简介：目的探讨pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒在大鼠骨髓间充质干细胞（bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSC）中表达的情况,为下一步的动物实验奠定基础.方法构建插入人血管生成素-1（angiopoietin,Ang-1）和人血管内皮细胞生长因子165（vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165）双顺反子的pIRES重组质粒,经脂质体转染大鼠MSC,以实时荧光定量PCR技术分析各基因人源、鼠源以及总mRNA的动态变化.结果所构建的pVEGF165-IRES-Ang-1双顺反子重组质粒在大鼠MSC中成功表达了相应蛋白.人VEGF165得以高丰度表达,且在转染1d后mRNA检出的拷贝数最高;人Ang-1在4个检测时间点中的mRNA拷贝数比较稳定,但转录本的拷贝数较VEGF165显著降低;转入人Ang-1和人VEGF165后,各对应同源蛋白的总mRNA有显著增加,但大鼠MSC自身Ang-1与VEGF164的编码mRNA明显有下调趋势.结论pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒双基因表达量明显不一致,表现为受插入的位置关系影响,且可能受转染细胞内同源蛋白的总量调控.

简介：目的检测并分析某教学医院住院患者与环境中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）携带情况，分析住院患者与环境分离MRSA菌株的同源性。方法在上海市某教学医院采集住院患者样本418例和医院环境样本204例，分离鉴定MRSA，采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对MRSA进行基因分型，并分析同源性。结果共分离MRSA43株，其中从患者样本中分离17株，环境样本中分离26株，医院环境中公共用品分离率（23．5％）最高，与医护人员直接接触物品分离率（3．1％）差异有统计学意义。PFGE分型显示43株MRSA可分为23个基因型，其中A型（27．9％）最多，F型（9．3％）和L型（7．0％）其次，其余型别分离1～2株。部分相同或高度相似的PFGE型别的MRSA在不同患者和医院环境中都有检出。结论该院医院环境中MRSA检出率较高，且与住院患者样本中检出的MRSA呈现一定的同源性，应加强环境消毒和医护人员防控意识，最大限度减少交叉感染的发生。