简介:Abstract:TheP24antigentest,HIVRNAPCRtest,HIVisolation/cultureandfourth-generationHIVuniformAg/AbassayarebeingutilizedindiagnosingacuteHIVinfectionindifferentlabs.ManyfactorslimittheuseofscreeningforacuteHIVinhigh-riskpopulations,inblooddonorsandduringvoluntaryHIVtesting,including,cost,technique,sensitivityandspecificity.InthisreviewweexploreanewNAATmethodwhichinvolvesHIVRNART-PCRonpooledsamples.Thistechniqueisabletoscreenforacuteinfectionsinalargetestingvolumeandmayheusedasascreeningmethodinhigh-riskpopulationsandblooddonors.
简介:Objective:Infectionofhumanpapillomavirusincondylomaacuminatum(CA)wasdetectedbyrealtimefluorescencequantitativePCR(FQ-PCR)technique.Methods:SpecimensofCA-DNAquantificationfrom94caseswereexaminedbyrealtimeFQ-PCRtechniqueand32caseswerecomparedwiththesamemethodafter10-daystreatment.Results:CA-DNAwasfoundinallpatients,withanaverageof4.0×10^6copies/ul.After10daysoftreatment,theaveragewas2.1×10^5copies/ul.TherewasasignificantdifferenceintheaverageamountofCA-DNAbeforeandafterthetreatment.Conclusion:RealtimeFQ-PCRisagoodmethodforexaminingCA-DNAamountanditcandirectthetreatmentofCA.
简介:Objective:Tocomparethesensitivityandspecificityofthecervical/urethralswabswithvoidedurinespecimensforthedetectionofgenitourinarytractinfectionwithChlamydiatrachomatisanddeterminewhetherurinespecimenscanreplacethecervical/urethralswabsindetectionofC.trachomatis.Methods:Thematchedcervical/urethralswabsandvoidedurinespecimenswerecollectedfrom569patientsofSTDclinics.Polymerasechainreaction(PCR)assayspecificforC.trachomatisplasmidDNAandrapidantigentesting(Clearviewassay)wasusedtodetectC.trachomatis.Standardcriteriathatdefined""""true""""positiveincluded:1)positivePCRresultsbothincervical/urethralswabandvoidedurinespecimenor2)positivevoidedurineresultsbothbyPCRassayandclearviewtestor3)positiveresultsinbothPCRassayofcervical/urethralswabandclearviewtestofvoidedurine.Forstatisticalanalysis,thechi-squaretestwasused.Results:TheprevalenceofC.trachomatisinpatientswithsymptomswas12.1%(28/231)inwomenand10.4%(10/96)inmen,withnosignificantdifferencebetweenthem(x^2=0.21,P>0.05).TheprevalenceofC.trachomatisinpatientswithnosymptomswas11.0%(11/100)inwomenand15.5%(22/142)inmen,withasignificantdifferenceexistingbetweenthem.(x^2=4.0,P<0.05).Nosignificantdifference(P>0.05)existedbetweenPCRtestingofswabs(sensitivity87.3%;specificity99.2%)andPCRtestingofurine(sensitivity88.7%;specificity98.8%).Asforclearviewassay,sensitivitywas60.6%andspecificitywas100%.Conclusions:PCRassayissuperiortoclearviewindetectingC.trachomatis.AlthoughbothPCRtestingofswabsandPCRtestingofurinespecimensbothhavehighsensitivityandspecificity,urinespecimentestingismorecost-effective,practicalandnoninvasive.ThusurinespecimenscantaketheplaceoftheswabsinPCRtestingforchlamydia.
