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264 个结果
  • 简介:为通过ISSR分子标记研究桃儿七遗传多样性,建立并优化桃儿七ISSR-PCR反应体系。使用正交设计辅以单因素试验,桃儿七ISSR-PCR反应体系中5种主要因素(模板DNA,Mg-(2+),TaqDNA酶,dNTPs及ISSR引物)进行筛选优化,选取甘肃碌曲县西仓神山山顶桃儿七居群样本验证该反应体系。正交试验各因素显著性为引物〉TaqDNA酶〉DNA浓度〉dNTPs〉Mg-(2+),桃儿七ISSR-PCR反应最佳体系为(25μL):2.5mmol/LMg-(2+),0.2mol/LdNTP,0.4μmol/L引物,0.5UTaqDNA酶,40ngDNA,2.5μL10×Buffer。该体系具有高稳定性,多态性丰富特点,为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。

  • 标签: 桃儿七 ISSR-PCR 正交试验 单因素试验
  • 简介:本研究通过卷丹百合在不同浓度盐胁迫下确定了盐浓度阈值,利用同源克隆和RACE技术获得了盐阈值浓度处理下卷丹百合MAPK基因保守区(Genbank登录号:JQ437268),并其进行生物信息学分析。同时利用了DNAman软件和Blastn序列比对在基因和蛋白角度分析了MAPK基因在盐阈值浓度处理下表达情况。分析表明,卷丹百合盐阈值浓度为1.09mg/mL,MAPK基因保守区长627bp,推测编码209个氨基酸,有1个高度保守区域(TRWYRAPE)存在于MAPK氨基酸序列中,通过NCBI上BLAST比对分析,发现这段保守区序列为促分裂原活化蛋白激酶超家族催化活性区。

  • 标签: 卷丹百合 促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) 盐胁迫 阈值浓度 同源性
  • 简介:稻瘟病菌基因组测序完成有助于全新效应蛋白挖掘和功能鉴定,而未知功能蛋白生物信息学预测为这些蛋白生物学功能鉴定提供了重要理论参考。本研究利用生物信息学分析蛋白理化性质分析及其二级结构等进行预测,并构建这四个基因与绿色荧光蛋白(GFP)融合过表达载体。从稻瘟病数据库中下载MoS4、MoS74、MoS997、MoS1460基因序列,通过分析得到MoS4、MoS74、MoS997和MoS1460基因ORF分别为281bp、251bp、267bp和240bp;预测MoS997蛋白属于稳定性较好亲水蛋白,MoS4、MoS74属于不稳定疏水蛋白,且MoS74还是一个跨膜蛋白,而MoS1460蛋白则属于不稳定亲水性蛋白,并且获得了四个基因与绿色荧光蛋白(GFP)融合过表达载体,并经过测序验证。研究结果为进一步探究稻瘟病菌效应蛋白基因功能及亚细胞定位等提供科学依据。

  • 标签: 稻瘟病 效应蛋白 过表达载体
  • 简介:本研究构建了含有耐草甘膦基因G2-epsps和R79-epsps双价植物表达载体pCMG2R79-EPSPS,以优良玉米自交系78599和综31幼胚为受体材料,采用农杆菌介导法将耐草甘膦双价基因G2R79-epsps转入玉米幼胚细胞,以期获得耐草甘膦性更高转基因玉米植株。目前已获得转基因再生玉米植株32株,经特异PCR检测表明其中7株植株转入了目标基因,阳性率达到21.9%。得到阳性植株T1、T2代进行了跟踪检测,经田间喷施除草剂试验结果表明,获得了可耐草甘膦6%0玉米材料,即生产上草甘膦田间使用浓度3倍水平材料,为抗除草剂玉米新品种选育提供了较好基础材料。

