简介：目的：建立并改良磁珠提取基因DNA的方法,以应用于HLA常规测序分型。方法：使用磁珠法自动提取系统从全血中提取基因组DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度,利用测序仪对PCR扩增产物进行测序及相关的分析软件进行HLA分型结果分析。比较改良前后DNA浓度与纯度、HLA分型结果成功率、信噪比及测序胶图的反应格局。结果：改良后96份DNA浓度的均一性、纯度均优于改良前;32份HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率改良后高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32人份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率均高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32份分型胶图反应格局均优于改良前。结论：改良磁珠提取DNA法能稳定、可靠地应用于HLA测序分型,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景。

简介：目的:研究不同感染乙型肝炎病毒血清标志物与乙型肝炎DNA含量的关系及临床意义。方法:采用信号引物能量转移定量聚合酶反应测定血清HBVDNA载量。采用全自动快速微粒子酶免分析检测系统检测。结果:不同HBVDNA载量的血清其病毒含量,HBVDNA载量越高,免疫清除HBVDNA载量相对较低,病毒残留HBVDNA载量较低或无HBVDNA复制。结论:研究显示HBsAg和HbeAg与乙肝病毒含量有一定的关系,在一定程度上反映了病毒的复制状态。另外还表明肝功酶学的2个指标ASTALT与乙型肝炎病毒含量关,可以将其比值作为评估感染乙型肝炎病毒程度高低的依据。

简介：输血传播性疾病中,HBV、HCV、HIV是对输血安全性构成严重威胁的主要病毒,HBV在我国人群中感染率高达10.3%,因此,严重威胁我国的输血安全。HCV在我国人群中感染率为1.0%-3.1%,由于技术原因,对供血者还存在一定的漏检率,致使70%输血传播性肝炎是由HCV引起。

简介：目的：探索应用免疫磁珠法富集母体外周血DNA并预测其胎儿RHD血型。方法：采集96例来自武汉大学中南医院产前诊断确诊为RHD阴性孕妇外周血,使用免疫磁珠法和血液DNA提取试剂盒（QIAgeneDNA法）抽提母体外周血DNA用以提取胎儿DNA。通过测定母体血浆中的SRY和STR来证实是否获得胎儿DNA,同时使用荧光定量PCR（RQ-PCR）扩增胎儿RHD基因外显子7,预测胎儿RHD血型。结果：通过免疫磁珠法,胎儿DNA的总提取量提高了1.8倍。配对四格表2检验结果显示免疫磁珠法在准确度方面与QIAgeneDNA法相较,妊娠早期（≤14周）2种方法差异有统计学意义（P〈0.05）,而妊娠中晚期（〉14周）2种方法差异无统计学意义。另外,使用免疫磁珠法提取DNA预测胎儿RHD血型时,有86例结果与胎儿RHD血清学方法鉴定一致,使胎儿RHD血型预测的准确率高达89.6%。结论：使用免疫磁珠法提取胎儿DNA不仅能够改善胎儿DNA的总提取量,同时还可以提高妊娠早期胎儿RHD血型预测的准确率,为RHD血型不合导致的新生儿溶血病的早期诊断和治疗提供更好的试验基础。

简介：免疫固定电泳（IFE）将区带电泳和免疫扩散结合起来,是一种灵敏性和特异性很好的分离和鉴定M蛋白的方法,可以鉴别血清中免疫球蛋白异常增生,并对异常免疫球蛋白亚类分类,M蛋白的存在是淋巴细胞或浆细胞克隆增殖性疾病的重要证据,因此对B淋巴细胞或浆细胞疾病的鉴别诊断有很大价值。

简介：目的：探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）的免疫分型。方法：应用流式细胞仪对10例CLL患者外周血进行淋巴细胞表面抗原检测。结果：10例CLL患者CD19抗原阳性表达率为100%。其中1例患者CD5、CD19、CD20、HLA-DR、CD3、CD13均阳性,且CD34表达率大于10%;另有1例为CD5、CD19、CD20、HLA-DR阳性且伴CD7阳性。CD5、CD19、CD20、HLA-DR同时阳性的患者为50%。结论：CLL以B细胞慢淋为主,免疫分型对慢淋的诊断及鉴别诊断具有重要意义,其免疫分型可存在伴系表达。

