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  • 简介:NR5A2是孤儿核受体家族中的重要成员,在胚胎发育、类固醇激素生成、卵泡发育和排卵中发挥重要作用。经克隆和测序获得二花脸猪NR5A2基因编码区序列,采用RT-PCR技术分析其组织表达特征,并采用荧光定量PCR技术检测二花脸猪与杜长大三元杂交猪卵巢组织中NR5A2基因转录水平。结果表明:

  • 标签: 基因克隆 二花脸猪 转录水平 卵巢组织 荧光定量PCR RT-PCR
  • 简介:对香蕉束顶病毒(BBTV)广州分离物MGHDNA组分6全序列进行了克隆及序列分析。并对来自广州、海南、台湾、澳大利亚及印度的BBTV组分6进行了分析,结果表明:BBTV组分6都含有CR-SL(stem-loopcommonregions),CR-M(majorcommonregions)结构等典型的特征序列。BBTV组分6的核苷酸全序列、开放阅读框(ORF)核苷酸、CR-M核苷酸序列及其氨基酸序列系统进化树结果显示,BBTV分离物可分为2个组群:亚洲组和南太平洋组。CR-M结构在2个组群间有明显的差异,南太平洋组分离物的CR-M结构中有一段不完全保守的16个核苷酸的重复序列,而在亚洲组的分离物中这个序列并不重复。对BBTV组分6蛋白质进行了二级结构预测和理化性质分析发现,这2个类群蛋白质的二级结构有差异,但是理化性质无明显差异。

  • 标签: 香蕉束顶病毒 DNA组分6 克隆 分离物
  • 简介:西红花总苷是栀子果实中的次生代谢产物,具有重要的药理作用,也是国际流行的天然色素"栀子黄"的主要成分。番茄红素β-环化酶b(lycopeneβ-cyclase,LCYb)催化合成了西红花总苷代谢途径的前体化合物-β-胡萝卜素。本研究利用RACE技术,从栀子果实中克隆了一条长1672bp的序列,含有一个1500bp的开放阅读框,编码499个氨基酸组成的蛋白质。该蛋白具有番茄红素β-环化酶的结构域,分子量为56.39kD,N端有一个40个氨基酸组成的质体定位的信号肽,属于LCYb亚家族,因此命名为GjLCYb2。进行密码子优化后,利用两种原核表达系统诱导GjLCYb2融合蛋白表达,pSYNO-1系统可以在大肠杆菌中表达出可溶蛋白,pET-28a(+)系统表达的蛋白以包涵体形式存在。荧光绝对定量qPCR检测结果表明,在栀子果实发育成熟的过程中,GjLCYb2基因的表达量变化与西红花总苷的合成量变化趋势一致,表明GjLCYb2基因可以作为遗传操作的靶点,进行栀子果实中西红花总苷生物合成途径的调控。

  • 标签: 栀子 西红花总苷 番茄红素Β-环化酶
  • 简介:【目的】克隆黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列,了解牛Sycp2基因序列特征和组织表达特征,分析睾丸组织中Sycp2基因的表达水平。【方法】采用电子克隆克隆测序技术获得黄牛、牦牛和犏牛Sycp2基因序列,利用生物信息学方法分析其序列特征;采用RT—PCR分析牛Sycp2基因的组织表达特征:

  • 标签: 基因序列 电子克隆 睾丸组织 黄牛 mRNA 犏牛
  • 简介:我国应用猪瘟兔弱毒株疫苗对猪进行免疫已近50年,但在实际生产中,往往由于不能正确使用疫苗、不能适时免疫以及疫苗中含有过多的过敏原而使猪瘟疫苗达不到好的效果。为消除接种猪瘟疫苗时的母抗体干扰和仔猪的过敏反应,哈药集黑龙江省生物制品一厂白同臣等建议:(1)在猪瘟免疫时,要适时免疫尽量消除母抗体的干扰带来的不利影响。

  • 标签: 猪瘟疫苗 母源抗体 过敏反应 仔猪 干扰 接种
  • 简介:橡胶树起源热带雨林,对低温敏感。在中国橡胶树(Heveabrasiliensis)种植受到严重的低温胁迫影响,而CBF/DREB1(C-repeatbindingfactor/dehydrationresponsiveelementbindingfactor1)是低温信号通路中重要的转录因子,但目前橡胶树中仅克隆到HbCBF1。本研究从橡胶树中克隆出两个新的CBF家族基因HbCBF2和HbCBF3。经测序,HbCBF2和HbCBF3分别编码了234个和242个氨基酸。氨基酸序列分析表明HbCBF2和HbCBF3均含有CBF家族特有两个短肽序列包括一个保守的DNA结合结构域和NLS簇。通过构建进化树发现HbCBF2、HbCBF3与HbCBF1以及拟南芥中的CBF序列同源性很高。将HbCBF2和HbCBF3构建到pGEX4T-1原核表达载体上,在Transetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测它们蛋白质表达量为51.8kD和53kD,与预期一致。对蛋白的诱导条件进行优化,构建融合表达质粒pGEX4T-1-CBF2和pGEX4T-1-CBF3,在28℃、IPTG浓度为0.4mmol/L的情况下表达量最佳。实验为纯化蛋白和研究HbCBF2和HbCBF3在橡胶树中的功能提供理论帮助。