简介:目的评价PCR检测女性自取阴道下端拭子标本诊断淋病的检验效果方法每例入选者均取2个宫颈拭子标本和1个自取阴道下端拭子标本,1个宫颈拭子标本和自取阴道下端拭子标本行淋球菌PCR检测,另1个宫颈拭子标本行淋球菌培养。结果共有298例入选者。诊断出淋病31例。宫颈拭子培养、宫颈拭子PCR、自取阴道下端拭子标本PCR的敏感性分别是75.8%(25/33),87.9%(29/33)和97.0%(32/33),特异性分别是100%(265/265),99.6%(264/265)和99.6%(264/265)。结论自取阴道下端拭子标本PCR检测淋球菌的敏感性至少不低于传统的宫颈拭子,自取阴道下端拭子标本可以替代宫颈拭子行PCR诊断女性淋病。
简介:目的:建立一种快速、稳定、灵敏且可定量的检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。方法:根据马尔尼菲青霉ITS序列,设计并合成引物,通过常规PCR扩增目标序列后,将鉴定正确的目的基因片段克隆入pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,得出拷贝数与循环阈值之间的线性关系曲线表达式,并做灵敏性、特异性试验。结果:荧光定量PCR标准曲线阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为1.938,最低检测的拷贝数为8.5个/反应管。结论:建立了检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析感染程度及对治疗的指示作用奠定了良好的基础。
简介:目的:调查重庆市区人群的皮肤光型(又称日光反应性分型),以及最小红斑量(MED)和最小持续黑化量(MPPD)的范围。方法按照Fitzpatrick分型问卷调查皮肤类型,GS2004/2006多波段日光模拟器测定受试者的MED和MPPD。结果200名受试者的Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型皮肤分别占15.0%、73.5%、11.5%,未见Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ型皮肤。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型皮肤MED均值分别为(63.21±18.22)mJ/cm2、(70.23±17.01)mJ/cm2、(78.45±20.11)mJ/cm2,MPPD均值分别为:(12.52±3.41)J/cm2、(10.22±3.09)J/cm2、(8.43±2.51)J/cm2,从Ⅱ型~Ⅳ型皮肤,MED值逐渐增加,而MPPD值逐渐减小,在不同皮肤类型之间差异有统计学意义。不同年龄组皮肤类型分布差异无统计学意义(P>0.05),不同性别人群皮肤类型分布差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论在所调查的重庆市人群中皮肤类型以Ⅲ型为主,其MED、MPPD平均值分别(70.23±17.01)mJ/cm2、(10.22±3.09)J/cm2,重庆市人群皮肤类型与国内其他几所大城市的研究结果较为一致,而紫外线MED、MPPD值范围与国内其他地区有一定差异。
简介:Objective:Todevelopasensitive,specificandsimplemethodfordetectionofextremelylownumbersofT.palliduminclinicalspecimens,asasignificantadditiontotheserologictestsforsyphilisdiagnosis.Methods:Double-tubenestedPCR(DN-PCR)andsingle-tubenestedPCR(SN-PCR)assayswereperformedtoamplifyspecificfragmentsoftheDNApolymeraseIgene(polA)ofT.pallidum.SensitivityandspecificityofthetwoPCRassaysweretested.EightysixwholebloodspecimensfrompersonswithsuspectedsyphilisweredetectedbythetwonestedPCRmethods.TheTPPAtestwasusedasacomparisonfordetectingsyphilisinserafromcorrespondingpatients.Results:OnlyspecificampliconscouldbeobtainedduringamplificationoftheT.pallidumpolAgeneandthedetectionlimitwasapproximately1organismwhenanalyzedongelbythetwoPCRmethods.Of86clinicalspecimens,62werepositivebyTPPA.Ofthese,54and51werepositivebytheDN-PCRandSN-PCR,respectively,whichdoesnotrepresentastatisticallysignificantdifferencebetweenthetwoPCRtests.Of24TPPA-negativespecimens,5werepositivebybothDN-PCRassayandSN-PCRassay.Conclusion:TheSN-polAPCRmethodisextremelysensitive,specificandeasytoperformfordetectinglownumbersofT.palliduminclinicalbloodspecimensasacomplementarytoserologyforsyphilisdiagnosis.
简介:Objectives:TodevelopamethodofsimultaneousPCRdetectionofHaemophilusducreyi,Treponemapallidum,andHerpesSimplexVirusTypes1and2fromgenitalulcersamongpatientsattendingSTDclinicsinGuangzhou,China;andevaluatetheclinicalapplicationofmultiplexPCR(M-PCR)assayfordiagnosingtheetiologyofgenitalulcerdiseases(GUD).Methods:244patientswithagenitalulcerwereevaluated.ClinicaletiologyofGUDwasbasedonphysicalappearanceandmicrobiologicevaluationsthatincludeddarkfieldmicroscopyexamination(D-F)andserologytestforsyphilis(STS).SwabsofeachgenitalulcerweretestedforHSVantigenbyenzymeimmunoassay(EIA)andprocessedinanM-PCRassayforsimultaneousdetectionofT.pallidum,HSVandH.ducreyi.Results:ThestandardstrainsofT.pallidum,HSVandH.ducreyiwereamplifiedbyM-PCR,producingamplifiedproductsof260bp,432bp,170bp,respectively.ThesensitivityofM-PCRis102pgDNA.M-PCRassayforT.pallidum,HSVandH.ducreyishowedgoodagreementwhencomparedwithD-FdetectionforT.pallidum,STS,H.ducreyicultureandEIAforHSVantigen(Kappascoresare0.774,0.704,0.793,0.756,respectively).Conclusions:TheM-PCRisaconvenient,accurateandreliableassayforthedetectionofT.pallidum,HSVandH.ducreyifromgenitalulcers,andcanbeusedasamethodofdiagnosingtheetiologyofGUD.
