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  • 简介:摘要目的探讨沉默细胞分裂周期相关基因(NUF2)对食管鳞癌细胞增殖及转移能力的影响以及其相关的分子机制。方法回顾性分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中食管癌患者原发病灶及其癌旁组织的NUF2基因表达差异,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析食管鳞癌细胞系的NUF2基因表达,设计靶向NUF2基因的沉默RNA(siRNA)序列,构建慢病毒载体,Celigo法、噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,荧光激活细胞分选法(FACS)法检测细胞凋亡,Transwell方法检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达,慢病毒转染过表达变化最明显的五个下游基因,再检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。组间比较采用t检验。结果MTT法表明,沉默NUF2基因后细胞增殖低于对照组(0.33±0.01比0.55±0.07,t=25.90,P<0.01),Transwell法提示沉默NUF2基因后细胞迁移低于对照组(KYSE-150:9.00±1.67比36.00±4.84,t=35.53,P<0.01;TE-1:52±1.86比246.00±9.79,t=45.73,P<0.01),沉默NUF2的食管癌细胞中、过表达SNAI1基因后,增殖、迁移和侵袭能力又有所恢复。结论NUF2基因在食管鳞癌中高表达,沉默其表达能够通过下调SNAI1基因来抑制细胞增殖、迁移和侵袭。

  • 标签: 食管肿瘤 鳞状细胞 增殖 凋亡
  • 简介:摘要目的观察JIB-04对肝癌细胞Huh7周期、凋亡的影响。方法用浓度为(0、4、8、16 μmol/L)的JIB-04分别处理正常肝细胞L02及肝癌细胞Huh7均由广东医科大学附属医院临床技能中心肝胆实验室提供,用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖变化;用流式细胞仪检测Huh7细胞周期分布及凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌细胞Huh7凋亡蛋白表达。采用单因素方差分析或两样本均数比较。结果JIB-04对正常肝细胞L02抑制作用轻微,经JIB-04培养48 h(8 μmol/L)后,抑制率仅为5.6%,而不同浓度JIB-04对肝癌细胞Huh7有不同程度的抑制作用,且其抑制作用呈现时间及浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为3.5 μmol/L;在周期检测结果中,肝癌细胞Huh7分期中S、M期比例明显减少,相反G1比例明显升高且呈药物浓度依赖性;Western blot中随着JIB-04浓度的增加,肝癌细胞Huh7凋亡率明显升高,在最高浓度8 μmol/L培养48 h后其凋亡率达(28.38±0.73)%,且不同浓度组与对照组两两比较其凋亡率差异有统计学意义(t=2.767,P<0.05);在肝癌细胞凋Huh7亡蛋白检测中,凋亡蛋白p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)明显上调,相反B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)下调。结论JIB-04对正常肝细胞无明显抑制作用,可抑制肝癌细胞Huh7增殖,有干扰其周期分布及促进凋亡作用。

  • 标签: 肝细胞癌 JIB-04 Huh7 凋亡
  • 简介:目的:通过体外抑制唾液腺恶性多形性腺瘤(malignantpleomorphicadenoma,MPA)中人表皮生长因子受体2(Humanepithelialgrowthfactorreceptor2,HER2),分析其与肿瘤细胞增殖、周期和凋亡等恶性生物学行为的相关性,以期评估其作为靶向治疗位点的可能性。方法:检测MPA细胞系中HER2蛋白表达及基因扩增情况,应用靶向抑制剂处理肿瘤细胞,检测肿瘤增殖、周期、凋亡等生物学行为的改变,HER2蛋白表达改变及其对下游通路的影响。采用SPSS16.0软件包进行独立样本t检验。结果:SM-AP1、SM-AP4细胞中均存在HER2蛋白表达及HER2基因扩增,应用HER2靶向抑制剂可以显著降低肿瘤细胞的增殖能力,阻滞细胞周期进程,诱导肿瘤细胞凋亡,并且HER2下游PI3K/Akt和MAPK/ERK细胞通路受到抑制。结论:MPA肿瘤细胞系中存在HER2基因过表达及扩增,HER2在MPA恶性生物学行为中扮演重要角色。抑制HER2,可以改善MPA的恶性生物学行为。

