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  • 简介:目的探讨pVEGF165-IRES-Ang-1重双顺反子质粒在大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSC)中表达的情况,为下一步的动物实验奠定基础.方法构建插入人血管生成素-1(angiopoietin,Ang-1)和人血管内皮细胞生长因子165(vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165)双顺反子的pIRES重组质粒,经脂质体转染大鼠MSC,以实时荧光定量PCR技术分析各基因人源、鼠源以及总mRNA的动态变化.结果所构建的pVEGF165-IRES-Ang-1双顺反子重组质粒在大鼠MSC中成功表达了相应蛋白.人VEGF165得以高丰度表达,且在转染1d后mRNA检出的拷贝数最高;人Ang-1在4个检测时间点中的mRNA拷贝数比较稳定,但转录本的拷贝数较VEGF165显著降低;转入人Ang-1和人VEGF165后,各对应同源蛋白的总mRNA有显著增加,但大鼠MSC自身Ang-1与VEGF164的编码mRNA明显有下调趋势.结论pVEGF165-IRES-Ang-1重双顺反子质粒双基因表达量明显不一致,表现为受插入的位置关系影响,且可能受转染细胞内同源蛋白的总量调控.

  • 标签: 双顺反子 质粒 骨髓间充质干细胞 血管生成素-1 血管内皮细胞生长因子165 同源蛋白
  • 简介:目的研究上海地区血压正常汉族老年人中(年龄≥60岁)Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体(AT1-R)基因A1166C多态性的分布特点,并同国内外人群的分布频率相比较,了解地区种族分布差异及与年龄、体重指数BMI(kg/m2)的相互关系.方法体检选取92例正常健康老年人,男72例,女20例,平均年龄65.32±4.70岁.应用PCR-RFLP方法检测位于AT1-R基因3'-UTR的A1166C变异.结果(1)上海地区血压正常汉族老年人AA、AC、CC基因型频率分别为0.89、0.11、0.00,1166C等位基因频率为0.05.低于白种人和日本人(P《0.001和P=0.046),与美国黑人相比无差异(P=0.815).(2)在国内人群中C1166等位基因的分布频率无差异,并与年龄、体重指数无关.结论AT1-R基因A1166C多态性存在种族地域间的差异,上海地区与国内现有报道结果一致,1166C等位基因频率明显低于白种人群,但不同年龄不同体重指数人群1166C等位基因频率无差别.提示由于中国人群1166C等位基因频率低,故开展AT1-R基因A1166C多态性与疾病的关系中需要大样本研究.

  • 标签: Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体基因 基因多态性 老年人 AT1-R基因 正常血压
  • 简介:目的利用PDGF-A基因修饰的全层皮肤皮片,利用HE染色、PCR、蛋白定量分析几个层面,探讨其对眼睑皮肤损伤修复的情况及部分机理。方法贵州小香猪6只,背部脊柱两侧造成全层皮肤缺损圆形创面(Ф3.67cm)各3个,共36个创面。A基因修饰皮片)“PDGF-A基因修饰皮片”,移植到其右侧的18个创面作为实验;B(细胞皮片植入)以HAM负载未经基因修饰的自体bMSCs与角朊细胞,构建成“细胞皮片”植入其左侧6个创面;C(单纯HAM敷盖)单纯HAM敷盖其左侧后12个创面,作对照。观察移植后1~4周内,各组创面愈合、肉芽组织生长、上皮化等情况。并进行创面组织HE、Laminin免疫化及胶原含餐等检测。结果(1)A于伤后15~17d愈合,B于伤后21~23d愈合,C于伤后24~26d愈合,A较其它两组分别提前5~6d与8~9d愈合,且愈合质量好。(2)A创面于移植15~17d,其肉芽组织生长旺盛,肉芽组织中Laminin、成纤维细胞和毛细血管含量丰富,可见胶原沉积。两对照创面组织仍见许多炎细胞浸润,肉芽组织中Laminin、成纤维细胞和毛细血管含量少,胶原沉积不明显。结论PDGF-A基因修饰皮片移植对眼睑皮肤的创伤有较好的促愈作用,愈合质量较高。

  • 标签: PDGF-A基因修饰皮片 全层皮肤缺损创面 眼睑皮肤组织修复
  • 简介:早发性卵巢功能不全(prematureovarianinsufficiency,POI)主要表现为患者40岁原发性闭经或停经达4个月,至少2次血清FSH水平大于25IU/L(间隔至少4周),雌激素水平低下[1]。POI病理过程可分为隐匿期、生化异常期和卵巢功能衰竭期(POF)3个阶段。患者多表现为骨质疏松、潮热盗汗等低雌激素症状,心血管疾病和阿尔兹海默症等疾病患病风险增加。POI发病原因包括化疗、自身免疫性疾病、遗传、代谢、肿瘤和射线等,这些病因导致始基卵泡生成减少,卵泡过度激活、闭锁或凋亡增多等异常表现,显著影响卵巢寿命,甚至妨碍女性正常排卵而导致不孕。

