简介：摘要目的观察微小RNA(microRNA，miR)-195调控结直肠癌中Notch通路配体Delta样配体4(Dll4)表达，探讨其作用靶点，明确miR-195通过Notch通路抗结直肠癌的分子机制。方法收集北京大学人民医院胃肠外科2010年11月至2011年2月56例行结直肠癌根治术切除的标本，3、应用芯片技术筛选6例结直肠肿瘤组织和正常肠黏膜组织中micro-RNA的表达差异，用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-195在组织中相对表达量，应用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测56例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Notch通路中Dll4蛋白表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-195与Dll4 3’端非编码区(3’UTR)区的相互作用及活性，采用基因过表达miR-195(40 pmol/L)处理结肠癌细胞系SW480，运用流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响，Western blot检测通路相关蛋白Dll4、锯齿状蛋白1(Jagged1)、Notch受体胞内段(NICD)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、转录因子发状分裂相关增强子1(HES1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、核因子-κB(NF-κB)的表达。组间比较采用方差分析(ANOVA)，独立样本t检验比较蛋白表达量差异，统计学方法分别采用独立样本t检验、配对样本t检验及单因素方差分析。结果结直肠癌组织中miR-195表达水平明显低于正常肠黏膜，而Dll4蛋白表达水平高于正常肠黏膜，分别为正常肠黏膜的0.34倍(0.341±0.008)及1.92倍(1.922±0.003) (t＝3.116、2.374，P<0.05)，差异均有统计学意义，体外转入miR-195后，Dll4荧光素酶活性低于对照组(0.442±0.010、1.010±0.002，t＝4.305，P<0.01)，差异有统计学意义，miR-195和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)都可阻断Notch1通路，抑制SW480细胞的增殖(3.1%比17.3%，t＝4.232，P<0.01)，差异有统计学意义，诱导其凋亡(13.7%比48.3%，t＝8.355，P<0.01)，两者具有协同作用(t＝7.474，P<0.01)，差异有统计学意义。同时Notch通路相关蛋白NICD、Hes-1随作用时间延长而表达下降。结论结直肠癌中miR-195及Dll4呈拮抗性表达，与其病理学特征密切相关，Dll4为miR-195调控的下游靶基因，miR-195通过负性调控Dll4/Notch信号通路抗结直肠癌。

简介：摘要目的研究Delta样典型Notch配体3(DLL3)基因在脑胶质瘤中的表达特征及其临床意义，进而探索其在脑胶质瘤中的生物学功能。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库(CGGA)的两套mRNA测序数据集及其匹配的临床数据，其中数据集1包含325例样本，数据集2包含693例样本。应用R软件分析DLL3在不同世界卫生组织(WHO)分级、不同分子分型脑胶质瘤的表达模式，并应用免疫组织化学染色检测方法验证DLL3蛋白在不同WHO级别脑胶质瘤中的表达水平。通过Kaplan-Meier生存曲线评价DLL3不同表达水平的脑胶质瘤患者的生存差异。采用单因素和多因素Cox回归分析法分析影响脑胶质瘤患者总体生存期的因素。通过Pearson相关性检验分析与DLL3表达相关的基因。采用功能富集分析方法分析与DLL3表达相关基因的生物学功能。结果在数据集1中，DLL3的表达随着WHO级别的升高而下调，差异有统计学意义(P<0.001)；DLL3在异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变型患者中的表达量高于IDH野生型患者(P<0.001)；DLL3在IDH野生型患者中的表达量低于IDH突变型且染色体1p/19q共缺失患者和IDH突变型且染色体1p/19q非共缺失患者(P<0.001)；DLL3在O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化患者中的表达量高于非甲基化患者(P<0.001)；通过免疫组织化学染色方法验证DLL3表达随着WHO级别的升高而下调(P<0.01)；DLL3的上述结果在数据集2中得到相似结果。在两个数据集中，DLL3高表达组患者的总体生存期均长于低表达组患者(均P<0.01)。多因素Cox回归分析结果显示，WHO分级(WHO Ⅲ级：HR＝2.861，95%CI：1.910～4.287；Ⅳ级：HR＝4.655，95%CI：3.010～7.199)、染色体1p/19q共缺失(HR＝0.439，95%CI：0.293～0.657)以及DLL3高表达(HR＝0.593，95%CI：0.427～0.823)均为脑胶质瘤患者预后的独立影响因素(均P<0.001)。与DLL3表达相关的基因有661个(|r|≥0.4，P<0.05)；生物信息学分析提示，DLL3可能与脑胶质瘤患者的轴突发生、突触组织、负向调控神经系统发育等功能相关。结论随着脑胶质瘤病理学级别的升高，DLL3的表达水平下调；DLL3表达水平与脑胶质瘤患者的生存期密切相关，可作为判断脑胶质瘤患者预后的潜在指标和治疗靶点。

