简介:摘要随着对早期胚胎发育各阶段的深入探索,尤其是对合子基因组激活以及第一次细胞分化的研究,研究者发现早期胚胎表观遗传学遵循着严密的时空修饰机制。既往研究已确定H3K9me3和H3K27me3对基因组表达的抑制效应,明确它们在基因组中参与了许多重要的生物学事件,如染色质重编程、基因组印记、胚胎干细胞干性维持及体细胞克隆等,但其涉及的详细分子机制和作用机理仍不完全清晰。本文从发育生物学和表观遗传学方面,阐述早期胚胎组蛋白H3K9me3和H3K27me3研究进展,为了解胚胎发育的复杂机制以及进一步完善体外胚胎培养技术提供理论基础。
简介:【摘要】本文通过简要介绍河北省丰宁抽水蓄能电站施工项目中选购装载机方法,对国内外装载机进行分析研究,结合实际施工要求总结出了选购中注意事项。
简介:摘要:社会需求,教学手段的发展,教学技术的更新,教学教育功能的开发,教学设计者的态度和思想,都在影响着当前教育教学效果,提倡以学生发展为目标,建立更加适应学生的教育思想,教学载体多样化,让各具个性的学生,在集中教学中都受益,达到学生全面提升的效果,是我们所追求的课堂教学目标。本文提出,对于每次课的主体知识点,不能“昙花一现”,也不要单线联系,要在“双案——四线”中同时并进,各条线不是互相取代,更不是相互抵触,而是“从A地到B地的并联”关系,知识结构中有,问题练习中有,课本中有,学案中有,ppt课件中仍然有,预习时涉及,互动探究时深入,收尾训练时巩固,坚持每一节课的节奏都是“合奏”与“混响”,这些“自助餐”式的学习载体,总有合适的“音频”或“食品”能够引起学生的“食欲”或“共鸣”。老师就是“编创者兼音乐指挥”,舞台上各个声源如何更和谐,何时发声,发什么样的调子,要融入作曲创编者和指挥者的才智,才可以欣赏到优美的交响乐。一节课的内容看起来不多,但学生的理解情况多,要让每个学生都得到最好的教育,教师就必须坚持多角度付出,无论“课本画块描线”“系统制作课件”“精心编制学案”“知识分层主线”“问题例题训练”“音像动画图片”“生生动态答辩”“引导学生会战”等等,这一宗才构成备课的教学方案,才能为一节优质课创造稳固的基础。在教学管理与实施中,教育的节点和情景信息都不是固定的,更不可能把学情都看作是一致的,在分层教育活动时,无论是人、事、资源、行为,多采用“3+3+3”的划分去操作,又可以将教育的精准度提升三倍以上。
简介:摘要2017年1月至2018年6月3例纵隔肿瘤伴上腔静脉阻塞综合征患者行全上腔静脉置换术,根据3D-CTBA重建影像技术进行术前手术规划,确定上腔静脉、左无名静脉、右无名静脉的形态、直径、受累范围和纵隔病灶的大小、部位。充分术前准备,麻醉干预。按照3D-CTBA重建结果,术中精准分离肿瘤周围组织,切除被侵组织肿瘤病灶和受累的上腔静脉、左无名静脉、右无名静脉部分。完整切除纵隔肿瘤,应用合适材料(人工血管、自体心包)行上腔静脉、左无名静脉、右无名静脉血管吻合重建。平均病灶直径7.5 cm,平均手术时间306 min,平均术中出血183 ml。术后病理诊断侵袭性胸腺瘤2例,胸腺癌1例。3例患者上腔静脉梗阻症状均得到改善,无围手术期死亡,随访至今均生存。
简介:摘要目的应用cDNA分子克隆测序方法,鉴定中国南方汉族1个KIR3DL3新等位基因。方法采集1例KIR3DL3基因测序结果异常的无偿志愿捐血者的外周血样,提取mRNA并逆转录为cDNA。设计1对具有KIR3DL3基因特异性的PCR引物对cDNA进行扩增,扩增产物纯化后进行分子克隆测序。结果经分子克隆测序,检出1个正常的KIR3DL3*00802等位基因和1个KIR3DL3*064新变异等位基因。KIR3DL3*064与KIR3DL3*00601等位基因的序列最为接近,仅有编码区存在nt1184 C>T错义变异,导致第9外显子中的第374密码子由ACT变为ATT,所编码的苏氨酸(Thr)变为异亮氨酸(Ile)。该等位基因被世界卫生组织HLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为KIR3DL3*064。结论cDNA分子克隆测序法能够鉴别常规测序分型中的异常结果,可用于鉴定KIR3DL3新等位基因。
简介:摘要目的探究高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)通过PI3K/AKT/GSK3β信号调控子宫内膜癌(EC)细胞增殖与凋亡的机制。方法将人子宫内膜腺癌HEC-1-B细胞分为对照组、GOLPH3组和GOLPH3+GDC-0941组。通过转染GOLPH3 pcDNA质粒过表达GOLPH3,PI3K抑制剂GDC-0941用于阻断PI3K/AKT/GSK3β通路。分别通过CCK-8法、克隆形成实验和流式细胞术检测细胞活力、细胞增殖能力和细胞凋亡。通过Western blotting检测PI3K/AKT/GSK3β通路中蛋白磷酸化水平。结果转染实验成功,且PI3K抑制剂GDC-0941不会影响GOLPH3 mRNA和蛋白的表达。对照组、GOLPH3组、GOLPH3+GDC-0941组的相对细胞活力分别为(100.00±4.63)%、(131.56±7.85)%、(97.85±7.36)%,3组间差异有统计学意义(F=7.437,P<0.001);GOLPH3组高于对照组(P<0.001),GOLPH3+GDC-0941组低于GOLPH3组(P<0.001)。