  • 标签: 卵巢功能不全 早发性 基因异常 常染色体 自身免疫性疾病 雌激素水平
  • 简介:目的研究脂联素基因SNP+45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症的相关性,比较脂联素基因SNP+45多态性与骨转换生化标志物的关系。方法以聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性(PCR—RELF)技术,对75例骨质疏松症患者和71例正常对照者脂联素基因SNP+45位点进行基因分型,应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法测定75例骨质疏松症患者血清和尿液中8项骨代谢指标。结果脂联素基因SNP+45多态性位点的基因型和等位基因频率在骨质疏松症患者和正常对照比较差异无统计学意义,脂联索基因SNP+45多态性位点的基因型与骨转换标志物比较差异也均无统计学意义。结论脂联素基因SNP+45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症无相关性,与骨转换率也无相关性。

  • 标签: 脂联素基因 骨转换标志物 多态性
  • 简介:目的分析老年人肺癌恶性胸腔积液和肺炎旁胸腔积液中叉头基因FoxM1的基因表达,寻找对于胸水良恶性的鉴别具有诊断意义的基因标志物。方法分别收集15例老年肺炎患者旁胸腔积液(A)和21例老年肺癌患者(15例为腺癌,5例为鳞癌,1例为小细胞肺癌)恶性胸腔积液(B),分别提取各组标本总RNA,再经过逆转录得到c-DNA,通过荧光定量-聚合酶链反应技术分析各组胸腔积液中叉头基因FoxM1的基因表达差异。结果BFoxM1基因平均相对含量明显高于A(925.014±103.999)w(244.354±43.429),P〈0.01)。结论FoxM1的基因表达量在老年肺癌恶性胸腔积液中明显高于老年肺炎旁胸腔积液,对胸水良恶性的鉴别具有重要诊断参考价值。

  • 标签: 老年 肺癌 肺炎 胸腔积液 叉头基因M1
  • 简介:目的研究山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老小鼠肾纵中Klotho基因表达变化的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为青年对照、衰老模型、山茱萸多糖,每组20只。采用D-半乳糖法制作衰老模型,以灌胃法给山茱萸多糖小鼠灌服山茱萸多糖。采用分光光度法检测总抗氧化能力(T—AOC)和Mn—SOD活性水平,RT—PCR法检测Klotho和Mn—SOD基闪表达水平,Westernblot法检测Klotho蛋白表达最。结果与对照比较,衰老小鼠肾组织中Klotho基因、Mn—SOD活性和基斟表达均下降(P〈0.01),总抗氧化能力(T—AOC)下降(P〈0.01);与衰老模型比较,山茱萸多糖小鼠Klotho基困和蛋白表达明显升高(P〈0.01)、Mn-SOD基因表达和Mn-SOD活性明显增高(P〈0.01),总抗氧化能力也显著提高(P〈0.01)。结论山茱萸多糖可能通过上调衰老小鼠肾组织中的Klotho表达和提高衰老小鼠抗氧化能力岍发挥抗衰老的作用。

  • 标签: 山茱萸多糖 Klotho基冈 衰老模型小鼠
  • 简介:全球人口老龄化,尤其是我国人口老龄化已成为全社会关注的焦点问题之一,人们对于衰老和长寿相关问题的研究从未间断。近年提出的长寿及衰老机制主要为多凶性(multiple)、综合性(comprehensive)及复杂性(complexity),对衰老机制中的炎性衰老也逐渐引起重视。现就衰老、长寿机制中促炎/抗炎细胞因子与ApoE基因相关性的研究进展综述如下。

  • 标签: APOE基因 抗炎细胞因子 衰老机制 相关性 长寿 全球人口老龄化
  • 简介:目的探讨内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗老年人早期胃癌和癌病变的有效性和安全性。方法回顾性分析2016年1月-2017年6月接受ESD治疗的早期胃癌和癌病变患者的临床资料,分成老年(≥65岁)和非老年(〈65岁),观察比较2的ESD的治疗情况、临床疗效和安全性。结果老年的平均手术时间为(74.5±20.0)min,非老年为(66.5±18.1)min,两的差异无统计学意义(P〉0.05)。老年ESD并发症的发生率、病变的整块切除率、完全切除率和治愈性切除率分别为2.2%、100%、95.6%和95.6%,与非老年的2.4%、100%、97.6%和97.6%相比差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论ESD治疗老年人早期胃癌和癌病变是安全有效的。

  • 标签: 内镜黏膜下剥离术 老年 早期胃癌 癌前病变 疗效 安全性
  • 简介:目的探讨护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因T950C位点基因多态性与冠心病(coronaryarterydsease,CAD)及其严重程度的相关性。方法290例行冠状动脉造影患者根据造影结果,分为正常冠脉102例和冠心病188例。冠心病根据病变冠脉病变支数,分为单支57例、双支50例、三支68例、四支13例;冠心病再根据病史分为急性冠脉综合征(acutecoronarysyndrome,ACS)133例和稳定型冠心病55例。介质纯化法提取白细胞DNA,聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增包含护骨素T950C位点的DNA片段,连接酶检测反应(ligasedetectionreaction,LDR)检测PCR产物,识别多态性位点。结果在正常冠脉和冠心病之间,在正常冠脉和ACS之间,在ACS和稳定型冠心病之间,在正常冠脉和不同病变冠脉数量之间,护骨素基因T950C的各基因型频率和分布差别无统计意义;冠心病CC基因型的Gensini评分要高于TT基因型的Gensini评分。结论研究中未发现护骨素基因T950C位点基因多态性与冠心病相关;T950C位点多态性与冠心病的严重程度有相关性,CC基因型的冠脉狭窄程度较TT基因型更严重。

  • 标签: 冠心病 护骨素 单核苷酸基因多态性