简介:为了研制新型细胞因子制剂,将鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因和鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因通过多肽氨基酸接头(Linker)连接在一起构成mChIL-18/mChIFN-α融合蛋白基因,并构建原核重组表达载体,以期表达具有生物学活性的融合蛋白。以mChIL-18cDNA与mChIFN—αDNA为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到mChIL-18/mChIFN-α融合DNA。将回收的DNA克隆于pGEM—TEasy载体,并对其进行了测序。测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18/mChIFN—α融合分子DNA。将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-mChIL-18/mChIFN-α。pQE30-mChIL-18/mChIFN—α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础。
简介:近日,笔者从天津农学院植物细胞工程研究中心获悉,该中心以酸模植物为材料,利用植物细胞诱变克隆技术,培育出了耐盐碱高蛋白饲草新品种———百腾鲁美,经天津市科委专家委员会鉴定,其产量、品质、抗性等技术经济指标为国内领先水平,是一种适应性强、耐盐碱的高蛋白饲料作物。现由天津市百腾生物科技有限公司开发生产,已形成700公顷地的供种能力。据天津农学院农学系教授张磊介绍,这种牧草是一种高蛋白质饲料作物,富含18种氨基酸。在饲养动物的种类、青绿饲料供应时间、土壤及地域适应范围、耐盐碱能力、经济效益等方面,都远远超过国内现有饲(牧)草品种,以及国外已有的饲(牧)草品种。张磊说,这种牧草有两大特点:一是适口性非常好,可饲喂猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、兔、鱼等动物,青绿饲料供应时间早、时间长。以天津为例,露地状态最早可在4月中旬开始采收饲喂,比其他饲(牧)草早20~70天,多茬收获,每茬30~40天,可持续至上冻前的12月前后,年供应7个月左右。在长江以南,从四川至广东的大部分地区露地可周年采收。剩余的牧草,可与秸秆混合青贮,或加工成草粉,用于淡季饲喂,做到全年供应。二...
简介:试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板,通过设计的特异性引物PCR扩增出(NDV)HN基因片段,连接至pMD-18T载体,通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中,转化到感受态细胞Rosetta中,获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒,用lmmol/LIPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示,HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,表达产物大小约为90KD左右,western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。