  • 标签: 巴西橡胶树 CBF 原核表达
  • 简介:氰戊菊酯棉铃虫六龄幼虫中肠组织总RNA为模板,采用特异性引物,通过对反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的条件进行不断探索和优化,成功克隆出全长为1557bp的基因片段(GenBank登录号DQ497428)。该片段包括一个完整的开放阅读框架(1515bp)及5′端的42个碱基,编码504个氨基酸残基。与国外报道的细胞色素P450CYP6B7基因(GenBank登录号AF031468)的核苷酸、氨基酸同源性分别为97.75%和98.81%,为CYP6B7的等位基因。Northern杂交分析表明,抗性品系棉铃虫中肠组织中CYP6B7mRNA的表达量明显高于敏感品系的,初步表明CYP6B7在棉铃虫对氰戊菊酯的抗药性中起着重要作用。

  • 标签: 棉铃虫 氰戊菊酯 抗药性 细胞色素P450 CYP6B7 RT-PCR
  • 简介:PCV2阴性母猪免疫PCV2疫苗后,可以将母PCV2特异性淋巴细胞被动转移给仔猪。本研究分析了PCV2特异性淋巴细胞被动转移对仔猪PCV2攻毒的保护效应。与未免疫PCV2疫苗母猪产下的仔猪相比,

  • 标签: 细胞免疫应答 PCV2 保护效应 仔猪 异性 攻毒
  • 简介:科技日报哈尔滨10月15日电,我国首例采用成体体细胞作为核供体的克隆东北民猪在哈尔滨诞生。14日.出生仅3d的3头可爱的黑色克隆小猪与媒体见面。3头克隆小猪通体黑色.发育正常.各项形态特征与供核体细胞个体完全一致。据项目负责人、东北农业大学生命科学学院刘忠华博士介绍.他们“克隆”的东北民猪与过去克隆猪的不同之处在于采用的是成体体细胞作为核供体,其供核体细胞取自1头出生3d的东北民猪仔猪.而我国在此之前的克隆猪核供体细胞则取自于妊娠33d的胎儿。技术难度更高一些。

  • 标签: 东北民猪 克隆猪 核供体细胞 生命科学学院 东北农业大学 项目负责人
  • 简介:2016年5、9和10月,在东经121°37·46″和北纬40°58′56″采样,流动注射分光光度法监测辽宁大凌河水中六价铬的含量。结果表明:在酸性样品中,六价铬与二笨卡巴肼形成紫红色络合物,最大吸收峰在550nm处。本方法的线性范围为0.02—0.50mg/L(r〉0.999),检出限为O.0022mg/L,在0.05mg/L和0.50mg/L的相对标准偏差(RSD)为0.8%和0.5%,相对误差为0.0%和0.2%,加标回收率为98.8%-100.9%,测定速率为30样m。本方法操作简单,溶剂数量少,干扰因素少,人工误差小,分析效率高,灵敏度高,准确度高,稳定性好。

  • 标签: 流动分析 大凌河 六价铬
  • 简介:蛋鸡进行鸡新城疫疫苗免疫接种后,体内B细胞通过对抗原的识别、活化、增殖,最后分化成浆细胞并分泌抗体,产生的抗体进入血液后,血液中的抗体能从输卵管上皮层分泌滤泡分泌到卵黄内。免疫蛋鸡后采血测定血清中抗体效价或制备血清抗体过程中,抓鸡采血时经常造成惊吓而引起产蛋率降低,因而人们想到能否卵黄抗体代替血清抗体进行上述工作。本研究的目的是对免疫后的蛋鸡血清抗体和卵黄抗体进行测定比较,看两者之间的差异程度或相关性,探讨应用卵黄抗体代替血清制备鸡新城疫抗原一抗体复合物疫苗的可能性。

  • 标签: 血清抗体 抗体效价 卵黄抗体 鸡新城疫 疫苗免疫接种 蛋鸡
  • 简介:据英国每日邮报2月18日讯美国一名女子愿意支付7.5万英镑克隆其去世的救命恩犬——头比特犬。

  • 标签: 克隆 女子