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  • 简介:目的:建立十二指肠-空肠转流手术(duodenal-jejunalbypasssurgery,DJB)动物模型,观察术后GK大鼠胰岛素抵抗情况变化,研究DJB手术治疗2糖尿病机理。方法雄性Wistar大鼠为空白对照组;雄性GK大鼠分为模型对照组和DJB手术组。分别于手术后3、6和9周每组随机抽取6只动物进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验;钳夹实验结束后1周,检测肝脏GcK、G6P以及PEPCKmRNA表达情况以及骨骼肌细胞膜GLUT4含量变化。结果术后3周和6周,DJB手术组动物葡萄糖输注率(GIR)较模型对照组差异无显著性(P>0.05),肝脏GcK、G6P以及PEPCKmRNA表达量较模型对照组差异无显著性(P>0.05);术后9周,DJB手术组动物葡萄糖输注率(GIR)显著高于模型对照组(P<0.05),肝脏GcK表达量DJB手术组显著高于模型对照组(P<0.05),而G6P以及PEPCKmRNA表达量显著低于模型对照组(P<0.05);DJB手术后3、6和9周,DJB手术组骨骼肌细胞膜GLUT4含量较模型对照组差异无显著性(P>0.05)。结论DJB手术改善血糖水平是通过改善体内肝脏组织胰岛素抵抗,通过调节糖代谢酶表达,进而提高肝脏葡萄糖摄取并抑制肝脏糖异生作用。在实验周期内,DJB手术对于骨骼肌组织胰岛素抵抗未发现有明显改善,提示DJB手术治疗2糖尿病效果与时间有一定关系。

  • 标签: 2型糖尿病 GK大鼠 十二指肠-空肠转流术 高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验
  • 简介:目的:评价经膝下(BelowtheKnee,BTK)途径导管直接溶栓(Catheter-DirectedThrombolysis,CDT)治疗混合下肢深静脉血栓形成(DeepVeinThrombosis,DVT)安全性和有效性。方法:回顾性分析2013年1月至2017年10月于徐州市肿瘤医院介入科接受经BTK途径CDT治疗38例急性混合DVT患者临床资料,其中男性患者26例,女性患者12例,年龄54±11岁。结果:技术成功率为100%。经小隐静脉穿刺途径28例,小隐静脉切开途径4例,胫后静脉切开途径4例,胫后静脉穿刺途径2例。行CDT前,所有患者均接受临时可回收滤器置入,并于术后2周内取出。36名患者DVT血栓溶解成功(Ⅱ和Ⅲ级)。2名未获得血栓溶解成功患者,从症状发生到CDT时间均大于10天。对13例患者(左侧10例,右侧3例)进行髂静脉球囊扩张和支架植入。围手术期出现切口渗血4例,切开部位麻木5例,没有新发肺栓塞和大出血发等主要并发症。平均随访时间为2年(1个月-4年),28例患者超过1.5年。2例患者由于未服用华法林而出现反复髂股DVT。随访期间通畅率和PTS率分别为81.6%(31/38)和31.6%(12/38)。结论:采用经BTK途径行CDT治疗混合DVT是安全有效,围手术期及随访期间结果满意,是一种值得推广方法。

  • 标签: 下肢深静脉血栓形成 导管内溶栓 小隐静脉
  • 简介:目的研究组织转谷氨酰胺酶(tissuetransglutaminase,TG2)是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。方法使用携带短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达,以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒SaOS-2作为对照组,分别进行体外成骨诱导培养,并进行以下检测:诱导14d后各组矿情况(茜素红染色);诱导4、7d后碱性磷酸酶活性及I胶原、骨钙素、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA表达,并与诱导前表达水平相比较。结果SaOS-2细胞组及转染阴性对照shRNA组在体外成骨诱导过程中I胶原、骨钙素、BMP-2mRNA表达和ALP活性逐渐增加,14d时形成明显矿结节,而TG2敲减后SaOS-2细胞在诱导14d时矿水平显著低于对照组,诱导7d时ALP活性及I胶原、骨钙素、BMP-2mRNA表达水平显著低于对照组。结论组织转谷氨酰胺酶参与SaOS-2细胞体外成骨分化及矿

