简介:目的探索miR-17在血管平滑肌细胞(VSMCs)中对视网膜母细胞瘤(RB)基因和蛋白水平的调控作用,以及对增殖效应的影响。方法培养HA-VSMCs并诱导其增殖,应用芯片技术筛选出差异表达水平最显著的微小RNA(miR)。在293T细胞应用荧光素酶报告基因验证生物信息学软件预测的miR-17与RB的靶向结合作用。分别向VSMC转染miR-17mimic和miR-17inhibitor并建立阴性对照,检测RB水平及细胞增殖相关指标PCNA表达水平。结果荧光素酶报告分析证实miR-17与RBmRNA-3’UTR具有靶向结合效应。转染miR-17mimic促进VSMC增殖相关指标PCNA表达上调,并且可以下调RB蛋白及mRNA水平,转染miR-17inhibitor后下调PCNA表达且可上调RB表达(P〈0.05)。结论miR-17通过靶向结合RBmRNA-3’UTR调控RB表达从而调控VSMCs增殖。
简介:目的:构建miR-15a-5p和miR-16-5p的荧光素酶报告载体,利用此载体分析并验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因3'-UTR区域的确切结合位点,探讨miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的相互作用关系。方法:通过Pubmed和miRBase数据库分别寻找到CCND1基因3'-UTR区域碱基序列和miR-15a-5p、miR-16-5p的碱基序列。找出理论结合位点后,构建荧光素酶报告载体,并用荧光素酶报告基因方法验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因之间的作用关系。结果:通过基因测序表明,本实验成功构建了CCND1a/Ma和CCND1b/Mb荧光素酶报告基因表达载体。将上述载体应用于荧光素酶报告基因实验,结果发现CCND1b组的荧光素酶表达强度显著降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的3'-UTR区域存在结合位点,其具体结合位置在CCND1b区。这在理论上意味着miR-15a-5p和miR-16-5p可以抑制CCND1基因的表达。
简介:摘要目的探讨肝占位性病变MRI误诊的原因和鉴别诊断要点。方法选取2013年8月-2015年8月来因肝占位性病变来我院做肝脏检查的病人,2000余例腹部MRI中,发现肝占位性病变误诊26例。结果26例均因体检时影像学检查发现肝占位性病变入院,均采取手术切除,术后病理检查显示5例为子宫内膜癌膈肌转移,5例为右肾上腺皮质腺癌,5例为炎性假瘤误诊为原发性肝癌,11例为肝结核诊断为原发性肝癌。结论术前影像学提示肝内占位性病变者不能排除非肝脏病变,临床表现不典型者容易误诊。可以通过进一步分析病灶自身因素、采用磁共振扩散加权成像法、提高扫描技术等方法降低误诊的概率。不能排除恶性占位性病变者建议手术切除,术后病理检查可以明确诊断。
简介:miRNA-183family,innormalbiology,isexpressedinaharmoniousandstablemannerintheneurosensoryorgansandcells.StudieshavealsoshownthatmiRNA-183family,indifferentpathways,affectstheneurosensorydevelopment,maintenance,survivalandfunction.Inaddition,ithaspotentialneuroprotectiveeffectsinresponsetoneurosensorydestructivestimulations.miRNA-96mutationcauseshereditarydeafnessinhumansandmice,andthereforeaffectstheinnerearactivityanditsmaintenance.CertainroleshavebeenidentifiedformiR-96inthemaintenanceandfunctionoftheinnerear.Thecomparisonofthetargetgenesoffamily-183intranscriptomesofnewbornandadulthaircellsshowsthathundredsoftargetgenesinthisfamilymayaffectdevelopmentandmaintenanceoftheears.IdentifyingthegenesthatareregulatedbymiRNA-183familyprovidesresearcherswithimportantinformationaboutthecomplexdevelopmentandenvironmentalregulationoftheinnerear,andcanoffernewapproachestothemaintenanceandregenerationofhaircellsandauditorynerve.
