简介：目的:检测慢性特发性血小板减少性紫癜(chronicidiopathicthrombocytopenicpurpura,CITP)患者外周血T细胞中JAK2/STAT3mRNA信号转导通路的基因表达,探讨JAK2/STAT3mRNA变化与CITP之间的相关性。方法:设立CITP患者组与健康对照组,用RT-PCR、琼脂糖电泳等方法检测CITP组及对照组外周血T细胞中JAK2/STAT3mRNA基因的表达水平。结果:经PCR及RT-PCR实验证实,JAK2/STAT3mRNA表达有清晰条带,熔解曲线峰值单一,CITP组JAK2mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.0004);STAT3mRNA表达水平也明显高于对照组(P<0.0001);这表明CITP患者的JAK2/STAT3mRNA表达水平明显升高。结论:CITP组中JAK2/STAT3mRNA均有表达,且与对照组相比明显升高,其升高与患儿CITP发生有关。

简介：Objective:Toobservetheinfluenceofintra-articularinjectionofsodiumhyaluronate(HA)onthemRNAexpressionsofmatrixmetalloproteinase-1,-3(MMP-1,-3)andtissueinhibitorofmetalloproteinase-1(TIMP-1)incartilageandsynoviumoftraumaticosteoarthritis(OA).Methods:Sixteenwhiterabbitsunderwentunilateralanteriorcruciateligamenttransection(ACLT)weredividedinto2groupsrandomly5weeksaftertransection.Theexperimentalgrouprabbitsreceived0.3mlof1%HAbyintra-articularinjectiononceaweek.Animalsinthecontrolgroupweretreatedunderthesameconditionsusingphysiologicalsaline.Tenweeksfollowingsurgery,cartilageandsynoviumwereharvested.ThemRNAexpressionsofMMP-1,MMP-3andTIMP-1wereanalyzedusingreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR).Results:Insynovium,themRNAexpressionofMMP-3wassuppressedintheHAinjectiongroup.HAtreatmenthadnoeffectontheMMP-3expressionincartilage.NosignificantdifferenceofMMP-1andTIMP-1expressionsincartilageandsynoviumwasfoundbetweentheHAinjectiongroupandthecontrolgroup.Conclusions:OneofthemechanismsofthetherapeuticeffectofHAmaybetheinhibitionofexpressionofMMP-3insynoviumduringearlystageoftraumaticOA.

简介：摘要目的为了探讨类风湿性关节炎患者体内IL-21受体mRNA的检测意义。方法回顾性总结在我院进行检验和治疗的类风湿性关节炎患者共计110例。结果观察组患者IL-21含量水平均值为（510.4±66.2）pg/mL，明显高于健康对照组数据结果（332.8±30.1）pg/mL，差异具体统计学意义（P<0.05）。结论IL-21物质参与了类风湿性关节炎的发病过程，故该物质的水平可用于疾病的检测，具有广阔的应用前景。

简介：

简介：目的探讨多粘菌素B(PMB)对内毒素(LPS)刺激的巨噬细胞Toll4、TNF-α、IL-6mRNA表达的抑制作用.方法应用鲎试剂法测定PMB对LPS的中和作用,运用鼠腹腔巨噬细胞分离培养,并加入PMB与LPS培养3h,RT-PCR检测Toll4、TNF-α、IL-6mRNA转录水平变化.结果PMB具有较强的中和LPS能力,其IC50约为4.35±0.91μmol·L-1;PMB1.75mg·ml-1能够显著抑制1μg的LPS刺激的鼠腹腔巨噬细胞Toll4、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平(P<0.05).结论PMB可能通过对LPS的中和作用,进而抑制LPS刺激细胞因子的mRNA表达.