简介：摘要目的研究Delta样典型Notch配体3(DLL3)基因在脑胶质瘤中的表达特征及其临床意义，进而探索其在脑胶质瘤中的生物学功能。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库(CGGA)的两套mRNA测序数据集及其匹配的临床数据，其中数据集1包含325例样本，数据集2包含693例样本。应用R软件分析DLL3在不同世界卫生组织(WHO)分级、不同分子分型脑胶质瘤的表达模式，并应用免疫组织化学染色检测方法验证DLL3蛋白在不同WHO级别脑胶质瘤中的表达水平。通过Kaplan-Meier生存曲线评价DLL3不同表达水平的脑胶质瘤患者的生存差异。采用单因素和多因素Cox回归分析法分析影响脑胶质瘤患者总体生存期的因素。通过Pearson相关性检验分析与DLL3表达相关的基因。采用功能富集分析方法分析与DLL3表达相关基因的生物学功能。结果在数据集1中，DLL3的表达随着WHO级别的升高而下调，差异有统计学意义(P<0.001)；DLL3在异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变型患者中的表达量高于IDH野生型患者(P<0.001)；DLL3在IDH野生型患者中的表达量低于IDH突变型且染色体1p/19q共缺失患者和IDH突变型且染色体1p/19q非共缺失患者(P<0.001)；DLL3在O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化患者中的表达量高于非甲基化患者(P<0.001)；通过免疫组织化学染色方法验证DLL3表达随着WHO级别的升高而下调(P<0.01)；DLL3的上述结果在数据集2中得到相似结果。在两个数据集中，DLL3高表达组患者的总体生存期均长于低表达组患者(均P<0.01)。多因素Cox回归分析结果显示，WHO分级(WHO Ⅲ级：HR＝2.861，95%CI：1.910～4.287；Ⅳ级：HR＝4.655，95%CI：3.010～7.199)、染色体1p/19q共缺失(HR＝0.439，95%CI：0.293～0.657)以及DLL3高表达(HR＝0.593，95%CI：0.427～0.823)均为脑胶质瘤患者预后的独立影响因素(均P<0.001)。与DLL3表达相关的基因有661个(|r|≥0.4，P<0.05)；生物信息学分析提示，DLL3可能与脑胶质瘤患者的轴突发生、突触组织、负向调控神经系统发育等功能相关。结论随着脑胶质瘤病理学级别的升高，DLL3的表达水平下调；DLL3表达水平与脑胶质瘤患者的生存期密切相关，可作为判断脑胶质瘤患者预后的潜在指标和治疗靶点。