简介:目的比较荧光多重PCR和血清型特异性抗体测定在生殖器疱疹临床诊断中的应用价值及评价各自的优缺点。方法以细胞培养法作为“金标准”对照,分别用荧光多重PCR和血清型特异性抗体检测法对121例临床诊断为生殖器疱疹的标本进行检测。结果以培养法作标准,并通过结果的差异性分析,荧光多重PCR的敏感性为100%,特异性为88.89%;血清型特异性抗体测定则分别为77.68%和77.78%,荧光多重PCR的敏感性和特异性均显著高于血清型特异性抗体测(P<0.05),但前者不能检测出无皮损患者的HSVDNA,而后者可检测出无皮损患者中的HSV抗体。结论荧光多重PCR和血清型特异性抗体检测各有其自身的优缺点,单独用PCR和其它病毒分离的方法或单独使用血清特异性抗体检测的方法来诊断生殖器疱疹都是不完整的,均可造成漏诊。临床上将两种方法有机的结合起来应用能发挥各自的优势,取长补短,对早期、准确、快速地诊断生殖器疱疹及进行流行病学调查将有十分重要的意义和使用价值。
简介:目的:探讨雾霾天气对荨麻疹发病、病情和心理状态的影响。方法:选取2015年12月至2016年3月共122天的时间作为观察窗口,记录每日的空气质量情况及荨麻疹就诊例数占皮肤科门诊量的构成比,并对两者进行相关性分析;空气质量情况按照空气质量指数(AQI),分为优良(0-100)、轻中度污染(101-200)、重度污染(大于200),分别将于上述期间就诊的急性荨麻疹患者分为非雾霾组、轻中重度污染组及重度污染组,比较三组患者平均就诊量,并对非雾霾组与重度污染组患者的病情严重程度评分、呼吸道伴发症状、情绪状态评价和皮肤过敏原点刺试验进行比较。结果:急性荨麻疹的就诊量构成比与空气质量指数、PM_(2.5)、PM_(10)、NO_2、SO_2日均浓度均呈正相关(r'值分别为0.629、0.631、0.632、0.511、0.376,P值均小于0.01)。非雾霾日、轻中度污染日、重度污染日,急性荨麻疹日均就诊量构成比分别为(7.71±1.97)%、(9.78±1.77)%、(11.55±1.59)%,三组结果比较均有明显差异(P〈0.01)。重度污染组196例与非雾霾组392例的平均荨麻疹活动性评分(UAS)分别为3.60±1.34、3.34±1.30,两组差异有统计学意义(t=2.26,P=0.002),呼吸道症状发生率分别为30.10%(59/196)、14.29%(56/392),两组差异有统计学意义(x~2=20.78,P〈0.01)。重度污染组患者的抑郁或(和)焦虑发病率为41.38%,显著高于非雾霾组的22.11%(x~2=8.82,P=0.003)。皮肤过敏原点刺试验显示重度污染组尘螨的阳性率显著高于非雾霾组(x~2=4.46,P〈0.05)。结论:急性荨麻疹就诊量与空气污染存在显著相关性,并且随着空气污染的加重而增加,推测雾霾天气会促发急性荨麻疹发病,并可能加重病情;重度雾霾天就诊的荨麻疹患者呼吸道症状的伴发率增加,抑郁和焦虑的伴发率也显著增加,推想重度雾霾天气对患者的呼吸系统、�
简介:目的:研究中波紫外线照射对永生化人角质形成细胞的影响。方法:绘制细胞生长曲线,用不同剂量UVB(30、60、90mJ/cm2)照射永生化人角质形成细胞,用MTT方法测定UVB照射后细胞的增殖活性,用RT-PCR方法测定HaCaT细胞中MMP-1mRNA和TIMP-1mRNA的表达。结果:UVB照射后,HaCaT细胞的增殖活性受到抑制,MMP-1mRNA表达增强,TIMP-1mRNA表达下降,90mJ/cm2照光组与未照光组比较,差异均有统计学意义。结论:UVB照射可诱导HaCaT细胞损伤和细胞凋亡,促使MMP-1mRNA表达增加,TIMP-1mRNA表达减少,二者比例失调,这可能与光老化的发生有一定的关系。
简介:患者男,18岁。双侧掌跖部位皮肤增厚伴红斑、瘙痒17年,缓慢加重12年余。皮损表现为双侧手掌及足底可见广泛、对称性黄色角化性斑块,其间见大小不等、形状不规则的红斑,上覆白色鳞屑;双手掌侧及双足跖皮肤对称性粗糙、增厚,基底红色,上覆较多白色鳞屑,境界清楚;双足第4、5趾缝间皮肤浸渍发白,伴异味;双足趾甲变形、增厚呈暗黄色,无多汗。皮损组织病理示:皮肤角化亢进,角质层增厚,颗粒层及棘层均增厚,真皮上部血管周围可见少数淋巴细胞。基因检测示:患者为SLURP-1基因c.256G>A(p.G86R)和c.212G>A(p.R71H)复合杂合变异。诊断:Meleda角化病。