简介：β-胡萝卜素-15,15＇-加氧酶（β-carotene-15,15＇-momoxygenase1,bco1）是β-胡萝卜素转化成维生素A过程中的关键酶,bco1与bco1l是编码此酶的主要基因。本实验利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼的与β-胡萝卜素-15,15＇-加氧酶编码相关的基因bco1与bco1l,以便深入开展对斑马鱼bco1的功能研究。分别在斑马鱼bco1与bco1l基因2号外显子选取sgRNA识别位点,体外转录制备sgRNA并与Cas9mRNA混合对斑马鱼Ⅰ细胞期受精卵进行显微注射,24h后收集部分胚胎进行PCR检测并将PCR产物进行单克隆测序确定sgRNA的有效性,构建首建鱼,并在此基础上通过PCR检测、凝胶电泳及测序筛选可遗传突变体。本研究分别获得了bco1基因突变与bco1l基因突变,分析表明这些缺失和插入均可导致编码序列的移码,为研究鱼类胡萝卜素代谢及相关发育过程等后续研究提供了材料。

简介：实验测定了9种硫代磷酸酯类化合物（倍硫磷、氨磺磷、氯硫磷、杀螟松、碘硫磷、皮蝇硫磷、异氯磷、甲基对硫磷、乙基溴硫磷）对斑马鱼（Brachydaniorerio）的急性毒性96h-LC50值，分别为0．95、4．52、1．95、3．03、0．85、0．56、3．44、3．44和0．82mg·L^-1，其中倍硫磷、碘硫磷、皮蝇硫磷和乙基溴硫磷属于剧毒，其他5种（氨磺磷、氯硫磷、杀螟松、异氯磷和甲基对硫磷）属于高毒．以分子电性距离矢量（MEDV-13）有效表征硫代磷酸酯类化合物的分子结构，应用基于预测的变量选择与模型化（VSMP）方法建立急性毒性（-lgLC50）与分子结构（MEDV-13）的定量相关模型，模型的估计相关系数为0．9922，LOO检验相关系数为0．9796，表明模型具有良好的估计能力与稳健性．影响急性毒性的主要结构因素是由2个MEDV描述子表达的3个子结构碎片，即-CH3、-cCc和≥N=.其中子结构-CH3、-cCc与硫代磷酸酯类化合物母体骨架密切相关，而≥N=则反映取代基的变化．

简介：根据Ensembl、Genbank登录的鱼类cat、gapdh和gst基因的CDS序列设计普通PCR扩增引物,寻找食蚊鱼的cat、gapdh和gst基因的cDNA片段,并根据定量引物设计要求设计出相应的SYBRGreenI荧光定量RT-qPCR引物,建立了食蚊鱼cat、gapdh和gst基因的SYBRGreenI荧光定量RT-qPCR方法。该方法在104~108数量级范围内有良好线性关系（R=0.999~1.000）;熔解曲线显示扩增产物特异性良好,均为单一峰值;质粒标准品最高浓度与最低浓度的批内试验变异系数与批间试验变异系数均低于2%。利用该方法监测和评价环境污染物对水生生物的影响,选择了水体中常见典型药物污染物——双氯芬酸,研究其对食蚊鱼抗氧化基因表达的影响。结果表明,雌性食蚊鱼暴露在不同浓度双氯芬酸钠（0.005、0.05、0.5和5mg·L-1）24h后,其肝脏cat、gapdh和gst的mRNA呈现显著变化,相对于对照组,在低浓度0.005mg·L-1时,cat与gstmRNA的表达量均有极显著上升（p〈0.01）,而其它浓度均极显著下降（p〈0.01）。试验表明该方法具有快速、精确、灵敏度高的优点,可为利用该类小型鱼类的原位污染物的生物监测和生态毒理评价提供有力的技术支持。

简介：为了研究邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对水生生物的毒性效应，将斑马鱼（Brachydaniorerio）暴露于DBP5个浓度组中96h急性染毒，测得其半致死浓度（96h—LC50）为8．51mg·L^-1，从而得出其安全浓度为0．85mg·L^-1．在此基础上，等对数浓度差设置4个质量浓度0．38、0．85、1．90、4．25mg·L^-1进行20d慢性染毒，期间每5d测定斑马鱼的体重、肝重和鳃重，同时测定斑马鱼肝脏、鳃中SOD酶和ATPase活性．结果表明，斑马鱼比肝重总体随DBP浓度的增加和暴露时间的延长而升高（P〈0．01），而比鳃重总体变化不大．随DBP浓度增大和暴露时间延长，斑马鱼肝脏、鳃中SOD酶和ATPase活性均显著受到抑制（P〈0．01）．

简介：为评价新型杀菌剂氟吡菌胺对环境生物的毒性风险,避免其在使用过程中对我国特有的环境生物产生危害,测定了氟吡菌胺对意大利蜜蜂、日本鹌鹑、斑马鱼、家蚕、斜生栅藻、大型溞、玉米螟赤眼蜂、赤子爱胜蚓和黑斑蛙蝌蚪等9种代表性环境生物的急性毒性,并以斑马鱼为试材,研究了氟吡菌胺的生物富集性,即根据鱼类急性毒性结果LC50（96h）=1.489mg·L^-1,设计生物富集试验水样浓度为LC50的1/2、1/10和1/100,即0.745mg·L^-1、0.149mg·L^-1和0.0149mg·L^-1,连续暴露8d,采用液相色谱法测定3个浓度下氟吡菌胺在斑马鱼体内的富集量。结果表明,氟吡菌胺对斑马鱼、斜生栅藻和大型溞3种水生生物的急性毒性为中毒级,对黑斑蛙蝌蚪急性毒性为高毒级,其对蜜蜂、鸟类、家蚕、蚯蚓和天敌赤眼蜂等环境生物均为低毒或低风险;斑马鱼在0.745、0.149和0.0149mg·L^-1的氟吡菌胺水溶液中暴露192h时,生物富集系数BCF分别为33.65、26.39和193.25;根据化学农药环境安全评价试验准则评价标准,10〈BCF≤1000，氟吡菌胺属于中等富集性农药。