简介:目的:基于PI3K/AKT通路探讨芪灵扶正清解颗粒对肝癌细胞凋亡的影响。方法:HepG2细胞培养条件见参考文献[2]。种板24h后,分为2组,其中空白组更换新鲜培养液培养;给药组以5mg/mL的含芪灵培养液处理,干预48h后继续后续实验。按照传统方法提取蛋白样本。结果:透射电镜结果显示与空白组相比,芪灵组细胞具备明显的早期凋亡特征,证实芪灵扶正清解颗粒能够诱导HepG2细胞凋亡。此外,本研究中芪灵组磷酸化的PI3K、AKT蛋白表达量较空白组显著下降,说明芪灵能够抑制肝癌细胞HepG2中PI3K/AKT通路的活性。结论:芪灵扶正清解颗粒促进肝癌细胞凋亡并抑制其增殖能力收可能与PI3K/AKT信号通路有关。
简介:目的:构建表达报告基因荧光素酶和肿瘤相关抗原间皮素(mesothelin,MSLN)基因的胰腺癌细胞系,评估其作为靶细胞在评价免疫细胞的肿瘤杀伤效力中的应用。方法:构建表达荧光素酶、MSLN基因的慢病毒载体,包装慢病毒,感染胰腺癌细胞系,抗生素筛选后,有限稀释法获得单细胞克隆,并验证目的基因的稳定表达。实时无标记细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)和荧光素酶活性检测方法体外检测免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效力。将构建的细胞系接种B-NDG小鼠建立表达荧光素酶的胰腺癌肿瘤模型,利用活体成像技术检测荧光素酶表达水平,监测小鼠体内胰腺癌肿瘤生长情况。在胰腺癌小鼠模型中验证嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞的肿瘤杀伤能力。结果:本研究建立了稳定表达荧光素酶和MSLN基因的胰腺癌细胞系panc-1-luc、panc