  • 标签: 玉米幼胚 双价基因G2R79-epsps 遗传转化 草甘膦抗性 农杆菌介导
  • 简介:大豆是主要油料作物,起源于中国,在我国种质资源十分丰富。大豆孢囊线虫(SCN)(HeteroderoglycinesIchinohe)是一种土传定居性内寄生线虫,不易防治,常引起大豆黄萎病等病害,是大豆生产上危害最大病害之一。大豆孢囊线虫病生理小种多达十几种,在我国,大豆孢囊线虫病病原主要为3、4号生理小种。大豆抗孢囊线虫研究一直是世界上大豆抗病育种研究热点之一。在本课题前期研究中,根据已克隆植物抗孢囊线虫病基因保守序列设计引物,经常规鉴定为抗(感)孢囊线虫3号生理小种15个大豆品种基因组DNA进行PCR扩增,在大豆抗病品种中获得一条大豆抗孢囊线虫特异条带。本研究在此基础上利用该引物,高抗孢囊线虫3号小种北京小黑豆基因组DNA进行扩增,并克隆了特异扩增片段,命名为RSCN3,经测序及BLAST分析,发现其DNA序列与GenBank、EMBL、DDBJ、PDB中大豆似受体激酶RHG4、水稻TMK(leucinerichprotein,receptor-likekinase)基因等均有80%以上同源性。根据该DNA序列推测其氨基酸序列,在其序列中共找到21个亮氨酸,将该序列与蛋白质序列同源性进行比较,结果发现与植物中受体激酶、富含亮氨酸重复蛋白激酶有较高同源性。因此推测RSCN3克隆片断为一个与受体激酶有类似作用抗病相关基因RGA,并将该序列登录到GenBank中,登录号为:AY580161。

  • 标签: 大豆 孢囊线虫 抗病基因同源序列 基因克隆
  • 简介:为了明确黑龙江主栽水稻品种及骨干育种亲本中抗稻瘟病基因分布情况和利用价值,本研究102份水稻资源中抗稻瘟病基因Pid2、Pid3、Pi9、Pi2/Pizt、Pita、Pi5及Pib进行了分子检测,并他们分布情况和抗病效应进行相关性分析。结果表明:在102份水稻资源中,Pita和Pi5检出率相对较高,为31.37%和29.41%,其次是Pib、Pi2/Pizt、Pid2和Pid3,检出率分别为18.62%、9.8%、1.96%和1.96%;本研究中没有检测到Pi9。同时,我们发现多基因聚合品种较携带单基因或不含抗病基因品种抗性强;其中龙粳41携带抗稻瘟病基因最多(4个),表现为抗病。在被检测基因中,Pi2/Pizt、Pita和Pi5黑龙江水稻稻瘟病抗性贡献都较大,但当Pita和Pi5聚合时黑龙江省水稻抗瘟性改良最大。本研究为黑龙江省水稻抗稻瘟病基因聚合育种以及抗瘟基因合理利用提供了科学依据。

  • 标签: 黑龙江 水稻资源 抗稻瘟病基因 分子检测
  • 简介:作为植物特有的转录因子家族,TCP基因处于植物多种信号传导途径中心节点位置。蒺藜苜蓿全基因组进行检索,共获得21个TCP基因序列。蒺藜苜蓿TCP成员间在蛋白质大小、等电点等方面具有明显差异。蒺藜苜蓿TCP基因进行基因结构、染色体定位和系统进化分析,发现蒺藜苜蓿TCP基因结构较为简单,一般不含有内含子,仅一个外显子。21个基因中仅有5个基因有内含子。系统进化关系上其中4个基因亲缘关系非常近。这4个基因位于1号、4号、7号染色体上TCP基因聚集存在位置。蒺藜苜蓿TCP基因在各个器官间特异性表达。TCP基因参与蒺藜苜蓿根瘤发育过程,也响应外界盐胁迫和病菌侵染刺激。本研究发现蒺藜苜蓿TCP基因家族信息,可为蒺藜苜蓿乃至豆科植物育种提供有价值信息。