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简介：摘要炎症性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病，目前多认为其发病机制是环境因素作用于遗传易感者，在肠道菌群的参与下，启动了难以停止的、发作与缓解交替的肠道免疫反应。然而，其发病机制尚不十分明确，因此，进一步探讨和阐明炎症性肠病的发病机制对于寻找新的治疗方法具有重要的意义。肿瘤坏死因子样配体1A(tumor necrosis factor-like ligand 1 aberrance，TL1A)是新近发现的一种肿瘤坏死因子家族新成员，是炎症性肠病的易感基因。TL1A在黏膜炎症的固有免疫和适应性免疫之间起到了关键的调控和连接作用，从而在炎症性肠病中发挥重要作用。现将TL1A在炎症性肠病免疫调控机制中的作用进行综述。

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简介：摘要目的探讨核因子(NF-κB)配体的受体在Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路促成骨样细胞转化中的作用及其意义。方法分离健康雄性远交群(SD)大鼠主动脉平滑肌细胞(SMC)并诱导为成骨样细胞，分别用LiCl、LiCl+OPG(0.1 ng/ml)、LiCl+OPG(1.0 ng/ml)、LiCl+OPG(10.0 ng/ml)、LiCl+OPG(100.0 ng/ml)处理成骨样细胞，对照组未行LiCl及OPG处理，LiCl浓度均为20 mmol/L。RT-qPCR检测各组细胞OPG、RANKL转录水平；Von Kossa染色，钙离子含量测定，碱性磷酸酶(ALP)活性测定，骨钙素蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞钙化程度；免疫组织化学和Western blot检测Wnt/β-catenin通路激活情况。采用单因素方差分析，组内进一步两两比较采用LSD-t检验，两两比较采用t检验。结果LiCl组OPG的表达(4.35±0.88)稍高于成骨样细胞组(4.12±0.82，t＝0.603，P>0.05)，RANKL表达则LiCl组(2.61±0.42)显著高于成骨样细胞组(1.52±0.35，t＝2.317，P<0.05)；OPG/RANKL的比值LiCl(1.67±0.41)组显著低于成骨样细胞组(2.71±0.48，t＝2.542，P<0.05)。成骨样细胞的转化实验中，成骨样细胞组及加LiCl+OPG的4组钙离子含量、ALP活性、骨钙素的水平(25.2±5.8、68.5±13.3、61.1±12.8、57.6±11.3、56.3±11.4)、(80.4±10.2、141.2±17.6、125.7±15.3、123.5±15.9、122.7±15.1)、(0.61±0.10、0.82±0.14、0.79±0.13、0.72±0.12、0.73±0.13)均低于LiCl组(99.5±16.5)、(186.0±39.3)、(0.98±0.15)，(t＝5.971、2.795、2.810、2.829、2.831，P<0.05)、(t＝5.623、2.597、2.765、2.791、2.793，P<0.05)(t＝4.931、2.379、2.384、2.391、2.392，P<0.05)；加LiCl+OPG的4组中钙离子含量、ALP活性、骨钙素的水平差异无统计学意义(P>0.05)，均高于成骨样细胞组水平(t＝5.362、2.769、2.635、2.633，P<0.05)、(t＝5.105、2.758、2.732、2.733，P<0.05)、(t＝2.762、2.569、2.566、2.563，P<0.05)。Wnt/β-catenin通路的激活程度检测中，β-catenin的表达水平β-catenin表达水平LiCl组(1.75±0.26)高于成骨样细胞组及加LiCl+OPG的4组(1.32±0.18、1.25±0.17、1.25±0.16、1.22±0.16)，(t＝4.442、2.650、2.654、2.712、2.709，P<0.05)、加LiCl+OPG的4组高于成骨样细胞组(t＝2.492、2.455、2.439、2.437，P<0.05)，加LiCl+OPG的4组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论激活Wnt/β-catenin通路促进成骨样细胞转化的机制，有RANKL依赖性，也有非RANKL依赖性。