简介：目的：评价脱落细胞学、DNA异倍体、肿瘤标志物检查联合诊断恶性胸腹水的应用价值。方法：贝克曼公司RS-6500流式细胞分析仪,观察DNA异倍体,以DNA异倍体≥10%作为阳性标准;涂片染色,镜下观察细胞形态特征;肿瘤标志物检查使用Combas6000电化学发光仪测定。结果：39例恶性肿瘤,DNA异倍体分析有21例阳性,阳性率53.9%,70例良性肿瘤仅1例阳性,阳性率1.4%;细胞学检查,39例恶性胸腹水以找到癌细胞为阳性,阳性16例,阳性率41.0%,70例良性胸腹水中,未找到癌细胞;肿瘤标志物（SF、CEA、NSE、CA-125）检查,恶性阳性率为74.4%,61.5%,64.4%,72.0%,良性阳性率为15.8%,21.4%,12.5%,5.6%,差异有统计学意义（P〈0.01）,4项联合检测,以任意一项阳性指标作为阳性判断,可将敏感度提高到92.3%。细胞学、DNA异倍体与肿瘤标志物联合检测,其联合灵敏度为87.0%,联合特异度为77.7%,灵敏度明显提高。结论：脱落细胞学、DNA异倍体、肿瘤标志物联合检测,可大大提高恶性胸腹水的诊断阳性率。

简介：目的：本文旨在对行剖宫产术的孕产妇进行等容稀释性自体输血（ANH）初期研究的基础上,探讨异体输血及ANH对行剖宫产术的孕产妇免疫功能的影响差异。方法：选择待进行剖宫产术分娩的孕产妇50例,随机分为2组。ANH组（Ⅰ组）：于麻醉后手术切皮前经桡动脉放血400~600ml,同时经静脉输入等容量的扩容液,产后或产程即将结束时将自体血回输。异体输血组（Ⅱ组）：剖宫产术中据情况给予异体悬浮红细胞2~3单位。分别于产前、产后第1、5天抽取静脉血,用流式细胞仪测定外周血中自然杀伤细胞（NK）、巨噬细胞、IL系列因子、IgG、IgM、CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋的变化情况。结果：12组产后1天CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋较产前显著减少,其中Ⅱ组较Ⅰ组减少更明显,NK细胞升高,P〈0.05。产后5天Ⅱ组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋仍较产前显著减少,而Ⅰ组均基本恢复正常,且Ⅰ组CD3＋、CD4＋、高于Ⅱ组,P〈0.05。2产后1天IgA、lgG2组均减少,IL-6、IL-8、TNF-a2组均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;产后5天Ⅰ组均基本恢复正常,Ⅱ组与产前相比,2组差异有统计学意义（P〈0.05）;IgM2组变化不显著,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：12组产后1天CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋较产前显著减少,其中Ⅱ组较Ⅰ组减少更明显,NK细胞升高,P〈0.05。产后5天Ⅱ组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋仍较产前显著减少,而Ⅰ组均基本恢复正常,且Ⅰ组CD3＋、CD4＋、高于Ⅱ组,P〈0.05。2产后1天IgA、lgG2组均减少,IL-6、IL-8、TNF-a2组均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;产后5天Ⅰ组均基本恢复正常,Ⅱ组与产前相比,2组差异有统计学意义（P〈0.05）;IgM2组变化不显著,差异无统计学意义（P〉0.05）。

简介：目的：对临床上需要输血的自身免疫溶血性贫血患者进行血清学实验结果分析,使输血达到安全、有效。方法：对9例患者进行直抗、间抗、放散等一系列血清学实验。结果：自身免疫溶血性贫血患者血清中不但含有非特异性自身抗体,有时还同时存在特异性抗体。结论：自身免疫溶血性贫血输血配型要特别小心,输注洗涤红细胞有一定风险。

简介：目的：回顾分析本地区ABO血型定型困难,红细胞不规则抗体与血小板抗体阳性在血液病患者中的发生状况,探讨其输血前检查的难点与重点。方法：使用试管法对标本进行ABO正反定型、抗体鉴定,使用固相凝集方法进行血小板抗体筛查。结果：血液病患者ABO血型正反定型的凝集强度易发生改变导致定型困难,自身与同种抗体常单独或同时存在导致供受者红细胞与血小板的不相配合,血型异常与抗体阳性的情况与血液病的种类有关。结论：血液病患者易发生血型异常、易产生红细胞与血小板抗体,应结合其病史和输血史分析输血前检查结果选择适合的血液,保证临床输血安全。