简介：摘要： 目的 研究黄芪甲苷对铅暴露后小鼠海马组织中核因子红细胞 2相关因子 (Nrf2)和血红素加氧酶 -1(HO-1)mRNA表达的影响。方法 运用醋酸铅通过自由饮水的方式构建铅暴露小鼠动物模型，给予黄芪甲苷进行药物干预。运用 RT-PCR技术检测 Nrf2、 HO-1 mRNA表达。结果 给药组与模型组相比，小鼠海马组织中 Nrf2、 HO-1 mRNA的表达均显著上升。结论 黄芪甲苷通过上调 Nrf2和 HO-1mRNA表达对铅暴露后小鼠神经发育毒性可能产生抑制作用。

简介：目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓基质细胞IL-32mRNA的表达及其与骨髓单个核细胞凋亡的相关性。方法:收集山东大学附属济南市中心医院26例MDS患者和10例缺铁性贫血(IDA,对照组)患者骨髓液,分离骨髓单个核细胞,分离培养骨髓基质细胞,采用RT-PCR检测骨髓基质细胞中IL-32mRNA表达,采用AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡情况,采用直接免疫荧光标记全血溶血法,流式细胞术检测患者骨髓淋巴细胞及NK细胞计数情况。结果:MDS患者骨髓基质细胞IL-32mRNA表达显著性高于对照组,RA、RAS及RCMD患者骨髓基质细胞IL-32mRNA表达显著高于RAEB(P<0.05),而RAEB与对照组之间无显著差异。MDS组骨髓单个核细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),RA、RAS及RCMD患者骨髓单个核细胞凋亡率均显著高于RAEB(P<0.05),RAEB与对照组之间无显著差异。MDS患者细胞凋亡与骨髓基质细胞IL-32mRNA表达显著相关(r=0.870)。MDS患者骨髓中NK细胞数量与对照组无显著差异。结论:骨髓基质细胞IL-32mRNA的表达与MDS细胞凋亡显著相关,骨髓基质细胞分泌IL-32可能是MDS骨髓细胞凋亡的原因之一,推测MDS骨髓微环境异常参与了骨髓细胞的凋亡。

简介：目的：研究CK20mRNA、CD44v6和PCNA与大肠部肝转移的关系，探讨临床预测大肠癌早期肝转移的客观指标。方法：应用荧光定量RT-PCR法检测和50例大肠癌患者回流门静脉血中CK20mRNA，同时应用免疫组织化学方法测定大肠癌癌组织中CD44v6,PCNA的表达，并与对照组比较。结果：大肠癌患者门静脉血CK20mRNA，癌组织中CD44v6,PCNA表达阳性率明显高于良性病变对照组（P〈0.01）和正常对照组（P〈0.01）；大肠癌组织中CD44v6及PCNA的表达与门静脉中CK20mRNA的表达有显著性相关（γ1=0.933,γ2=0.906,P〈0.05）;肝转移组，CK20mRNA,CD44v6,PCNA阳性表达率均高于非肝转移组（P〈0.05）。结论：联合检测CD44v6,PCNA及CK20mRNA预测大肠癌肝转移，可显著提高预测的灵敏度及特异性，对于大肠癌早期肝转移监测具有很高的临床价值。

简介：摘要：目的：探讨HPVE6/E7mRNA联合薄层液基细胞学检查（TCT）筛查宫颈癌的临床价值。方法：选择2023年10月～2024年6月在我院就诊的100例妇科门诊患者为研究对象，分别进行HPVE6/E7mRNA检测、TCT检测和宫颈活检，比较三种方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度，并分析HPVE6/E7mRNA与TCT结果的相关性。结果：HPVE6/E7mRNA检测结果显示，100例患者中有25例为阳性，75例为阴性。TCT检测结果显示，100例患者中有30例为阳性，70例为阴性。HPVE6/E7mRNA检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为80.0%、96.0%、76.0%、96.4%和92.0%。TCT检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为70.0%、93.3%、66.7%、94.3%和88.0%。HPVE6/E7mRNA检测与TCT检测的一致性为82.0%，Kappa值为0.64，表明两者有中等程度的相关性。结论：HPVE6/E7mRNA联合TCT检测能够提高宫颈癌的筛查效率和准确性，是一种有效的宫颈癌筛查方法。

