简介:构建人源性5种乙酰胆碱M受体亚型(M1—M5)在中国仓鼠卵巢细胞(CHO—K1)上表达(CHO-hml-5R)稳定表达株对比分析R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体对M受体亚型的选择性。在稳定培养2代CHO-hml-5R细胞上,利用RT-PCR方法证实目的基因的表达,检测到5种乙酰胆碱M受体亚型的mRNA,应用放射性配体受体饱合试验检验分析各M受体亚型对氚标东莨宕碱([^3H]-NMS)的亲合力及结合饱和度,试验表明[^3H]-NMS对CHO-hml-5R的最大结合力(Bmax值)分别是M1:2110±165.1,M2:861±90.0,M3:1127±34.0,M4:1055±61.5,M5:1179±87.0pmol/mg·pro,[^3H]-NMS的Kd值M1-M5分别是0.97±0.22,1.16±0.14,0.99±0.06,0.56±0.08,1.12±0.06nM。结果表明5种M受体亚型(M1—M5)稳定住株成功表达,竞争抑制试验评价R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体的亚型选择特性,试验表明R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯对M4受体亚型(pD2=7.48)具有较高的选择性,高于其他M受体亚型M1(pD2=6.20),M2(pD2=5.99),M3(pD2=5.99),M5(pD2=6.70),而去甲基苯环壬酯的消旋体对五种受体亚型未表现出明显的亚型选择型。R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及消旋体对五个受体亚型的Hill系数(nH)〈1,均表现出对M受体的变构调节作用。该研究发现R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯对M4亚型具有较高的选择型拮抗作用,R-(-)去甲基盐酸苯环壬酯及其消旋体与CHO-hml-5R细胞的M亚型之间的作用存在变构调节机制。
简介:目的探讨乙型肝炎病毒pre—S1Ag、pre—S2Ag、HBV—DNA、HBV—M的相关性及其临床意义。方法HBV—DNA采用荧光定量PCR法;HBV—M及pre—S1Ag、pre—S2Ag采用ELISA法,检测96例HBV—DNA阳性感染者血清中pre-S1Ag、pre—S2Ag、HBV—M,同时以30例HBV—M全阴性的健康体检者血清作为对照,并对结果进行统计学分析。结果96例HBV—DNA阳性患者中HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性检出率为64.6%;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性检出率为20.8%;HBsAg、HBcAb阳性栓出率为14.6%;pre—S1Ag在96例HBV—DNA阳性标本中检出率为70.8%;pre—S2Ag检出率为79.2%;均明显高于HBeAg的阳性率64.6%,30例对照中未检测出pre—S1Ag、pre—S2Ag及HBV—DNA。结论HBeAg、HBV—DNA、pre—S1Ag、pre—S2Ag之间具有一定的关联性。pre—S1Ag和pre—S2Ag均较HBeAg敏感。pre—S1Ag与pre—S2Ag的栓出率差异无显著性,ELISA检测HBV—M、pre—S2Ag及pre—S1Ag只是表型指标,只能提供HBV感染的间接证据。而HBV—DNA的检测是HBV感染与否的直接证据。HBV—M、pre—S1Ag、pre—S2Ag、HBV—DNA的检测各自有其独特的临床意义。应用pre—S1Ag、pre—S2Ag、HBV—DNA及HBV—M进行联合检测,对HBV感染的早期诊断,了解HBV复制、转归及监测疗效和预后有重要的意义。
简介:目的:在钛-6铝-4钒(Ti-6Al-4V)合金微粒环境下观察重组成骨蛋白-1(recombinantOP-1,rOP-1)对成骨细胞的影响,为防治关节假体无菌性松动提供新的治疗途径。方法根据小鼠颅顶骨前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1)中是否加入Ti-6Al-4V微粒和rOP-1,分为微粒组(5、10、15μg/mLTi-6Al-4V)、处理组(微粒组加入200ng/mLrOP-1)、阳性组(加入200ng/mLrOP-1)和对照组,检测各组24、72、120hMC3T3-E1细胞增殖能力、72h碱性磷酸酶(akalinephosphatase,AKP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA的表达,及120h成骨细胞的矿化能力。结果①rOP-1无促进Ti-6Al-4V微粒环境下成骨细胞增殖能力,与微粒组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②rOP-1可提高成骨细胞分化,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);同时逆转Ti-6Al-4V微粒抑制成骨细胞分化,与微粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);③茜素红S染色后Ti-6Al-4V微粒钙结节数量随着浓度增加逐渐降低,和微粒组比较,加入rOP-1后钙结节数量呈增多趋势。结论Ti-6Al-4V微粒环境下,rOP-1无提高成骨细胞增殖能力,能提高细胞分化矿化能力,rOP-1可以作为潜在治疗关节假体无菌性松动一种方法。
简介:目的:阐明金雀异黄酮在体内对细胞色素氧化酶P-4503A(CYP3A)活性的影响。方法:本试验采用双周期交叉临床试验。临床试验按照两阶段交叉方案进行。第一阶段随机分成的2组受试者随机给予金雀异黄酮片或安慰剂处理14d,第15天给所有受试者米哒唑仑探针药,经过14d洗脱期后交叉重复试验,分别以0~36h血浆中米哒唑仑的血浆曲线下面积、半衰期作为CYP3A的活性指标。HPLC测定其活性。服药后0~36h血中咪达唑仑以及1'-羟基咪达唑仑用HPLC-MS/MS方法测定。结果:经金雀异黄酮处理后,咪达唑仑AUC0-36h明显降低[(144±55)ng.mL-1.hvs(126±40)ng.mL-1.h,P〈0.05],AUC0-∞显著降低[(209±57)vs(181±43)ng.mL-1.h,P〈0.05],Cmax显著降低[(49±20)vs(36±14),P〈0.05]。结论:金雀异黄酮对体内CYP3A酶活性具有显著的诱导作用,应当关注经CYP3A代谢的药物与金雀异黄酮合用时可能发生的潜在的药物相互作用。
简介:目的研究[^3H]洛非西定在大鼠体内不同给药途径的药代动力学。方法TLC法分离原型药物,液闪法洲定血浆中药物放射性强度,用3P87程序计算药动学参数。结果大鼠iv[^3H]OF其时-量曲线符合开放3室模型。T1/2为0.031-0.042h,T1/2(a)为0.352-0.398h,T1/2(B)为10.982-11.763h。大鼠po[^3H]LOF,其时-量曲线符合开放2室模型。T1/2(Ka)为1.037-1.102hT1/2(a)为2.113-2.325h,T1/2(B)为11.805-10.465h,Tmax为2.448-2.196h,F为53%55%。AUC和Cmax与剂量呈线性关系。结论药物在大鼠体内呈一级动力学过程。