简介：目的：探讨异体输血对消化道出血患者凝血功能血小板及部分免疫功能的影响。方法：选择消化性溃疡出血患者40例,血红蛋白65-75g/L,其中对照组患者20例,不给予输血治疗,试验组患者20例,给予输注少白红细胞2-4U,并分别于输血前、输血后1d抽取2组患者静脉血,检测患者凝血功能及外周血中自然杀伤细胞（NK）、IgG、IgA、IgM、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋的变化情况。结果：输血后1d试验组患者,NK细胞、CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋较输血前显著减少（P〈0.05）;输血后1d,试验组患者IgG减少,差异有统计学意义（P〈0.05）,2组IgA、IgM变化不显著（P〉0.05）;输血前、输血后1d2组患者凝血功能及血小板指标变化均差异不显著（P〉0.05）。结论：异体输血对纠正患者失血性贫血有疗效,但对患者免疫功能抑制明显;对于异体输血量在一定范围内的患者凝血功能无明显影响。

简介：自身免疫性溶血性贫血是一种获得性溶血性疾病,患者由于免疫功能紊乱产生抗自身红细胞的抗体.与红细胞表面的抗原结合.或激活补体使红细胞加速破坏而致溶血性贫血。患者具有：贫血、黄疸、乏力、肝脾肿大、肝功能检查异常等表现,

简介：目的：本文旨在对妇科恶性肿瘤患者术中等容稀释性自体输血（ANH）初期研究的基础上，探讨异体输血及ANH对妇科恶性肿瘤患者围手术期机体免疫功能的影响差异。方法：选择妇科恶性肿瘤患者40例，随机分为2组。等容稀释性自体输血组（I组）：于麻醉后手术切皮前经桡动脉放血400～600ml,同时经静脉输入相当容量的羟乙基淀粉，手术后半阶段将自体血回输；异体输血组（Ⅱ组）：术中输异体悬浮红细胞2～3U。分别于术前、术后1d、术后5d抽取静脉血，用流式细胞仪测定外周血中自然杀伤细胞（NK）、巨噬细胞、IL系列因子、IgG、IgM、CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋的变化情况。结果：①2组术后1dCD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋较术前显著减少，其中Ⅱ组较I组减少更明显，NK细胞升高（P〈O．05）；术后5dⅡ组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋仍较术前显著减少，而I组均基本恢复正常，且I组CD3^＋、CD4^＋高于Ⅱ组（P〈O．05）。②术后1dIgA、lgG2组均减少．IL-6、IL-8、TNF-α2组均升高，2组差异有统计学意义（P〈O．05）；术后5dI组均基本恢复正常，Ⅱ组与术前相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；IgM2组变化不显著，差异无统计学意义。结论：自体输血对患者免疫功能影响较小，对机体细胞免疫功能无明显抑制作用，而异体输血对免疫功能抑制明显。围手术期自体输血较异体输血具有明显的优越性。

简介：目的：比较微柱凝胶法与试管法对母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）免疫性抗体的检出率。方法：对临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本同时用微柱凝胶法和试管法进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验及抗体放散试验,并对患儿阳性血标本进行血型不规则抗体特异性鉴定及其效价测定。结果：在275例临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本中,用试管法检出直接抗人球蛋白试验阳性180例（65.5%）,抗体游离试验阳性197例（71.6%）,抗体放散试验阳性210例（76.4%）;用微柱凝胶法检出直接抗人球蛋白试验阳性224例（81.5%）,抗体游离试验阳性238例（86.5%）,抗体放散试验阳性251例（91.3%）。微柱凝胶法比试管法的凝集强度高1＋～2＋。结论：微柱凝胶法的敏感性略高于试管法,具有操作简便,影响因素少,易于标准化,结果客观及保存时间长等优点。

简介：目的:检测原因不明习惯性流产(UHA)患者免疫治疗前后血清中表皮生长因子(EGF)水平变化,探讨其变化在UHA发病及治疗中的作用。方法:采用皮下注射丈夫淋巴细胞的方法治疗UHA患者;应用ELISA法检测正常非孕妇女30例和UHA妇女30例免疫治疗前后血清EGF水平变化(Pg/mL)。结果:UHA患者血清中EGF水平(107.5±47.9)明显低于正常非孕妇女(169.1±56.6),P<0.01;免疫治疗后EGF水平(152.3±63.9),比治疗前明显升高,P<0.01。结论:血清EGF水平降低可能与UHA的发生相关,免疫治疗可上调UHA患者血清中EGF水平,利于胎盘胎儿生长,使妊娠成功。