  • 标签: 组织型转谷氨酰胺酶 SAOS-2细胞 成骨分化
  • 简介:构建了二氢叶酸还原酶(dhfr)选择基因启动子上游无增强子(cnhancer)组织纤溶酶原激活剂(t-PA)组合突变体FrGGI真核表达质粒pZLFrGGI。将pZLFrGGI酶切线性,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-dhfr-)。用氨甲喋呤(MTX)筛选转染细胞。混合加压后,挑选克隆,在1×10-7mol/LMTX压力下,得到了表达水平达1500~2500IU/106细胞·24小时细胞株。此细胞株表达水平稳定,形态良好,倍增时间为36小时,且有进一步提高表达水平潜能,有望发展为工程细胞株。

  • 标签: 组织型纤溶酶原激活剂 突变体 基因表达 增强
  • 简介:人组织纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种用于治疗血栓性心血管疾病特效药物,它能激活血纤维蛋白酶原,后者使血块溶解,所以这种药物开发为社会普遍重视。t-PA在人体血液中含量极低,很难从天然材料中提取。如果应用转基因技术,将人t-PA基因转入动物体内,使其在乳腺中高效表达,从乳汁中提取大量t-PA,将具有可观经济效益和社会效益。转基因动物建立前提条件是构建乳腺定位高效表达载体。为此,我们先将本所保存t-

  • 标签: 乳腺定位表达载体 酶原激活剂 人组织型 大学研究 t—PA 纤溶
  • 简介:文献报道了从冬虫夏草(Cs)中同时检出蝙蝠蛾拟青霉(Ph)、中华被毛孢(Hs)和冬虫夏草菌(Os)多个基因;Cs成熟伴有化学成分改变和僵虫体中Hs竞争性菌落形成能力下降。同时检验了Cs成熟过程中Os突变基因生物量变化。应用Southern杂交检验发现:Cs成熟伴有Ph和2组Os基因生物量显著增加。Os突变基因ITS片段EcoRⅠ酶切位点缺失。Southern检验发现:在未成熟Cs中,AT偏倚菌在子座中rDNA生物量占绝对优势,在僵虫体中几乎没有;而GC偏倚菌则相反。随着Cs成熟,AT菌在僵虫体中大量增加;GC菌在子座中逐渐增加,但正向和逆向排列GC总量远低于AT。研究结果表明:Cs成熟伴有Ph和Os菌显著增加和几个Os突变基因菌在Cs子座和僵虫体中差异表达动态变化。这些变化可能对Cs子座萌发和成熟至关重要,为Cs无性世代研究提供了重要线索。

  • 标签: 冬虫夏草 子座 僵虫体 冬虫夏草菌 突变基因型的差异表达 核糖体DNA生物量
  • 简介:目的观察2糖尿病模型GK大鼠骨代谢特点以及骨密度和骨生物力学特性变化。方法采用雄性6月龄GK大鼠10只,以月龄、性别匹配健康Wistar大鼠作为正常对照。颈静脉取血检测与骨代谢有关生化指标。DXA法测定股骨和腰椎骨密度,并行股骨三点弯曲实验和腰椎压缩实验。甲基丙烯酸甲酯包埋胫骨干骺端以制备不脱钙骨切片。应用多媒体病理图像分析软件进行骨组织形态计量学分析。结果GK大鼠体重明显低于健康对照Wistar大鼠(P〈0.01)。与对照组相比,GK大鼠血清骨钙素水平明显降低[(4.97±0.49,6.75±0.71)μg/mL,P〈0.01],而抗酒石酸酸性磷酸酶活性明显升高[(17.92±5.23,8.31±2.69)U/L,P〈0.01],但血钙和血磷无明显变化(P〉0.05);股骨和腰椎骨密度显著降低[(0.16±0.01,0.22±0.02;0.12±0.01,0.16±0.02)g/cm2,P〈0.01];骨强度和腰椎弹性模量明显降低(P〈0.01)。骨形态学分析显示GK大鼠股骨长度和第五腰椎高度分别降低10.3%和9.5%(P〈0.01),股骨和腰椎横截面积无明显变化(P〉0.05)。骨组织形态计量学分析显示,GK大鼠骨小梁体积、骨小梁厚度、类骨质表面和厚度明显降低[(15.72±1.18,19.13±1.13)%,(61.91±4.54,74.43±3.63)μm,(18.18±1.25,19.63±1.07)%,(3.68±0.48,4.34±0.35)μm,P〈0.01或0.05],动态参数如矿表面、矿沉积率和骨形成率也明显降低[(17.77±1.54,19.56±2.07)%,(1.07±0.22,1.35±0.16;0.20±0.03,0.26±0.04)μm/day,P〈0.05或0.01],而矿延迟时间显著延长(2.66±0.56,2.12±0.35,P〈0.05)。结论非肥胖GK大鼠表现有骨量减少和骨折危险性增加;2糖尿病本身可干扰成骨细胞功能和活性而导致骨重建失衡。