简介：摘要目的分析Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)改善脓毒症致小鼠急性肺损伤(acute lung injury，ALI)的机制。方法将45只小鼠分为三组：对照组(C组)，脓毒病组(S组)和预处理组(P组)，每组15只。S组的小鼠腹膜内注射10 mg/kg脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)，P组在注射LPS之前1 h，先注射了TLR4 mAb(5 μg/g)，C组小鼠腹膜内注射等质量的生理盐水。分别在6、12和24 h检测三组肺组织中TLR4的mRNA表达水平，肿瘤坏死因子(tumor Necrosis Factor，TNF)-α和白细胞介素(interleukin，IL)-6的血清表达水平及小鼠肺中的水分含量和肺部病理形态学变化。结果在6 h时，三组小鼠肺组织中水含量变化的组间差异无统计学意义(P>0.05)，而在12 、24 h时，S组小鼠肺组织中的水含量较C组和P组明显升高，组间差异具有统计学意义[12 h：(84.85±5.32) mg比(71.27±3.50)mg比(78.32±4.10)mg，24 h：(87.23±5.28)mg比(71.83±3.14)mg比(81.12±3.56)mg，F值分别为12.062和17.892，P值均<0.05]。在6 、12 、24 h时，S组小鼠血清中TNF-α表达水明显高于C组和P组，组间差异均有统计学意义[6 h：(259.43±18.47)pg/mL比(29.24±5.12)pg/mL比(155.35±13.26)pg/mL，12 h：(185.58±14.21) pg/mL比(33.31±3.46)pg/mL比(114.52±13.21) pg/mL，24 h：(115.26±16.65)pg/mL比(34.75±4.25)pg/mL比(81.45±10.44)pg/mL，F值分别为366.930，224.191和60.645，P值均<0.05]。随着LPS处理时间的增加，S组与P组小鼠血清中TNF-α表达水平明显降低(F值分别为285.123和134.257，P值均<0.05)。在6、12、24 h时，S组小鼠血清中IL-6表达水平较C组和P组明显升高，组间差异均有统计学意义[6 h：(234.41±24.65)pg/mL比(84.36±5.56)pg/mL比(157.26±17.43)pg/mL，12 h：(300.58±23.78) pg/mL比86.23±7.23)pg/mL比(204.64±15.37) pg/mL，24 h：(395.16±15.36)pg/mL比(84.75±9.25)pg/mL比(308.35±14.88)pg/mL，F值分别为89.621，202.495和708.632，P值均<0.05]。随着LPS处理时间的增加，S组与P组小鼠血清中IL-6水平明显升高(F值分别为208.460和352.900，P值均<0.05)。在6、12、24 h时，S组小鼠肺组织中TLR4 mRNA的表达水平较C组和P组明显升高[6 h：(1.707±0.087)比(0.305±0.034)比(1.203±0.055)，12 h：(1.278±0.075)比(0.324±0.025)比(0.926±0.046)，24 h：(0.917±0.089)比(0.315±0.024)比(0.413±0.047)，F值分别为643.833，417.294和146.190，P值均<0.05]。随着LPS处理时间的增加，S组与P组小鼠TLR4 mRNA的表达水平明显降低(F值分别为333.342和983.674，P值均<0.05)。结论TLR4在LPS诱导的ALI中起关键作用，TLR4 mAb减少炎症因子的分泌并减弱肺水肿的程度，因此TLR4对LPS诱导的ALI表现出保护作用。

简介：本文就石油钻具漏磁检测原理、标定样管的作用进行了阐述，借鉴参照31/2"钻具标定样管研制4"标定样管的可行性进行了分析，同时，对研制标定样管的现场应用情况进行了总结。实践表明，4"标定样管在钻具漏磁检测中应用是成功的，可以借鉴。

