可溶性糖含量均表现为先升高后下降的趋势；棉酚含量在3个时期无显著变化，而单宁含量呈逐渐升高的趋势。3种棉花叶片中干物质积累、主要酶活性、营养物质和次生代谢产物含量均无显著差异；单株大铃数表现为转Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉花〉转Cry1Ac基因棉花〉非转基因棉花，小铃数则表现为转Cry1Ac基因棉花〈Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉花〈非转基因棉花；昆虫群落和害虫亚群落的昆虫个体总数均表现为转Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉田〈转Cry1Ac基因棉田〈非转基因棉田，天敌亚群落昆虫个体总数无显著变化；3种棉田中昆虫群落、害虫亚群落和天敌亚群落的物种数均未发生显著变化。[结论]转Cry1Ac＋Cry2Ab基因棉花叶片干物质积累、产量性