  • 标签: 蒺藜苜蓿 TCPs基因家族 进化 表达模式
  • 简介:本研究利用4种父本育性较强二倍体香蕉(Musaspp.)种质,比较不同染色法和离体萌发法检测香蕉花粉活力效果,以期筛选适合香蕉花粉活力快速检测方法。结果显示:醋酸洋红和I-KI染色法处理后香蕉花粉形态较模糊,而TTC法与MTT法染色效果较好,花粉形态较清晰,容易区分染色与未染色花粉;适合香蕉花粉离体萌发培养基中,蔗糖浓度为15%,pH值为5.8;MTT染色法结果与离体萌发法结果相关性最好,说明MTT染色法结果较其他染色法准确、可靠。利用MTT染色法,本研究比较了17份二倍体香蕉种质花粉活力,结果显示:‘Calcutta4’(M.acuminatassp.burmannicoides(AA))、BGY3(M.balbisiana(BB))、Malaccensis(M.acuminatassp.malaccensis(AA))、Balbisiana(M.balbisiana(BB))等4份野生类型种质,以及双单倍体种质‘CIRAD930’(M.acuminatassp.malaccensisvar.DHPahang(AA))染色率超过50%,而3份改良二倍体种质和4份栽培类型种质染色率低于30%。

  • 标签: 二倍体香蕉 花粉生活力 测定方法 MTT染色法
  • 简介:为了建立一套适合于葫草种子破眠蛋白质双向电泳技术体系,以内蒙古民族大学农学院选育“通选一号”藕草种子为试验材料,其蛋白质提取方法、分离技术等进行了探讨。结果表明:采用三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA/A法)提取种子蛋白,结合使用pH4-pH718cmIPG胶条,200μg上样量,12%SDS—PAGE胶,硝酸银法染色,可得到清晰、丰富蛋白质点。

  • 标签: 虉草 种子破眠蛋白质 双向电泳
  • 简介:偏分离是一种广泛存在于生物中遗传学现象,被认为是一种强有力进化动力。本文从生殖隔离因子、细胞质效应以及环境因素三个方面分析了雄配子体选择可能导致遗传偏分离效应。研究证明,位于细胞核基因组上生殖隔离因子如配子体基因、不育基因等遗传因素导致雄配子体选择是引起遗传偏分离主要原因;而细胞质核互作导致雄性不育产生雄配子选择同样可导致核基因发生遗传偏分离;非遗传因素如环境温度等引起雄配子选择也会导致遗传偏分离现象。

  • 标签: 偏分离 配子体选择 生殖隔离 细胞质效应 环境因素
  • 简介:水稻粒形相关基因,对于调控作物产量和品质都具有十分重要作用,但关于其进化缺少一个系统、全基因组尺度比较基因组学分析。研究以已鉴定水稻粒形相关基因为目标序列,在8个禾本科植物中进行比较基因组学分析,旨在全基因组范围揭示不同粒形基因在多个禾本科作物种系中进化规律。基于同源比对分析发现,不同基因组中粒形相关基因数量不具有明显差异,平均每个基因组中粒长和粒宽相关基因分别有364和75,其中较多是谷子,有423粒长、71粒宽调控基因。基因组同源共线分析,发现全基因组加倍和串联重复对于家族基因拷贝数增加具有重要贡献,但是重复基因丢失可能维持了基因数量稳定。通过粒形基因中旁系同源基因同义核苷酸置换率(Ks)比较,揭示不同粒形基因具有不同进化速率,进化最快是粒长调控相关基因An-1。本研究为认识水稻粒形调控相关基因进化提供了重要理论基础,对于禾本科粒形相关基因从全局尺度到单基因进化具有极为重要意义。

  • 标签: 水稻 粒形 全基因组加倍 基因丢失 同义置换率(Ks)
  • 简介:SUPL(SUPERMAN-like)是一类单C2H2型锌指蛋白,SUPL基因在植物生长发育过程中起着重要调控作用。利用生物信息学分析方法,我们从水稻中找到了一个SUPL基因ZOS11-11,它位于水稻第11号染色体上,编码245个氨基酸。序列分析结果表明,ZOS11-11具有与其它SUPL蛋白相同功能结构域,包括N端高度保守"QALGGH"序列、核定位信号序列以及C端具有转录调节功能EAR结构域。定量PCR与GUS表达分析表明,ZOS11-11几乎在水稻所有的组织、器官中都有表达,其中在根、茎、叶和雌雄蕊分化阶段幼穗中表达较强,而在其它发育阶段穗中表达相对较弱,表明ZOS11-11可能参与了水稻生长发育调控。但是,增加ZOS11-11表达量并没有明显影响水稻生长发育。这些结果为ZOS11-11基因功能深入研究奠定了基础。