  • 标签: HER2 恶性多形性腺瘤 唾液腺
  • 简介:目的:探讨重组人血管内皮抑制素(恩度)对肺微血管内皮细胞增殖的影响及机制。方法:以人非小细胞肺癌细胞系A549和人肺微血管内皮细胞系HPMEC建立非接触式共培养血管模型,并在此模型上应用MTT方法研究肿瘤血管内皮细胞的增殖,以流式细胞仪检测血管内皮细胞周期分布,以RT—PCR和Westernblotting检测血管内皮细胞的cyclinD1转录水平和蛋白表达水平的变化。结果:恩度能明显抑制共培养模型下血管内皮细胞的增殖,并呈剂量依赖性;肿瘤内皮细胞G0/G1细胞数增多,S期细胞显著减少;转录和蛋白检测水平cyclinD1呈剂量依赖性下调。结论:恩度能抑制肿瘤血管内皮细胞增殖,且这一作用与抑制cyclinD1表达,使肿瘤血管内皮细胞滞留于G0/G1期有关。

  • 标签: 重组人血管内皮抑制素/恩度 共培养 HPMEC细胞株 CYCLIN D1
  • 简介:摘要:目的:本研究旨在探讨细胞分裂周期蛋白DBF4在骨肉瘤进展中的作用及机制。方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测骨肉瘤细胞系和骨肉瘤组织样本中DBF4的表达水平。利用siRNA技术沉默DBF4基因,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期分布,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测相关信号通路蛋白的表达。结果:与正常骨细胞相比,骨肉瘤细胞系和骨肉瘤组织样本中DBF4的表达水平显著升高(P<0.01)。沉默DBF4基因后,骨肉瘤细胞的增殖能力显著下降(P<0.01),细胞周期阻滞在G2/M期,迁移和侵袭能力减弱(P<0.01)。此外,沉默DBF4基因可显著降低骨肉瘤细胞中PI3K/AKT信号通路的活性。结论:DBF4在骨肉瘤进展中发挥重要作用,其机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。沉默DBF4基因可抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,为骨肉瘤的治疗提供新的潜在靶点。

  • 标签: 骨肉瘤 细胞分裂周期蛋白DBF4 PI3K/AKT信号通路
  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) GSTM3TV2对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响,并探讨其与微小RNA(miR)-597的相互作用。方法选取郑州大学附属南阳市中心医院、南阳市宛城区第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年5月到2018年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁和肝癌组织中GSTM3TV2和miR-597表达水平;在肝癌细胞系HepG2建立lncRNA对照组和GSTM3TV2 KD组细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和体内异体移植瘤实验检测GSTM3TV2的体内外功能;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析GSTM3TV2与miR-597的关系;将miRNA抑制剂转染HepG2细胞,分析其作用机制。计量数据比较采用t检验。结果肝癌组织中GSTM3TV2表达水平(2.96±0.34)明显高于癌旁组织(2.96±0.34),差异有统计学意义(t=4.819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(2.17±0.22)明显高于GSTM3TV2 KD组(1.09±0.20),差异有统计学意义(t=3.429,P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(154.82±13.83)个]明显高于GSTM3TV2 KD组[(87.29±10.43)个],差异有统计学意义(t=5.018,P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内成瘤体积[(1 048.45±251.30) mm3]明显大于GSTM3TV2 KD组[(759.49±142.09) mm3],差异有统计学意义(t=4.719,P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内肿瘤重量[(1.09±0.21) g]明显高于GSTM3TV2 KD组[(0.61±0.15) g],差异有统计学意义(t=3.185,P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(15.29±3.39)个]明显多于GSTM3TV2 KD组[(8.22±2.09)个],差异有统计学意义(t=3.103,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶活性结果显示miR-597是GSTM3TV2的靶基因。lncRNA对照组细胞miR-597表达水平(1.09±0.21)明显低于GSTM3TV2 KD组(2.80±0.26),差异有统计学意义(t=3.529,P<0.05)。结论lncRNA GSTM3TV2通过调节miR-597促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性细胞生物学行为。