  • 标签: 骨密度 骨生物力学 骨组织形态计量学 骨丢失 2型糖尿病 GK大鼠
  • 简介:刊登于国际杂志Diabetes上一篇研究报告中,来自邓迪大学研究人员通过研究发现,曾经被批准用于治疗2糖尿病新一代药物,在不需要与二甲双胍结合使用时或许会更加有效;这三种名为坎格列净(canagunozin)、达格列净(Dapagliflozin)和依帕列净(EmpagHnozin)可以抑制钠一葡萄糖共转运体2(SGLT2)新一代药物在过去两年里,在欧洲和美国被批准用于作用2糖尿病新型疗法。

  • 标签: 2型糖尿病 药物 治疗 研究人员 二甲双胍 转运体
  • 简介:在以密阳46为母本杂交后代中发现不育材料H236A,通过杂交和自交,确定其不育类型和不育度;通过碘染和徕卡荧光显微镜DM2500对成熟花粉粒观察,确定花粉粒育性、败育形态和时期。结果表明:H236A是胞质雄性不育,不育度达99.8%以上;花粉粒属典败达83.17%,圆败占16.83%,没有染败花粉粒,为单核期败育。花粉粒败育形态多种多样,有不规则形、梭形、圆形等。清晰观察到晚期小孢子细胞质定向移动形成细胞质桥现象。本文还讨论了成熟花粉粒败育时期和败育形态划分。

  • 标签: 水稻(Oryzasativa L.) 胞质雄性不育 花粉粒 密阳46胞质
  • 简介:DNA甲基属于一种表观遗传修饰,主要发生在CpG双核苷酸序列中胞嘧啶上,是在DNA甲基转移酶催化下,以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体,将甲基转移到胞嘧啶上,生成5-甲基胞嘧啶一种反应。DNA甲基在植物生长过程中具有极其重要作用。综述了植物DNA甲基特征、调控机制,及其对植物基因表达影响研究进展。

  • 标签: DNA甲基化 植物发育 调控
  • 简介:随着国家工业进程不断加快,越来越多地区呈现石漠问题,岩溶石漠是西南地区生态环境建设最为突出矛盾和问题,已经给经济和社会带来极大危害,严重制约经济社会和人类可持续发展.结合多年以来治理石漠治理经验,提出合理解决方案,配合政府管理,让石漠地区恢复生态平衡,满足群众发展和生存需要,实现统筹治理,协调发展治理策略,促进人与自然和谐发展.

  • 标签: 岩溶石漠化 治理措施 森林保护
  • 简介:目的:对北京地区成人呼吸道感染患者中人冠状病毒(HCoV)HKUl感染状况进行初步分析,了解其流行分布、临床特点,并确定流行株基因型别。方法:2011年1月~2012年1月从北京地区成人呼吸道感染患者中收集鼻咽拭子标本559份,利用靶向棘突蛋白S与核心蛋白N2种巢式PCR方法进行HCoV—HKUl筛查,并对阳性片段进行序列测定,以确定其基因型别;同时,对阳性标本进行常见呼吸道病毒共感染筛查,进而分析HCoV—HKUl感染临床表现和流行病学特点。结果:559份鼻咽拭子标本中检出HCoV—HKUl阳性9例(1.61%),其中3例合并HCoV-0C43感染;感染患者临床表现为急性呼吸道症状,以发热(88.9%)、咽痛(66.7%)、寒颤(68%)、流涕(55.6%)和咳嗽(44_4%)为主,其中1例有系统性红斑狼疮史;阳性基因片段系统进化分析发现这9例感染均为HCoV—I-IKUlB。结论:北京地区近年成人呼吸道感染患者中HCoV—HKUl感染率较低(1.61%)。其流行株基因为B