  • 标签: 水稻(Oryza SativaL.) ZOS11-11 锌指基因 表达 功能
  • 简介:芒果炭疽病、蒂腐病和疮痂病是芒果种质重要病害,给中国各芒果产区造成严重危害,而抗病品种选育是防治芒果病害最经济有效途径。为评价新引进芒果种质对炭疽病、蒂腐病、疮痂病抗性水平,采用田间抗病性鉴定方法56份芒果种质果实3种病害进行抗性评价。结果表明,56份种质资源中,高抗炭疽病种质5份、中抗炭疽病19份、高感炭疽病4份,高抗蒂腐病16份、中抗蒂腐病26份、高感蒂腐病1份,高抗疮痂病1份、中抗疮痂病17份、高感疮痂病4份,3种病害均有抗性种质资源7份。本研究结果初步揭示新引进一些种质资源芒果炭疽病、蒂腐病、疮痂病抗性情况,为进一步地依托供试种质开展抗病性育种提供参考。

  • 标签: 芒果种质资源 芒果病害 抗病性
  • 简介:筛选与小麦重要农艺性状相关联SSR标记,小麦分子标记辅助育种有重要实践意义。本研究利用多态性较高80个SSR标记,南大2419及其71份衍生后代品种(系)进行基因型分析,采用TASSEL软件MLM(Mixedlinearmodel)方法籽粒产量、千粒重、有效穗、穗粒数等8个主要农艺性状进行SSR标记与性状关联分析。结果表明:(1)该群体由6个亚群组成;(2)群体SSR数据分析发现,无论是连锁还是非连锁SSR位点组合都存在不同程度连锁不平衡(Linkagedisequilibrium,LD);在各基因组选择标记数基本相同情况下,D基因组中显著LD位点比例(8.9%)明显低于A基因组(15.3%)和B基因组(13.8%),但D基因组LD水平较高;(3)群体中共20个SSR位点与8个农艺性状显著关联,4个位点2年被检测到与同一性状显著相关(p〈0.01),10个位点位于家系连锁定位QTL区间或附近,多数位点/性状关联结果与前人研究一致;13个标记位点同时与2个或多个性状关联。

  • 标签: 南大2419 SSR 群体结构 连锁不平衡 关联分析
  • 简介:番茄(Solanumlycopersicum)果实心室数是影响果实大小形状和畸形果发生率重要因素。遗传特性是番茄果实心室数重要调控因素。研究表明,番茄中调控心室形成2个重要基因分别为位于第11条染色体fasciated位点和位于第2条染色体lc位点,两个位点心室形成作用值分别为37%和12%,同时这两个位点相互之间具有上位性作用。近年来研究者相继fasciated和lc位点进行了精细定位,发现fas基因(YABBY转录因子)和WUSCHEL基因下游2个SNP调控番茄心室数。本文综述了近年来番茄心室形成相关研究进展,着重介绍分子遗传水平方面的进展,为探究番茄心室形成分子机理提供重要信息。

  • 标签: 番茄 心室 fasciated位点 lc位点
  • 简介:本研究采用超声波辅助提取石榴皮多糖,响应面法优化了超声波辅助提取石榴皮多糖最佳工艺条件。Box-Behnken设计用于评估四个独立变量(液料比,提取时间,提取温度,超声功率)石榴皮多糖产量影响。研究表明,液料比为23mL/g,提取时间62min,提取温度57℃,超声功率为145W,是石榴皮多糖最佳提取条件。在最适条件下,石榴皮多糖产量为(13.64±0.21)%,预测收益率为13.81%。

  • 标签: 石榴皮多糖 超声波辅助提取 响应面法 Box—Behnken设计
  • 简介:甘蔗是重要糖料作物,也是重要能源作物。由于复杂遗传背景、较低可育性和缺乏优异种质资源等因素给甘蔗品种改良带来了很大困难,通过转基因技术为甘蔗品种改良提供了有效途径。而转基因植物遗传稳定性是植物转基因育种过程中一项重要研究课题。本研究通过一次多基因遗传转化,同时将四个目的基因导入甘蔗品种新台糖22号中。通过PCR检测,对转基因甘蔗T_0、T_1和T_2代遗传稳定性进行分析;通过外源蛋白快速试纸条检测,对转基因植株四个外源基因中基因(bar抗除草剂基因和cry1Ab抗虫基因)蛋白表达进行检测。证明一次四基因遗传转化甘蔗转基因株系,在T_0代出现了部分基因丢失现象,且T_0代甘蔗主茎和分蘖可能为不同转基因事件。但如果是四个基因均能完整整合到基因组中株系,则四个基因可以在T_0、T_1和T_2代中得到稳定遗传,也可以稳定检测得到外源基因蛋白表达。

