简介:目前关于落叶木本果树DNA提取的材料多数为植物的叶片,叶片具有试材广泛、容易研磨、DNA产量高、质量好等优点,但也会受到季节、病虫害的影响且不耐贮藏。落叶果树枝条具有取材容易、DNA含量丰富的特点而适合在休眠季节用于提取DNA,进而加速果树分子生物学研究进程。本研究探讨了CTAB法、SDS法对休眠季节不同时期取材的葡萄、桃、樱桃、杏、苹果、银杏、柿子、枣8种落叶果树的一年生枝条DNA提取效果。结果表明:除葡萄外其他多数材料在整个休眠时期均能提出高质量的DNA,所提DNA电泳带纹清晰、亮度高,DNA产率高、质量优,可用于有关分子生物学的后续试验(RAPD分析);再DNA提取方法方面,从DNA产量和质量上来看,SDS法总体上要优于CTAB法。最后对提取中出现中存在过多的酚类、多糖和其他次生物质去除方法进行了讨论。
简介:竹子射击通过internodes的快速的延伸快速成长。为了验证DNAmethylation是否影响竹子,射击延伸,我们在竹子(Phyllostachyspraecox)的五个发展阶段比较了DNAmethylation层次,包括年轻竹子射击40厘米最后(S1),竹子射击2厘米最后(S2),年轻的叶(Y1),叶(Y2),和老化叶(M),由基于KpnI/MseI和Acc65I/MseI平台使用放大碎片长度多型性(AFLP)。到在竹子射击(S1和S2)的unmethylatedDNA地点的methylated的多型性比率在叶(Y1,Y2和M)比那高。到在S2的unmethylatedDNA地点的methylated的多型性比率最高(32%)。我们的结果建议DNAmethylation在种阶段的竹子极大地变化了,特别在internodes的快速的延伸的舞台。
简介:AnefficientandgoodDNAextractionprotocolshouldbesimple,affordableandyieldenoughDNAwithhighquality.Rice(OryzasativaL.)DNAextractionmethodsoftenuseseedlingsorleavesratherthanthegrainsandtendtobetime-consuming,involvemultiplesteps,andusehazardouschemicalsandexpensiveenzymes.RicegrainsofferseveralbenefitsoverseedlingsandleavesasasourceofDNAforgeneticanalysis.However,thesebenefitsareunderutilizedbecausethebulkofaricegrainismadeupofstarch.Itisparticularlyimportant,butdifficulttogetridofthestarchwhileextractingDNAfromricegrains.Thisco-precipitatedpolysaccharideisaknowninhibitorofDNApolymeraseactivityinpolymerasechainreaction(PCR).WedescribehereaverysimpleandhighlyaffordableChelex?-100basedDNAextractionmethodfromricegrains.Itdoesnotrequireanyhazardouschemicalsorenzymes.ThismethodreproduciblyextractsDNAwithgoodpurityindices(A260/A230andA260/A280values),butrequiresonlyafewsteps.
简介:简要介绍了5种传统的、最常用的DNA分子标记(RFLP、RAPD、AFLP、SSR和SNP)的技术原理及它们的优缺点,也总结了TRAP这种新产生的分子标记的技术原理、优点及应用前景。综述了这几类分子标记在花生种质进化、遗传多样性分析、分子图谱构建及抗虫、抗病等方面的研究。利用SSR和RAPD标记能够发现野生种和栽培种多态性进而实现分子标记对花生的遗传多样性分析,可以将许多花生品种分为不同的品种群,能够对花生进行种质进化研究。RFLP和AFLP技术利于花生图谱构建,利用DNA中特定的限制性酶切位点上碱基对的改变及酶切位点之间的分予重排,可以发现花生品种间的DNA许多多态性位点,进而绘制分子标记图谱。AFLP技术在花生青枯菌和花生抗黄曲霉的研究方面有很大进展。RAPD技术在花生根瘤菌、花生线虫病等方面已有显著进展。最后对分子标记在花生育种中的应用前景进行了简单展望。
简介:农杆菌已广泛应用于单、双子叶植物的遗传转化。T-DNA的传递是农杆菌介导转化的分子基础。T-DNA的传递是一个复杂的过程,与Ti质粒毒性区基因(Vir)、农杆菌染色体上毒性相关基因(chv)有关,另外植物体内部分基因也参与T-DNA的传递。T-DNA传递时在VirD1-VirD2蛋白的作用下形成T链,进一步形成T复合物,经农杆菌四型分泌系统(TypeIVsecretionsystem,T4SS)穿过细菌和植物细胞膜,运输到植物细胞胞质。进入植物细胞的T复合物在植物相关蛋白的作用下经核运输和T链的整合,最终整合到植物基因组。本研究从农杆菌对植物细胞的识别和附着、农杆菌对植物信号的感知和Vir基因的活化、T链的形成、T-复合物的运输、T链进入植物细胞后的核运输和T链的整合机制及相关基因作了详细综述,探讨了农杆菌转化机制研究中的问题,对今后农杆菌转化机制研究做了展望。
简介:本研究对2个沙棘杂交子代群体、亲本群体及对照实生中国沙棘在不同时间的沙棘叶游离黄酮和部分叶样的水解黄酮甙进行了分析.对内蒙古坝口子和九城宫2个基地7个群体的沙棘叶分析表明:沙棘叶中槲皮素、异鼠李素及桑色素等黄酮组分均处于非游离状态,而只有芦丁以游离态存在.从2个基地研究群体的游离总黄酮变化来看,6月初到7月中旬叶中总黄酮含量保持相对稳定,其中坝口子群体变化在800~1000mg/100g,九城宫各群体叶中游离总黄酮含量变化在900~1380mg/100g之间.对九城宫的杂交子代群体和当地中国沙棘2群体的叶水解黄酮甙进一步分析发现,沙棘叶中主要有3种黄酮甙、槲皮素、异鼠李素和山奈酚.该2群体叶中槲皮素的含量集中在6月1日到8月15日之间,变化在0.3~0.4g/100g,异鼠李素含量变化在0.27~0.38g/100g范围内;山奈酚2群体叶中含量接近,变化范围在0.6g/100g~0.2g/100g,水解总黄酮甙含量则呈现波浪式下降趋势,2群体变化范围在1.3g/100g~0.79g/100g.
简介:最近,由天津科技大学与天津特斯达食品机械科技有限公司合作研制的液压式高压均质机、智能型酸奶机通过天津市科委科技成果鉴定,这标志着天津科技大学食品新装备科研成果在实施产业化方面迈出重要一步。天津科技大学研制的高压均质机是食品、化工行业及科学研究中使用的一种通用机械。经过高压