简介：摘要目的探讨乳腺癌组织中真核细胞起始因子4E(eIF4E)和Krüppel样因子4(KLF4)的表达及其临床意义。方法收集广东医科大学附属医院2016年1月至2020年10月病理学确诊的73例乳腺癌组织和相应癌旁组织，使用免疫组织化学方法检测eIF4E蛋白和KLF4蛋白在组织中表达情况，结合临床资料采用χ2检验。结果乳腺癌组织组中eIF4E蛋白表达率高于相应癌旁组织组中eIF4E蛋白表达率[79.45%(58/73)比20.55%(15/73)，χ2＝50.658，P<0.01]，两者差异有统计学意义。eIF4E表达水平与乳腺癌肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(χ2＝4.842、9.230、7.103、5.560，P<0.05)。乳腺癌组织组KLF4蛋白表达率高于相应癌旁组织组中eIF4E蛋白表达率[24.66%(18/73)比64.38%(47/73)，χ2＝23.321，P<0.01]，两者差异有统计学意义。KLF4表达水平与乳腺癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈明显相关[χ2＝8.977、6.403、5.256，P<0.05]。结论eIF4E蛋白在乳腺癌组织中高表达、KLF4蛋白在乳腺癌组织中低表达，检测eIF4E和KLF4有助于判断乳腺癌的生物学行为和评估乳腺癌患者预后。

简介：摘要目的检测趋化素样因子超家族6(CMTM6)及程序性死亡配体1(PD-L1)在胶质瘤组织中的表达，并分析两种蛋白的表达相关性及其对预后的影响。方法收集郑州大学第五附属医院神经外科收治的胶质瘤患者76例与同时期脑外伤开颅患者(对照组)40例，留取术中组织标本，通过免疫组织化学法(IHC)和蛋白质印迹法(Western blot)检测组织样本中CMTM6及PD-L1的表达情况，分别采用χ2检验及独立样本t检验分析表达是否有差异，并对两者表达做相关性分析。对胶质瘤术后患者随访36个月，并做生存分析。结果IHC结果显示CMTM6在胶质瘤组的阳性率明显高于对照组[77.6%(59/76)比22.5%(9/40)，χ2＝32.838，P<0.05]，差异有统计学意义，高级别胶质瘤(HGG)的阳性率明显高于低级别胶质瘤(LGG)[88.1%(37/42)比64.7%(22/34)，χ2＝5.919，P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的高表达率明显高于LGG[78.4%(29/37)比40.9%(9/22)，χ2＝8.449，P<0.05]，差异有统计学意义；PD-L1在胶质瘤组的阳性率明显高于对照组[51.3%(39/76)比12.5%(5/40)，χ2＝16.771，P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的阳性率明显高于LGG[61.9%(26/42)比38.2%(13/34)，χ2＝4.214，P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的高表达率明显高于LGG[50.0%(13/26)比7.7%(1/13)，P<0.05]，差异有统计学意义；CMTM6与PD-L1表达呈现显著相关性(r＝0.535，P<0.05)。蛋白质印迹法(Western blot)结果，CMTM6在胶质瘤中的表达高于对照组(1.04±0.51比0.32±0.06，t＝12.174，P<0.05)，差异有统计学意义，在HGG中的表达高于LGG(1.26±0.46比0.78±0.44，t＝4.641，P<0.05)，差异有统计学意义，PD-L1在胶质瘤中的表达高于对照组(0.68±0.57比0.21±0.11，t＝6.896，P<0.05)，差异有统计学意义，在HGG中的表达高于LGG(0.92±0.61比0.38±0.32，t＝4.963，P<0.05)，差异有统计学意义。Kaplan-Meier生存分析显示，CMTM6/PD-L1表达阳性者预后比阴性者差(χCMTM62＝5.371，χPD-L12＝9.570，P<0.05)，高表达者预后比低表达者差(χCMTM62＝7.282，χPD-L12＝6.777，P<0.05)。结论CMTM6/PD-L1在胶质瘤组织中明显表达上调，且两者呈正相关，表达强度与胶质瘤的病理级别紧密相关，表达水平与生存时间呈负相关。