3组的细胞克隆形成数目分别为(46.86±3.56)个、(89.32±4.78)个、(46.48±4.05)个,差异有统计学意义(F=20.437,P<0.001);GOLPH3组多于对照组(P<0.001),GOLPH3+GDC-0941组少于GOLPH3组(P<0.001)。3组的细胞凋亡率分别为(5.17±0.61)%、(2.34±0.56)%、(6.85±0.53)%,差异有统计学意义(F=11.643,P<0.001);GOLPH3组低于对照组(P<0.001),GOLPH3+GDC-0941组高于GOLPH3组(P<0.001)。3组磷酸化PI3K/PI3K水平分别为1.00±0.09、3.32±0.19、0.93±0.06,磷酸化AKT/AKT水平分别为1.00±0.11、4.63±0.63、1.15±0.16,磷酸化GSK3β/GSK3β水平分别为1.00±0.08、4.06±0.57、1.04±0.14,差异均有统计学意义(F=12.532,P<0.001;F=16.792,P<0.001;F=15.311,P<0.001);各蛋白磷酸化水平GOLPH3组均高于对照组(均P<0.001),GOLPH3+GDC-0941组均低于GOLPH3组(均P<0.001)。结论在EC细胞中,过表达GOLPH3可通过激活PI3K/AKT/GSK3β通路促进细胞增殖并抑制细胞凋亡,提示GOLPH3参与EC的发生和发展。
简介:摘要目的探讨采用siRNA干扰嗜乳脂蛋白亚家族成员A3(BTN3A3)对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法实验采用胶质瘤细胞株(HS683、U251)以及原代胶质瘤细胞,均设立阴性对照组(NC组)以及转染不同序列siRNA的Si-1组(转染1序列)和Si-2组(转染2序列)。应用蛋白质免疫印迹方法分析不同胶质瘤细胞株、小胶质细胞株(HMC3)中BTN3A3的表达情况。通过转染siRNA敲减BTN3A3后,采用流术细胞术分析各细胞株中细胞凋亡的变化情况。分离培养手术切除的脑胶质瘤组织,获得原代胶质瘤细胞后,采用蛋白质免疫印迹方法分析原代细胞中BTN3A3的表达水平;通过转染siRNA敲减BTN3A3后,采用流式细胞术分析原代细胞的细胞凋亡变化情况。结果BTN3A3在HS683(1.12±0.03)和U87-MG细胞(1.08±0.05)中的表达水平显著高于HMC3细胞(0.66±0.02)(均P<0.01)。U251细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.11±0.01、0.12±0.01,均低于NC组(0.21±0.01)(均P<0.01);HS683细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.77±0.03、0.78±0.04,均低于NC组(1.01±0.03)(均P<0.01)。敲减BTN3A3后,与NC组相比,HS683细胞的早期凋亡比率(NC组:31.6%,Si-1组:53.7%,Si-2组:63.3%)、U251细胞的晚期凋亡比率(NC组:10.4%,Si-1组:18.9%,Si-2组:26.5%)升高。BTN3A3在原代胶质瘤细胞中的表达水平高于HMC3细胞(分别为0.75±0.07和0.55±0.06,P<0.05)。采用siRNA敲减后,原代胶质瘤细胞中BTN3A3的表达水平降低(NC组:0.90±0.01,Si-1组:0.44±0.01,Si-2组:0.49±0.02,Si-1组和Si-2组与NC组相比,均P<0.01),晚期细胞凋亡比率升高(NC组:12.3%,Si-1组:22.6%,Si-2组:18.2%)。结论采用siRNA干扰BTN3A3可促进胶质瘤细胞株、原代胶质瘤细胞的凋亡。
简介:摘要目的检测β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶3(B3GNT3)在胰腺癌组织中的表达情况,分析其临床意义。方法采用生物信息学的方法分析B3GNT3在胰腺癌组织及癌旁正常组织中的mRNA水平,并分析其表达与胰腺癌患者的生存率间的关系。回顾性分析78例接受手术治疗的胰腺癌患者的临床病理资料。采用免疫组化法检测胰腺癌组织和癌旁正常组织中的B3GNT3蛋白表达水平,分析其与肾透明细胞癌患者临床病理特征的关系。结果生物信息学分析结果显示,B3GNT3的mRNA在胰腺癌组织中显著高表达,并与患者总生存率和无病生存率显著相关。免疫组化结果表明,B3GNT3在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。B3GNT3在胰腺癌组织中的高表达与肿瘤分期、肿瘤大小及淋巴结的转移情况相关(均P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤分级无关(均P>0.05)。结论B3GNT3在胰腺癌的进展演变中发挥重要作用,有望成为胰腺癌重要的治疗靶点和一个潜在的生物标志物。
简介:【内容摘要】本 课题 是对近两年来我校课改中的优化探究型课堂中小组合 学 学习方式的一次 创新 ,对小组合学提出了三个层面的优化策略。本文 详细 阐述 小组 合学设计上优化措施:知一项原则——(问题的设置要明确三点: 合学 的触摸点, 合学 的聚焦点,同伴合学的连接点),定两条定律(以探究为基础,以思维为中心),行三序合一。