简介：Puma为一种凋亡调控因子。本研究探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者p53上调pumamRNA的表达情况，并探索其在评估CLL预后中的意义。采用基于SYBRGreenI荧光染料法的实时定量逆转录PCR（qRT—PCR）方法检测100例CLL患者及11名健康对照者外周血标本中puma基因的表达，以β-actin为内参照，用2（-△Ct）方法计算puma的相对定量值，组间分析采用秩和检验。结果显示，qRT—PCR标准曲线的R^2均≥0．990，批内差及批间差变异系数（CV）均小于5％，灵敏度可达10^2copies／μgRNA。100例CLL患者puma基因表达水平中位数为1．038×10^-3（4．106×10^-4-2．806×10^-3）；11名健康对照者puma表达水平中位数为1．220×10^-3（7．233×10^-4-1．405×10^-3），二者无显著性差异（U=544．5，P=0．957）。临床分期较早（Binet分期A期）的患者puma表达水平明显高于临床分期较晚（Binet分期B期、C期）的患者（p〈0．001）；具有CD38表达阳性、ZAP-70蛋白表达阳性、血清乳酸脱氢酶水平增高、血清β2-微球蛋白水平增高的患者，其puma基因表达水平均明显低于无以上不良预后因素的患者，差异显著（P值分别为0．002，0．012，0．009和0．046）；FISH检测显示存在12号染色体三体和14q32易位的患者puma表达水平明显低于无以上分子遗传学异常者，其差异显著（P值分别为0．003和0．045）。结论：qRT-PCR方法检测puma表达灵敏可靠，puma表达水平与CLL多种预后因素存在相关性，在评估CLL预后中具有重要价值。

简介：目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）E6/E7mRNA检测在无明确诊断意义的不典型鳞状细胞（ASC-US）患者中的临床应用价值.方法对320例ASC-US患者进行HPVE6/E7mRNA和高危型HPV（HR-HPV）DNA检测,结合病理学诊断资料进行统计学分析.结果CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的HPVE6/E7mRNA阳性率分别高于CINⅡ-级和CINⅢ-级,差异均有统计学意义（P〈0.001）;不同等级宫颈病变的HPVE6/E7mRNA拷贝数不同,差异有统计学意义（P〈0.001）,且宫颈病变级别与mRNA拷贝数之间呈正相关.HPVE6/E7mRNA与HR-HPVDNA检测CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值差异均无统计学意义（P〉0.05）;两者特异度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论HPVE6/E7mRNA检测作为ASC-US的分流指标更确切有效,是目前ASC-US患者是否阴道镜转诊的较佳分流策略.

简介：目的观察烫伤大鼠伤后不同时间切痂其骨骼肌解偶联蛋白(UCP)2、UCP3mRNA表达水平的异同.方法选用120只雄性Wistar大鼠,其中8只作为正常对照组;余下112只造成30%TBSAⅢ度烫伤后分成4组:A组不切痂,分别于伤后8、24、96、120、168h处死;B组伤后8h切痂,于伤后24、96、120、168h处死;C组伤后24h切痂,伤后96、120、168h处死;D组伤后96h切痂,伤后120、168h处死.测定各组大鼠各时相点的血清瘦素、肿瘤坏死因子(TNF)α含量以及腓肠肌UCP2、UCP3mRNA表达水平.结果(1)血清瘦素水平:A组大鼠伤后24～168h均低于正常对照组(P<0.01),B、C、D组伤后120h和(或)168h均高于A组(P<0.01).(2)血清TNF-α水平:A组伤后各时相点均高于正常对照组(P<0.01),B组伤后各时相点均低于A组(P<0.05或0.01).C组伤后168h低于A组(P<0.05).(3)腓肠肌UCP2mRNA的表达量:A组大鼠在烫伤后8h即已明显升高(P<0.01),24h到达高峰,以后逐渐下降.B、C组伤后168h时分别为0.32±0.20、0.35±0.15,明显低于同时相点A组0.71±0.12(P<0.05).各组腓肠肌UCP3mRNA表达的变化趋势与UCP2类似.结论大鼠严重烫伤后UCP2、UCP3mRNA表达上调可能是代谢率升高的重要因素之一,休克期切痂可降低这一表达,降低代谢率.

简介：目的建立不同持续性高正加速度（＋Gz）环境下的动物模型,研究颞颌关节紊乱病（temporomandibularjointdisorder,TMD）软骨关节基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶,以及IGF-1、TGF-β1、TNF-α、IL-2与IL-3的变化情况。方法分离并体外培养正常与＋Gz下的颞下颌软骨细胞,提取总mRNA,荧光定量PCR检测。结果Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶,以及IGF-1、TGF-β1明显减少,TNF-α、IL-2与IL-3显著增高。结论在＋Gz下,颞下颌关节软骨基质成分受到严重影响,修复能力下降,炎性反应增加。

