简介:摘要目的利用多重实时PCR技术,通过优化反应体系和反应条件,探索一种可同时且快速准确检测五类致谢性大肠埃希菌、志贺菌的方法。方法选择78株大肠埃希菌、志贺菌为研究对象,筛选各菌种特有的一些毒性基因,包括aggR、eaeA、ipaH、lt、stlb、stx1及stx2,以这些毒性基因作为PCR扩增反应的检测目标,通过NCBI网站获取各基因的核苷酸序列,利用引物设计软件primer5.0进行引物序列的设计,而后进行PCR扩增反应,对反应产物进行验证从而证实引物的特异性,同时通过反应体系中各底物浓度的配比进行调节和对反应条件进行优化调整,确定最佳PCR扩增体系和条件,最终成功建立一种能同时鉴定五类致泄性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法。结果本研究结果发现,针对各菌种的毒性基因所设计引物经PCR扩增反应的验证,被证实均特异性地扩增出相应的目标基因产物,且在本研究中对78株大肠埃希菌及志贺菌的多重PCR检测结果与单重PCR检测结果吻合。结论本研究利用多重PCR技术,成功建立了一种能同时且特异性地检测致泄性大肠埃希菌及志贺菌特异性的检测方法,我们期望这种检测方法可应用在临床疾病诊断及在食品检验等方面发挥具有重要作用。
简介:【摘要】目的:分析3.0T动态增强核磁共振成像技术(DCE-MRI)及MRS对老年前列腺癌患者的临床诊断价值。方法:以院内行前列腺疾病检查患者75例为观察对象,经病理确诊前列腺癌患者25例,前列腺增生50例,均行DCE-MRI及MRS检查,以病理结果为参照,观察诊断精准度。结果:DCE-MRI检查中,分别在2min、1min、21s时对比,前列腺癌患者信号值均高于前列腺增生患者(P<0.05)。MRS检查中,前列腺癌组患者的(Cho+Cr)/Cit、Cho/Cit值均高于前列腺增生患者(P<0.05)。以病理结果为标准,75例患者中25例阳性,50例阴性,经DCE-MRI检出阳性19例,精准度76.00%,经MRS检出阳性18例,精准度72.00%,经DCE-MRI+MRS检出阳性24例,精准度96.00%,联合检验精准度高于分别检验(P<0.05)。结论:DCE-MRI与MRS对于老年前列腺癌诊断价值相似,将两者联合应用可提升诊断精准度。