简介：无

简介：摘要目的探讨Krüppel样因子4（KLF4）在巨噬细胞炎症反应中的表达特点与作用及其对脓毒症小鼠炎症反应与脏器损伤的作用，为烧创伤脓毒症的靶向治疗奠定理论基础。方法采用实验研究方法。取小鼠RAW264.7巨噬细胞与从10只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠中提取的原代腹腔巨噬细胞（PM）进行实验。采用内毒素/脂多糖（LPS）分别处理RAW264.7巨噬细胞与PM 0（未处理）、1、2、4、6、8、12、24 h构建巨噬细胞炎症反应模型，采用实时荧光定量反转录PCR（RT-PCR）法检测白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、CC趋化因子配体2（CCL2）与肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达，据此确定后续部分实验LPS处理时间。用LPS处理RAW264.7巨噬细胞0、8 h，采用免疫荧光法检测KLF4的定位与蛋白表达；利用高通量测序技术平台对细胞进行转录组测序，采用DESeq2软件筛选2种处理时间细胞间的差异表达基因（DEG）。采用LPS分别处理RAW264.7巨噬细胞与PM 0、1、2、4、6、8、12、24 h，分别用实时荧光定量RT-PCR法与蛋白质印迹法检测KLF4的mRNA与蛋白表达。将RAW264.7巨噬细胞按随机数字表法分为阴性对照组与KLF4过表达组，分别转染对应质粒后用LPS处理0、8 h，采用实时荧光定量RT-PCR法检测KLF4、IL-1β、IL-6、CCL2与TNF-α的mRNA表达，采用蛋白质印迹法检测KLF4蛋白表达。前述实验样本数均为3。将40只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为KLF4过表达组和阴性对照组（每组20只），分别注射相应转染注射液后构建盲肠结扎穿孔脓毒症模型。采用随机数字表法从2组小鼠中各选取12只，观察建模后72 h内生存情况。于建模后8 h取2组分别剩余的8只小鼠，先行眼球取血，采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-1β、IL-6水平，采用干化学法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平；后取心脏、肺脏、肝脏组织，行苏木精-伊红染色后观察损伤情况。对数据行独立样本t检验、Cochran&Cox近似t检验、单因素方差分析、Dunnett检验、Brown-Forsythe和Welch单因素方差分析、Dunnett T3检验、log-rank（Mantel-Cox）检验。结果与LPS处理0 h比较，LPS处理6 h与8 h RAW264.7巨噬细胞中IL-1β mRNA表达、LPS处理4~12 h RAW264.7巨噬细胞中IL-6 mRNA表达、LPS处理8 h和12 h RAW264.7巨噬细胞中CCL2 mRNA表达以及LPS处理4~8 h RAW264.7巨噬细胞中TNF-α mRNA表达均显著上调（P<0.05或P<0.01），LPS处理4~8 h PM中IL-1β与CCL2 mRNA表达、LPS处理2~24 h PM中IL-6 mRNA表达以及LPS处理2~12 h PM中TNF-α mRNA表达均显著上调（P<0.05或P<0.01）。选取8 h作为后续部分实验的LPS处理时间。KLF4主要定位在RAW264.7巨噬细胞的细胞核中。与LPS处理0 h比较，LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4蛋白表达明显减少；LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中有1 470个差异表达显著的DEG，包括转录表达显著下调的KLF4［错误发现率<0.05，log2（差异倍数）=-2.47］。与LPS处理0 h比较，LPS处理6~24 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4 mRNA表达、LPS处理1~24 h RAW264.7巨噬细胞与PM中KLF4蛋白表达以及LPS处理4~24 h PM中KLF4的mRNA表达均明显降低（P<0.05或P<0.01）。与阴性对照组比较，KLF4过表达组LPS处理0、8 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4的mRNA（t'值分别为17.03、8.61，P<0.05或P<0.01）与蛋白表达均明显升高，LPS处理0 h RAW264.7巨噬细胞中IL-6、CCL2的mRNA表达均明显升高（t值分别为6.29、3.40，P<0.05或P<0.01），LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中IL-1β、IL-6、CCL2、TNF-α的mRNA表达均显著下降（t值分别为10.52、9.60、4.58、8.58，P<0.01）。KLF4过表达组小鼠建模后72 h内生存比例明显高于阴性对照组（χ2=4.01，P<0.05）。建模后8 h，KLF4过表达组小鼠血清中IL-1β、IL-6与ALT、AST水平分别为（161±63）、（476±161）pg/mL与（144±24）、（264±93）U/L，明显低于阴性对照组的（257±58）、（654±129）pg/mL与（196±27）、（407±84）U/L（t值分别为3.16、2.44与4.04、3.24，P<0.05或P<0.01）。建模后8 h，与阴性对照组比较，KLF4过表达组小鼠心脏、肺脏、肝脏的组织结构紊乱减轻，炎性渗出明显减少，脏器实质细胞病理样改变明显减轻。结论KLF4在LPS诱导的巨噬细胞炎症反应中表达显著下降，显著抑制巨噬细胞炎症反应；KLF4显著提高脓毒症小鼠生存率并缓解炎症反应与脓毒症相关脏器损伤。