简介：摘要：目的：在研究中基于多重实时荧光定量PCR的方法以及相关的技术，来建立一个能够同时对14中高危型人乳头瘤病毒进行检测与分析，来有效地建立一个对癌基因E6/E7mRNA的检测方法。方法：在此次研究中选取我院223例临床样本进行检测与分析，来探究14种高危型人乳头瘤病毒中，不同病毒的E6/E7基因序列，来探究这些基因序列中存在的区域设计特异性，并且结合相对应的反应体系来构建一个高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA的检测方法与系统。在实验中需要结合这些临床样本来利用温核算扩增技术进行高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测，最终来探究其检测结果与宫颈组织病理学检测结果之间是否存在着一致性。结果：在实验中所建立的检测方法，能够在试验检测中将检测限提升更高的程度，并且对于一些常见低危型HPV中也并没有出现交叉检出的情况，使用多重实时荧光定量PCR方法所检测出的结果与Aptima HPV检测结果是具有较好的一致性，并且多重实时荧光定量PCR法中的敏感性为84.0%，特异性更是高达94.4%阴性预测值比阳性预测值高出更多，高达97.9%，而阳性预测值仅为65.6%。结论：使用多重实时荧光定量PCR法进行检测有着特异性好、稳定性好以及灵敏性高等等优势，能够在为高危型人乳头瘤病毒的患者提供一个更好的诊断方案以及技术平台。

简介：【摘要】 目的：分析Kv1.3通道的mRNA水平与药物的相关性并检测该通道在B16F10小鼠黑色素瘤细胞中的表达。 方法：分析通道的mRNA与癌症治疗反应库中的药物相关性，并采用蛋白免疫印迹法检测Kv1.3的表达水平。 结果：Kv1.3与IKCa1通道mRNA水平与多种药物具有反向相关性，且Kv1.3在黑色素瘤细胞中表达。 结论 Kv1.3在黑色素瘤中高表达，为以Kv1.3为靶向的黑色素瘤药物敏感性研究提供了依据。

简介：目的探讨不同浓度的曲古抑菌素A(trichostatinA，TSA)对人胃腺癌SGC-7901细胞增生及其端粒酶hTERT-mRNA表达的作用。方法不同浓度的TSA与人胃腺癌SGC-7901细胞株共培养，MTT检测细胞增生，RT—PCR法检测细胞端拉酶hTERTH-mRNA的表达，同时用相差显微镜动态观察细胞形态及生长方式上的改变。结果TSA呈时间剂量依赖性抑制胃癌细胞株SGC-7901的生长，同时它也能显著减少hTERT-mRNA的表达，呈剂量依赖关系。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能抑制胃癌细胞株SGC-7901的hTERT-mRNA表达，进而抑制其生长，这可能是组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA抗肿瘤的另一机制。

简介：本研究确切了解CML患者异基因造血干细胞移植后bcr—ablmRNA的变化情况，为临床诊断早期复发提供实验依据。用实时荧光定量PCR方法检测15例慢性粒细胞白血病（CML）患者异基因造血干细胞移植前后78份外周血和骨髓标本的bcr—ablmRNA水平。结果表明，移植前患者的bcr—ablmRNA水平较高，中位数为29．303％；移植后1个月时检测bcr—ablmRNA水平较移植前大幅度降低，中位数为0；移植后1年内，连续多次检测bcr—ablmRNA水平，变化模式不一致，但6个月后的总体水平较6个月前明显降低，移植1年以上的受者绝大多数bcr—ablmRNA检测不到，或偶可检测到，但水平极低（0．007％、0．004％和0．021％），所检测受者的骨髓和外周血像均正常；同期骨髓与外周血bcr—abl水平无明显差异，且变化趋势一致。结论：CML患者移植后早期bcr—abl水平变化起伏较大，连续动态检测可明确其变化趋势，有助于判断移植效果、指导临床治疗，但6个月前检测到bcr—abl存在并不提示疾病复发；检测外周血bcr—abl或许更适于临床上对患者的随访。

