简介:利用PCR以实验室构建的原核重组表达质粒pProEX-OCIF为模板扩增得到N末端融合有6×His标签和rTEV蛋白酶识别序列的人破骨细胞形成抑制因子(OsteoclastogenesisInhibitoryFactor,简称OCIF)结构域D1~D6(简称OCIFm)编码基因片段;将其与pMD18-T连接,转化大肠杆菌TOP10,筛选得到阳性重组质粒pMD18-OCIFm,双酶切重组克隆质粒pMD18-OCIFm得到OCIFm基因片段;将其定向插入甲醇营养型酵母分泌表达载体pPIC9中,构建获得重组表达质粒pPIC9-OCIFm.测序验证后,以限制性内切酶SalⅠ线化,电穿孔转化酵母宿主菌GS115.筛选得到阳性表达菌株后,甲醇诱导表达4d,SDS-PAGE和Westernblot对表达情况进行分析和确认.所获得的OCIFm基因片段在甲醇营养型酵母中表达量占菌体总蛋白的30%以上.利用Ni-NTA树脂对表达产物进行一步亲和层析纯化.活性测定表明纯化的表达产物可诱导体外培养的成熟破骨细胞样细胞的凋亡.表达产物的生物学活性较利用原核表达系统明显提高.
简介:摘要近些年来,随着科学技术的快速发展,电力通信无线专网建设的速度逐渐加快,在电力无线通信的发展过程之中,电力通信专网建设是整个电力无线系统建设中最为重要的一个环节。其中电力通信系统是保障电力能够正常供应和电网能够安全运行的重要载体,无线通信专网关键技术则是电力通信系统重要的建设支撑。随着现代化城市建设的发展,生产与生活都对电力有着巨大的需求,这就在一定程度上要求电力无线通信网的建设水平不断的提高,以此来满足各种各样的生产以及生活需求。本文主要对电力通信网的关键技术进行分析,介绍了几种常用的电力无线通信专网技术,并对电力无线通信网的特点和实际存在的问题进行研究。