  • 标签: 甘蔗转基因 遗传稳定性 基因遗失 试纸条检测
  • 简介:稻米蛋白质含量是水稻(OryzasativaL.)营养品质育种重要内容之一。本研究以珍汕97与南洋占杂交构建重组自交系(RIL)群体为材料,结合其建立了由190个SSR标记组成遗传图谱,利用QTLmap-per1.6糙米和精米中蛋白质含量遗传基础进行了分析,共定位到4个控制糙米含量QTLs和2个控制精米含量QTLs。其中,控制精米蛋白质含量2个QTLs与控制糙米蛋白质含量2个QTLs位置一致,这2个QTL(qpc1和qpc2)在糙米和精米蛋白质含量中均解释了较大表型变异,而且糙米和精米蛋白质含量相关系数为0.814,这表明糙米和精米蛋白质含量具有相似的遗传基础。研究还发现上位性在糙米和精米蛋白质含量遗传中也起很重要作用。其中,在糙米蛋白质含量中,上位性QTLs可以解释42.2%表型变异;在精米蛋白质含量中,上位性QTLs共解释了27.8%表型变异。本研究初步揭示了稻米蛋白质含量遗传基础,为分子标记辅助选择改良稻米品质及蛋白质含量基因克隆提供了有益信息。

  • 标签: 水稻 蛋白质含量 分子标记辅助选择 数量性状位点(quantitative TRAIT locus)
  • 简介:本文以同时携带脚基因(无花粉型雄性不育)和wx(糯性)基因wxB^ms系及cms、ms和wx基因wxA^ms为材料,观察ms、cms及wx遗传关系并ms基因进行染色体定位。研究结果如下:遗传分析表明,无花粉型雄性不育受一隐性核基因控制;糯性基因wx与ms表现独立遗传,非糯性突变导致ms后代育性异常分离,故只要去除保持系中带有ms突变基因植株,便可实现不育系cms-龙特浦wxA保纯繁殖;本试验中出现cms-龙特浦wxA^ms/龙特浦wxBF1代育性恢复现象解释为:ms基因上位cms,ms雄性遗传表达早于cms,cms雄性不育发育表达因滞后而被掩盖;采用SSR分子标记技术,将ms基因定位在第1条染色体上SSR标记RM579和RM23,为克隆该基因进行雄性不育机理研究奠定基础。

  • 标签: 水稻 雄性核不育基因 遗传分析 分子标记
  • 简介:微卫星标记(SSR)在近缘物种间具有通用性,因其高效率、低成本可广泛用于跨物种间遗传多样性分析、基因定位和图谱构建等。本试验基于甜瓜基因组测序结果开发了120SSR标记,研究其在8种葫芦科作物间通用性及作物内多态性,并利用NTSYS软件分析37份不同瓜类作物材料间遗传多样性。结果显示,114标记均在甜瓜基因组中得到有效扩增,黄瓜中有108标记有效扩增,通用性比率为94.7%,南瓜中能有效扩增标记最少,其通用性比率也达到了41.2%,在8种葫芦科作物间均通用标记有29;通过通用性标记多态性分析表明,甜瓜多态性比率最高为61.4%,西瓜、黄瓜、苦瓜、冬瓜、西葫芦、南瓜和丝瓜多态性比率分别为32.5%、14%、4.4%、8.8%、3.5%、13.2%和11.4%;不同作物间平均遗传相似系数在0.70~0.83之间,其中甜瓜和黄瓜平均遗传相似系数较小,亲缘关系较近,西葫芦和南瓜间平均遗传相似系数最小,亲缘关系最近。这些通用性标记将有利于提高葫芦科作物整体分子生物学研究水平。

  • 标签: 甜瓜 葫芦科 SSR 通用性 遗传多样性