简介：目的：评估化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）对输血前感染性指标检测结果的重复性,并制定合理的复查策略。方法：对2010-05-2011-11送检标本中低浓度HBsAg或属于乙肝少见指标组合模式的HBsAg436例、HBsAb194例、HBeAg147例、HBeAb161例、HBcAb85例,以及756例HCV阳性、707例Syphilis阳性和94例HIV初筛阳性的标本进行复查,评估两者之间的重复性。结果：HBsAg复查前后符合率为63.07%,HBsAg在浓度≤0.1U/mL、0.1～1.0U/mL、1～10U/mL和〉10U/mL的符合率分别为38.25%、66.07%、84.21%、96.11%,各组均差异有统计学意义（P〈0.01）。进一步分组后在0.05～0.15U/mL与0.15～1.00U/mL两组中复查前后符合率在统计学上有差异（均P〈0.05）;HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV、Syphilis和HIV复查前后符合率分别为96.39%、91.16%、96.27%、96.47%、97.35%、98.73%、91.49%。HCV在S/CO值为0.90～1.09与1.10～1.59,两组复查前后符合率差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：CMIA检测HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV、Syphilis和HIV重复性好,但HBsAg重复性较差。当HCVS/CO值在0.90～1.09以及HBsAg浓度≤0.15U/mL时,必须通过高速离心复查以确保检测结果的真实性。

简介：目的：比较高效价抗人球（效价≥1：512）蛋白、抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）（低效价）与微柱凝胶法在自身免疫性溶血性贫血（AIHA）实验室检测中的优势。方法：首先以微柱凝胶法直抗试验筛选阳性血液标本，然后对上述标本分别用高效价抗人球蛋白（效价≥1：512）、抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）做直抗半定量试验，γ中和试验。结果：微柱凝胶法易出现假阳性，抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）易出现假阴性。高效价抗人球（效价≥1：512）未发现假阳性，而且凝集梯度明显，易于结果判断分析。结论：高效价抗人球（效价≥1：512）在AIHA直抗试验中，较抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）与微柱凝胶法具有结果更加准确的明显优势。

简介：目的：探讨抗线粒体抗体（AMA）阳性和阴性的原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者的临床表现、血清学和免疫学指标及病理特征。方法：选取98例PBC患者,采用间接免疫荧光法测定AMA和AMA-M2,两者均为阳性者即为AMA阳性组,均阴性者为AMA阴性组。观察比较2组患者的临床表现、血清学和免疫学指标、病理特征。结果：98例PBC患者中,AMA阳性组有81例（82.7%）,AMA阴性组有17例（17.3%）。2组患者的临床表现、血清学指标、病理特征和分期间的差异均无统计学意义（均P〉0.05）。AMA阳性组患者IgM水平均明显高于AMA阴性组,AMA阳性组患者ANA、SMA阳性率均明显低于AMA阴性组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：AMA阳性与阴性PBC患者的临床表现、血清学指标、病理特征和分期相似,但AMA阳性PBC患者的血清IgM水平升高,ANA、SMA阳性率降低。

简介：血小板输注已成为临床上不可或缺的重要支持疗法,但在临床实践中发现,一些长期反复输注血液制品的患者,发生了血小板输注无效（platelettransfusionrefractoriness,PTR）,不但影响了治疗效果,严重的出血可能危及患者的生命。免疫因素是导致血小板输注无效的最主要原因之一,其中HLA-I类抗体是最受临床关注的关键因素,如何为患者提供HLA相合的血小板供者是成功处理免疫性PTR的关键所在。

简介：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（paroxysmalnoc-turnalhemoglobinuria,PNH）是一种后天获得性造血干细胞克隆性疾病。该病源于造血干细胞PIG-A基因突变引起糖肌醇磷脂（GPI）合成障碍,继而引起通过GPI锚连在细胞表面的多种膜蛋白的缺失,导致血管内溶血发作,全血细胞减少和血栓形成〔1〕。近年来许多证据表明PNH与再生障碍性贫血（AA）可发生相互转化，PNH的发生与GPI阴性细胞免疫选择与克隆扩增有关啦[2]。现就其分子机制的研究进展进行综述。