简介：无

简介：摘要目的通过观察脂多糖(LPS)诱导的Toll样受体4(TLR4)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内质网应激通路蛋白表达水平的影响，探讨内质网应激对小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法2015年10月至2016年2月选择ApoE-/-小鼠24只，高脂喂养10周后数字抽签随机分为对照组、LPS组、TLR4的特异性抑制剂TAK(TAK组)，各8只。干预10周后取眼球血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。处死小鼠留取颈动脉和主动脉标本。免疫组化法检测颈动脉斑块巨噬细胞(MOMA-2)、平滑肌肌动蛋白(α-actin)、TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNFα)及κ基因结合核因子(NFκB)的表达。免疫印迹法检测PKR样真核起始因子2α激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)的水平。结果LPS组小鼠与对照组和TAK组小鼠比较，TC(25.0±2.3)mmol/L比(20.2±1.6)mmol/L、(20.8±2.6)mmol/L、TG(1.3±0.1)mmol/L比(1.3±0.1)mmol/L、(1.0±0.1)mmol/L、ox-LDL(17.4±1.3)mmol/L比(15.8±1.6)mmol/L、(12.1±1.1)mmol/L水平升高(P<0.05)；斑块形态学及病理学比较，LPS组小鼠动脉粥样硬化斑块范围大，巨噬细胞含量增多(P<0.05)，平滑肌细胞含量减少(P<0.05)，斑块TLR4、IL-1β、IL-6、TNFα及NFκB的表达水平较其他两组增加(P<0.05)；PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加(P<0.05)。与对照组比较，TAK组PERK、CHOP、GRP78的表达水平减少(P<0.05)。LPS组TLR4，质网应激通路蛋白PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加。结论LPS诱导的TLR4可上调内质网应激通路蛋白的表达，且引起内质网应激下游炎性细胞因子分泌增加，加重脂质代谢紊乱，增加动脉硬化斑块的不稳定性。

简介：摘要干细胞样记忆性T细胞(stem cell-like memory T cell，TSCM)是记忆T细胞的重要组成，具有干细胞样自我更新、多分化潜能和免疫重构特性。有别于中枢记忆T细胞(central memory T cell，TCM)或效应记忆T细胞(effective memory T cell，TEM)亚群，TSCM具有初始T细胞表型且分化程度较低。CD4＋TSCM细胞在疾病发生发展中发挥保护性或致病性双重作用，现就记忆T细胞的形成机制和CD4＋TSCM生物学特性做一综述，进而探讨其在艾滋病、肿瘤、结核和自身免疫性疾病中的作用。