简介:摘要目的为了观察同型半胱氨酸致肾脏足细胞损伤的机制,进而为同型半胱氨酸致肾脏损伤的分子机制提供理论依据。方法培养小鼠肾脏足细胞后,并用0,10,20,60,80μmol/L同型半胱氨酸干预,采用MTT方法检测不同浓度同型半胱氨酸干预下足细胞的抑制率。提取足细胞RNA,进行逆转录后采用qRT-PCR的方法检测肾脏足细胞miR-92amRNA的表达。结果与正常对照组相比,同型半胱氨酸浓度为10、20、60和80μmol/L足细胞存活率下降,并且呈浓度依赖性。qRT-PCR结果显示在不同浓度的同型半胱氨酸作用下,miR-92amRNA表达随着同型半胱氨酸浓度的增高,表达增多。结论miR-92a可能参与了同型半胱氨酸导致的肾脏足细胞损伤。
简介:目的:探讨宫颈癌组织中miR-150的表达及意义。方法:收集62例宫颈癌组织样本,其中Ib期患者23例,IIa期患者29例、IIb期患者10例,正常宫颈组织13例,采用实时荧光定量PCR方法检测miR-150在不同宫颈组织中的表达,并将检测结果和临床及病理资料进行统计学分析。结果:宫颈癌组织中miR-150mRNA的表达量显著高于相应癌旁组织;宫颈癌组织miR-150mRNA的表达量明显高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P〈0.01);宫颈癌患者癌组织中miR-150mRNA的表达水平与宫颈癌的临床分期相关,与宫颈癌Ib期患者相比,IIa期以及IIb期宫颈癌患者癌组织中miR-150mRNA的表达水平明显增高,差异具有统计学意义(P〈0.05),而宫颈癌IIa期与IIb期患者的miR-150mRNA表达水平之间无明显差异(P〉0.05)。结论:miR-150在宫颈癌组织中高表达,可能作为癌基因调控宫颈癌的发生及发展。
简介:摘要目的针对肺癌患者在临床上病理特征研究的过程中,确定微小miR-340-5p血清在患者体内的表达,并充分确定其与患者相关临床病理特征之间的相关性,分析其是否能够作为潜在肿瘤的早期诊断依据。方法采用逆转录方式的定量聚合酶链式反应进行分析,将我院在2015年6月至2016年5月期间收治的108名患者作为研究对象,所有患者中55例为肺癌患者,21例健康患者,其余32名患者患有良性的肺部疾病,良性肺部疾病患者采用miR-340-5p检测,确定两组患者血清中miRNA的表达水平,并根据研究过程中确定的表达谱进行比对,为肺癌的诊断提供临床参考价值。在研究过程中,将t检验作为统计学意义检测。结果肺癌患者血清中的miR-340-5p检测水平显著高于健康组以及良性疾病患者,具有统计学研究意义(P<0.05)。结论miR-340-5p指标在肿瘤患者中表达程度较高,在临床诊断的过程中具有一定的特异性以及灵敏性,是目前对于肺癌诊断的有效指标。
简介:目的:探讨miR-451a及靶蛋白BAP31在结直肠癌中的作用。方法:体外培养HCT116、SW620、SW480、DLD细胞,以Real-timePCR法检测结直肠癌细胞系中miR-451a和BAP31的相对表达量;通过建立miR-451a不同表达情况的结直肠癌细胞HCT116模型,应用抑制消减杂交方法建立抑制消减文库,从中筛选miR-451a的调控蛋白,并通过萤光素酶报告基因检测miR-451a的直接调控靶基因;采用MTT法、流式细胞术以及Hoechst染色法评价miR-451a调控的靶蛋白BAP31对结直肠细胞凋亡的调节作用。结果:在抑制杂交消减文库中得到了miR-451a可能调控的相关基因,其中在正向文库中得到BAP31、EEF1A1和CDC20等7个基因,在反向文库中得到DKK1和PSME1等4个基因。在HCT116、HT29、SW480、SW620和DLD结直肠癌细胞中miR-451a的相对表达量是正常结肠上皮细胞NCM460中的0.32、0.44、0.53、0.43和0.73倍,BAP31在DLD、HT29、SW620和HCT116结直肠癌细胞中的表达量是正常结肠上皮细胞NCM460中的1.85、2.84、2.37和3.71倍。双萤光素酶报告基因实验证明,miR-451a可作用于与BAP31开放阅读框上游177的位点,通过miR-451a作用使海肾荧光素酶的活性降低80.3%。在HCT116细胞和SW620细胞中过表达miR-451a后72h抑制率分别为39.50%和39.50%;沉默BAP31后72h抑制率分别为45.32%和53.56%。过表达miR-451a48h后HCT116凋亡增加13.57%,SW620细胞凋亡率增加13.2%;沉默BAP3148h后HCT116细胞凋亡增加5.62%,SW620细胞凋亡率增加8.68%。结论:miR-451a在结直肠癌细胞中能够直接通过调控BAP31诱导细胞的凋亡从而抑制细胞的增殖。