  • 标签: 人冠状病毒 HCoV—HKU1 呼吸道感染 成人 基因型
  • 简介:目的:探讨医学模拟教学结合以问题为导向(PBL)教学模式在重症医学教学中应用价值。方法:选取2015年1月-2017年1月在我院重症医学科轮转实习五年制医学生64人作为研究对象。按随机数字表法将64名医学生分为PBL组(n=32)和结合教学组(n=32)。PBL组采用PBL教学,结合教学组采用医学模拟结合PBL教学。分别在入科时和轮转实习结束时对两组学员进行理论考试和技能操作考核,记录成绩并比较。理论考试和技能操作考核后采取发放问卷进行调查形式获得学员对教学效果主观评价。结果:轮转实习结束时,两组理论考试分数差异无统计学意义(P〉0.05);而结合教学组技能操作考核成分数显著高于PBL组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。两组学员在教学方法接受度高、学习兴趣提升、自学能力提升和临床诊疗水平提高所占比例差异无统计学意义(P〉O.05);结合教学组学员在团队协作能力提高、沟通能力与人文关怀提高和技能操作水平提高所占比例高于PBL组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:与单独PBL教学相比较,医学模拟教学结合PBL教学模式应用于重症医学教学对学员技能操作掌握有更好效果,同时能提高学员团队协作能力、沟通能力以及对患者的人文关怀,且受到学员认同与喜爱,应在重症医学教学实践中逐步完善并进一步推广应用。

  • 标签: 医学模拟教学 以问题为导向的教学 教学模式 重症医学
  • 简介:为了揭示河北省绿子叶黑豆种质资源遗传多样性,为其研究利用提供理论根据,以46份原产河北省绿子叶黑豆种质资源为试验材料,对其基于表型性状及ISSR标记鉴定结果进行了聚类分析,结果表明:7个ISSR引物共检测出60个等位变异,平均每个位点有8.6个等位变异,变幅为5~17个;ISSR引物多态性信息量PIC变幅为0.721~0.927,平均0.820;利用表型性状和ISSR标记数据进行品种间遗传多样性分析,遗传相似系数变化范围分别为0.07~0.53和0.43~1.00,平均为0.284和0.704,遗传相似性变幅较大,河北省不同绿子叶黑豆品种间存在着丰富遗传多样性。聚类结果显示,类群与品种来源地有关。

  • 标签: 绿子叶黑豆 种质资源 农艺性状 ISSR 遗传多样性
  • 简介:目的测定SPF级C1尼曼-匹克病小鼠(Npc1-/-小鼠)生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人研究提供理论性基础资料。方法(1)选取077日龄Npc1-/-、Npc1+/-和Npc1+/+小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;(2)Npc1-/-小鼠由Npc1+/-小鼠交配繁殖产生,统计Npc1+/-小鼠连续4代繁殖数据;(3)检测60日龄Npc1-/-和Npc1+/+小鼠血液生理生化指标。结果(1)Npc1-/-小鼠体重在7周前随着日龄增加而增加,7周后随着日龄增加而减少,直至11周左右死亡。Npc1+/+和Npc1+/-小鼠体重均随着日龄增长而逐渐增加,两者之间并没有显著差别。4周后雄性比雌性体重增加明显比雌性小鼠快;(2)Npc1+/-小鼠不同代内交配分娩间隔、窝产仔数、离乳仔数、离乳仔数中雌雄数量及阳性数量差异无显著性(P〉0.05),而第2代离乳率明显大于第1代(P〈0.05);(3)Npc1-/-和Npc1+/+小鼠血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和平均过氧化物酶指数(MPXI)差异有显著性(P〈0.05),其余差异无显著性(P〉0.05)。生化指标中尿素(UREA)差异有极显著性(P〈0.01),而天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、钾(K)和铜(Cu)等差异有显著性(P〈0.05),其余差异无显著性(P〉0.05)。结论(1)Npc1-/-、Npc1+/-和Npc1+/+小鼠生长曲线因基因和性别的不同而存在差异;(2)Npc1+/-小鼠不同代繁殖能力差异无显著性;(3)Npc1-/-和Npc1+/+小鼠部分血液生理生化指标差异有显著性。

  • 标签: C1型尼曼-匹克病 小鼠 生长曲线 繁殖 血液参数
  • 简介:与许多在细胞浆内复制RNA病毒不同,流感病毒复制及转录都在细胞核内进行。流感病毒感染细胞进入细胞浆后,经病毒脱壳将病毒核糖核蛋白体复合物(vRNP)释放到细胞浆。vRNP含有病毒RNA基因和碱性聚合酶1(PB1)、碱性聚合酶2(PB2)、酸性聚合酶(PA)及核蛋白(NP)。vRNP被主动运送到细胞核内,开始病毒基因组复制和转录。流感病毒感染细胞晚期,在细胞浆中新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白也需要进入细胞核,参与新vRNP装配。我们简要介绍有关流感病毒vRNP和新合成PB1、PB2、PA及NP蛋白进入细胞核机制。