简介：摘要目的补肾壮骨胶囊对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡指数及Bax、Bcl－２mRNA的影响.方法选取４０只新西兰兔随机分为A正常组、B模型组、C治疗组、D对照组.B、C、D三组按照Hulth造模方法造成膝骨性关节炎模型.C组给予补肾壮骨胶囊,D组给予壮骨关节丸.给药８周后,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测软骨细胞的凋亡指数(AI);逆转录－聚合酶链式反应(RT－PCR)检测关节软骨细胞Bcl－２mRNA、BaxmRNA表达水平.结果与正常组相比,C组和D组的软骨细胞AI均较高,但都小于B组;C组和D组在Bax/Bcl－２比较无差异(P＞０．０５),但都低于B组.结论补肾壮骨胶囊能抑制软骨细胞的凋亡,提高软骨细胞Bcl－２mRNA表达,降低BaxmRNA表达.关键词补肾壮骨胶囊;膝骨性关节炎;软骨细胞凋亡;Bax;Bcl－２AbstractObjectiveBushenzhuanggucapsuleonrabbitkneeosteoarthritiscartilagecellapoptosisindexandBax,bcl－２mRNA．Methodsselect４０NewZealＧandrabbitswererandomlydividedintoanormalgroup,modelgroupB．CgroupandDcontrolgroup),B,C,DgroupsaccordingtoHulthmodelingmethodresultinginkneeosteoarthritismodel．CgroupweretreatedwithBushenZhuanggucapsuleandgroupDreceivedZhuangguGuanjiepill．After８weeksoftreatment,usingtermiＧnaldeoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling(TUNEL)forthedetectionofcartilagecellapoptosisindex(AI)transfer;reversetranscriptionpolymerasechainreactionShould(RT－PCR)forthedetectionofarticularcartilagecellsofbcl－２mRNA,BaxmRNAexpressionlevel．Resultscomparedwiththenormalgroup,CgroupandDgroupcartilagecellAIwerehigher,butlowerthanthatofgroupB;ingroupCandgroupDintheBax/Bcl－２hadnodifference(P＞０．０５),butlowerthantheBgroup．ConclusionBushenzhuanggucapsulecaninhibittheapoptosisofcartilagecells,improvecartilagecellsofbcl－２mRNAexpression,deＧcreasetheexpressionofBaxmRNA．keywordBushenzhuanggucapsule;kneeosteoarthritis;cartilagecellapoptosis;Bax;Bcl－２中图分类号R３２９文献标识码B文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－１４３３－０２

简介：本研究探讨糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D（glycosylphosphatidilinoditol—specificphospholipaseD，GPI—PLD）在急性髓系白血病病人骨髓单个核细胞中的表达及其意义。采用半定量RT—PCR和酶转化底物的百分率的方法检测急性髓系白血病初发组、难治复发组、缓解组与正常对照组骨髓单个核细胞GPI—PLD酶活性和mRNA表达，并比较它们之间的差异。结果显示：急性髓系白血病初治组骨髓单个核细胞GPI—PLDmRNA表达和GPI—PLD活性分别为I．86±0．32、（46．96±7．15）％；缓解组分别为1．26±0．29和（33．36±5．13）％；难治复发组分别为1．79±0．19和（44．31±7．22）％；而正常对照组分别为1．27±0．23和（35．38±5．15）％。初治组和难治复发组的GPI-PLD活性与mRNA表达均明显高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01）；而缓解组与正常对照组之间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：GPI-PLD活性和mRNA表达水平变化一致；初治组和难治复发组急性髓系白血病病人骨髓单个核细胞GPI-PLD活性与mRNA表达水平明显高于正常组。GPI-PLD是否在白血病的发生、发展过程中发挥一定作用，有待进一步研究。

简介：目的研究载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G（APOBEC3G）在不同慢性乙肝病毒（HBV）感染类型患者的外周血单个核细胞（PBMC）中的表达水平。方法以健康体检者为对照组,应用荧光定量PCR检测不同慢性HBV感染类型患者（慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、肝癌）的PBMC中APOBEC3G的表达状况。结果不同慢性HBV感染者中慢性乙型肝炎组、肝炎肝硬化组、肝癌组的APOBEC3GmRNA水平分别为6.62±0.17、6.58±0.32、6.69±0.25,均高于对照组,差异均有统计学意义（t分别=18.32、11.07、15.60,P均〈0.05）,但不同慢性HBV感染者之间PBMC中APOBEC3G的mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义（t分别=0.45、0.86、0.69,P均〉0.05）。结论慢性HBV感染患者虽有APOBEC3G的表达升高,可能只是HBV慢性感染的伴随表现,APOBEC3G在人体内对HBV复制的影响可能不是直接的抑制作用。