  • 标签: 长链非编码RNA 肝癌 微小RNA 增殖 侵袭 转移
  • 简介:自地球形成以来的46亿年中,太阳辐射强度增加了约30%。理论上说,地球上的江河湖海早就被蒸发了,成为荒凉一片。但地球虽然被冰雪几次覆盖,但其平均体温变化幅度仅在10℃上下。难道地球天赋异禀,有办法对付太阳辐射的增加?现在的研究表明,岩石圈、水圈、生物圈、大气圈等各圈层的相互作用,是地球能够自我调节的原因。

  • 标签: 自我调节 太阳辐射 辐射强度 相互作用 地球 岩石圈
  • 简介:关于调节理论李其庆编写罗贝尔·布瓦那是法国全国科学研究中心和法国高等社会科学研究学校的主任研究员。他与米歇尔·阿格列塔、阿兰·利比兹一起创立了调节理论。1997年3月5-12日出版的法国《经济问题》周刊,刊载了《人文科学》杂志记者就调节理论问题采访他...

  • 标签: 一般均衡 新古典学派 经济增长 马克思主义经济理论 资本积累 调节方式
  • 简介:  体育运动对弥补心理缺陷有较好的帮助,而且不同的体育项目对不同的心理缺陷功效不同.某心理专家针对孩子不同的心理缺陷列举了具体可选的体育项目.……

  • 标签: 心理缺陷 调节心理 运动调节
  • 简介:最近,在培训高水平运动员和根据年龄、水平、专业的不同,对不同数量的运动员进行运动训练的系统工作中,心理调节问题在国外运动心理学家研究的课题中占据一个核心的位置。国外多数的主要运动心理学家(克莱迪、辛格尔、其特克、格连克洛斯、安多涅里,瓦涅克、奥尔里克等等)认为,最

  • 标签: 运动心理学家 心理调节 运动训练 辛格尔 涅里 运动项目
  • 简介:  体育运动对弥补心理缺陷有较好的帮助,而且不同的体育项目对不同的心理缺陷功效不同.某心理专家针对孩子不同的心理缺陷列举了具体可选的体育项目.……

  • 标签: 心理缺陷 调节心理 运动调节
  • 简介:情绪波动的原因禅宗故事说,两个人在寺前争论:甲说,是幡动;乙说,是风动。惠能禅师说,不是幡动也不是风动,是两位的心动。借用这一故事的意境,大学生的情绪波动的原因也可以从三个方面来阐述:

  • 标签: 情绪波动 大学生 原因 故事 禅宗 师说
  • 简介:

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  • 简介:考试既是智力活动,也是情绪活动,考生考场上情绪紧张程度直接影响考试成绩,所以考生应做好进入考场、拿到试卷、开始答题、突遇卡壳、遇到难题、特殊情况、最后15分钟等各环节的情绪调节工作.

  • 标签: 考试 考场 考生情绪 情绪调节 心理调节
  • 简介:食物总脂肪摄入量是影响血浆总胆固醇水平的主要因素。脂肪的种类由结构中的脂肪酸决定,脂肪酸按结构又可分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。饱和脂肪酸饱和脂肪酸可以显著升高血浆胆固醇和低密度脂蛋白的水平,低密度脂蛋白也是脂蛋白中的一类,它是血浆脂蛋白中首要的致动脉粥样硬化性脂蛋白,因此和高密度脂蛋白相反,越低越好,畜肉类食物含脂肪最多,且多为饱和脂肪酸。

  • 标签: 血脂调节 不饱和脂肪酸 低密度脂蛋白 脂肪摄入量 动脉粥样硬化性 胆固醇水平
  • 简介:  体育运动对弥补心理缺陷有较好的帮助,而且不同的体育项目对不同的心理缺陷功效不同.某心理专家针对孩子不同的心理缺陷列举了具体可选的体育项目.……

  • 标签: 心理缺陷 调节心理 运动调节
  • 简介:  体育运动对弥补心理缺陷有较好的帮助,而且不同的体育项目对不同的心理缺陷功效不同.某心理专家针对孩子不同的心理缺陷列举了具体可选的体育项目.……

  • 标签: 心理缺陷 调节心理 运动调节
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