  • 标签: 甲型流感病毒 病毒核糖核蛋白体复合物 蛋白核内运
  • 简介:目的:探讨长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)在氧化低密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,ox-LDL)诱导损伤人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)与正常HUVEC中表达谱差异。方法:采用lncRNA芯片检测ox-LDL诱导损伤HUVEC与正常HUVEC中lncRNA及mRNA表达差异,筛选出HUVEC损伤相关lncRNA。结果:相对于正常HUVEC,在ox-LDL诱导损伤HUVEC中表达上调和下调超过2倍lncRNAs和mRNAs分别有139种和113种,上调和下调超过4倍lncRNAs和mRNAs分别有35种和28种。结论:与正常HUVEC比较,ox-LDL诱导损伤HUVEC中lncRNA表达谱显著变化,lncRNA可能在血管内皮细胞损伤过程中发挥一定作用。

  • 标签: 长链非编码RNA 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 芯片
  • 简介:目的:研究WHO新标准下骨髓增生异常综合征(MDS)各型患者血浆nm23-H1蛋白水平表达,以探讨其表达水平与MDS分、发展及预后关系。方法:采用酶联免疫法(ELISA)检测86例不同病期MDS患者血浆中nm23-H1蛋白含量,同时以50例正常健康人作对照。结果:MDS患者RA、RARS及5q-综合征血浆nm23-H1蛋白水平与健康对照组相比无显著性差异(P〉0.05),RCMD、RCMD-RS、RAEB-Ⅰ、RAEB-Ⅱ及MDS-U期患者血浆nm23-H1蛋白水平明显高于健康对照组(P〈0.05)。结论:nm23-H1蛋白在MDS患者不同病期表达水平不同,其含量与MDS病程发展及转归有关,同时可以提示疾病预后。

  • 标签: 骨髓增生异常综合征 NM23-H1蛋白 分型 预后
  • 简介:对用固相扣除杂交方法从低温驯化沙冬青克隆得到AmLEA5基因进行表达模式分析和生物信息学分析,表明该基因编码一种第5族胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA),全长693bp,含有1个297bp开放阅读框,编码98个氨基酸,预测Am-LEA5分子量为10.6kDa,是一种亲水性蛋白,有多个磷酸化位点。密码子偏好性分析表明该基因略偏好于用A或T结尾密码子。系统发生分析表明,AmLEA5蛋白与蒺藜苜蓿LEA(ACJ84182.1)亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示AmLEA5表达量在低温、干旱、盐和热胁迫条件下均有上调,尤其在低温胁迫后期富集量最高。亚细胞定位表明,用YFP标记AmLEA5位于细胞质和细胞核内。一系列试验结果表明AmLEA5基因在沙冬青抵御非生物胁迫,尤其是在抵御低温胁迫机制中发挥重要作用。

  • 标签: 沙冬青 AmLEA5 生物信息学分析 表达模式 亚细胞定位
  • 简介:目的研究人类疾病模型小鼠可遗传生物学特性,建立品系标准维持方法.方法选用FVB/TgN、MRL/Mpj和SAMP1/Ka三个疾病模型小鼠品系作为代表性实验对象,通过测定生长曲线、RAPD同工、酶电泳、行为学试验等方法,找出三个品系相对于各自对照品系不同特征,并建立了标准检测指标作为维持方法依据.结果MRL/Mpj生长曲线相对于对照品系有明显统计学差异;FVB/TgN、MRL/Mpj、SAMP1/Ka等三个品系RAPD图谱在阳性引物及扩增出条带方面均不一致;同工酶电泳结果表明不同品系个体之间表型不完全相同;行为学试验更从多方面直观地显示了各品系不同特征.结论人类疾病模型小鼠除了用常规检测方法外,还应建立各品系在生长曲线、RAPD、同工酶电泳、行为学试验等方面的特殊检测方法,及时检测模型小鼠品系独特性状并作为保种依据,以避免遗传漂变发生.

  • 标签: 疾病模型 标准化 人类 同工酶电泳 生长曲线 RAPD图谱