简介：摘要目的探讨硫酸钙对成骨样MG-63细胞增殖情况及骨保护素/核激活因子受体配体/核激活因子受体(OPG/RANKL/RANK）系统的影响。方法制作硫酸钙浸提液，将含有硫酸钙浸提液的细胞培养基设为硫酸钙组，不含硫酸钙的普通细胞培养基设为空白对照组，分别培养成骨样MG-63细胞24 h。观察两组细胞的生长情况，通过细胞增殖实验(CCK-8)检测细胞的增殖活性，并检测OPG/RANKL的mRNA和蛋白表达水平。结果硫酸钙组和空白对照组成骨样MG-63细胞的生长情况均较好。在CCK-8增殖试验中，硫酸钙组与空白对照组的吸光度值分别为0.997±0.008、0.640±0.003，差异有统计学意义（P<0.001）。硫酸钙与空白对照组OPG的mRNA相对表达量分别为2.834±0.176、1.005±0.102；RANKL的mRNA相对表达量分别为0.355±0.035、1.002±0.068，差异均有统计学意义（P<0.001）。蛋白质免疫印记结果显示：与空白对照组相比，硫酸钙组中的硫酸钙能促进成骨样MG-63细胞OPG的蛋白表达，并抑制RANKL的蛋白表达。结论硫酸钙能促进成骨细胞样MG-63细胞的增殖与活性，并可调控OPG/RANKL/RANK系统，具有一定的促骨形成作用。

简介：摘要视力障碍人士需要各种视障辅助器具（简称视障辅具）进行补偿或代偿视觉，同时接受视障辅具使用训练及定期功能评估以加强技能。目前，社会机构服务模式、医院低视力门诊模式、流动诊所或项目服务模式等传统的视障辅具适配的康复治疗是有效的，但受到地域、人才、科技、资源等方面的限制，服务覆盖面有限，尚未全面满足视障人士需求。远程、基于互联网的现代化视障辅具智能适配模式已被应用于临床中，并发挥着重要的作用。现就智能视障辅助器具适配体系研究进展作一综述，旨在为视障康复提供新的思路，提高视障康复效率。

简介：摘要糖皮质激素(GCs)应用于临床已有60余年的历史，临床上常用于治疗免疫性疾病和过敏性疾病，尤其近年来，随着免疫性及炎症性疾病发病率的增长，GCs类药物的临床应用也呈逐年上升趋势。因此，GCs的不良反应问题也愈发受到关注。剖析GCs作用机制，找到新的糖皮质激素受体(GR)配体，使其既有抗炎及免疫抑制作用，且不伴不良反应是医学领域亟待解决的重要问题。现就GR配体的研究进展作一综述。

简介：摘要目的登革病毒（dengue virus，DENV）的NS5蛋白主要起RNA依赖的RNA聚合酶（RdRp）作用，本研究旨在通过构象型噬菌体展示肽库筛选潜在的抗病毒前体药物。方法以可溶性重组DENV-2 NS5蛋白为靶点，从构象型噬菌体展示肽库中筛选高特异性寡肽（oligopeptide，OP），并通过分子对接技术验证OP与RdRp之间的相互作用。将感染DENV-2的C6/36细胞暴露于不同浓度的OP中，并通过RT-qPCR检测病毒滴度，以此来评估OP的抗DENV-2作用。同时，将C6/36细胞暴露在较高浓度的OP中进行培养，并通过CCK-8法测定细胞活性以评估OP的细胞毒性。结果通过分子对接发现，OP可特异性结合于DENV NS5蛋白的RdRp结构域。在体外实验中发现，OP可以抑制DENV复制，且在细胞实验中未表现出细胞毒性。此外，基于RdRp结构域在单股正义链RNA（+ssRNA）病毒中的高度保守性，并利用分子对接技术初步发现，OP可能同样结合于多种+ssRNA病毒的RdRp活性空腔。结论OP可能具有广谱的+ssRNA病毒RdRp抑制能力，是一个潜在的广谱抗病毒前体药物。