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  • 简介:摘要目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv1705c蛋白相互作用蛋白质。方法原核表达Rv1705c蛋白基因,收集包涵体,裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度,ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量,使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™,筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质,使用GenePix Pro 6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取,使用GO、KEGG等多个数据库进行生物信息学分析,GST pulldown验证Rv1705c与PSMA3、RSAD2的相互作用。结果纯化结果显示,Rv1705c在包涵体中表达,Rv1705c刺激巨噬细胞后IFN-γ分泌量显著上升。芯片结果显示共筛选出了29个与Rv1705c相互作用的潜在阳性蛋白质,其中PSMA3、NLN、THOP1、UPF3A、RSAD2、OMG、PNKD、STEAP3、MED8共9个蛋白质的信噪比(signal-to-noise ratio,SNR)>1.6。进一步的生物信息学分析发现候选蛋白PSMA3、RSAD2、C1QBP参与固有免疫应答激活信号转导,并且PSMA3、RSAD2与干扰素存在交互作用,GST pulldown验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c确有相互作用。结论发现并验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c存在相互作用,为Mtb感染机制的研究提供参考。

  • 标签: 人蛋白质组芯片 Rv1705c 生物信息学 结核病
  • 简介:本文介绍了一种以硅胶为基质,修饰多功能氨基官能团的疏水相互作用色谱固定相。由于同时具有疏水和亲水配基,这种固定相在水相中的稳定性得到了改善。这种修饰还能改善蛋白/多肽分离的分辨率和柱效,同时延长色谱柱的使用寿命。

  • 标签: 疏水相互作用 蛋白质组学 高稳定性 色谱柱 分离 色谱固定相
  • 作者: 葛洪 袁强 王秋云 仲伟静 张爱国 李怡良 王志文
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-08-10
  • 出处:《中国综合临床》 2020年第04期
  • 机构:华北理工大学附属医院药学部,河北省唐山市 063000,华北理工大学附属医院特检特治科,河北省唐山市 063000,河北省迁安市中医医院中西结合科,河北省唐山市 063000,华北理工大学中医学院,河北省唐山市 063000,华北理工大学附属医院中西医结合科,河北省唐山市 063000
  • 简介:摘要目的观察麝香乌龙丸对膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者血清中白细胞介素1(interleukin-1, IL-1)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、基质金属蛋白3(matrix metalloproteinase3,MMP3)、基质金属蛋白抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinase1,TIMP-1)表达的影响。方法采用前瞻性队列研究方法,观察对象来自于2016年3月至2018年6月华北理工大学附属医院风湿免疫科门诊的KOA患者,应用随机数字表分为两组,即治疗组(麝香乌龙丸治疗)46例和对照组(抗骨增生片治疗)46例。治疗组采用麝香乌龙丸治疗,每次30粒,2次/d;对照组采用抗骨增生片治疗,每次4片,2次/d。治疗周期均为8周。取治疗组和对照组患者血清,采用酶联免疫吸附试验法检测血清中IL-1、TGF-β1 、MMP3、TIMP-1的含量,并统计分析两组治疗后相关指标的差异。结果治疗组完成46例,对照组完成44例。治疗后,IL-1水平分别为治疗组(30.99±2.80) μg/L、对照组(32.90±2.84) μg/L,两组间比较差异有统计学意义(t=3.21,P<0.001);TGF-β1水平分别为治疗组(214.87±17.30) μg/L 、对照组(208.85±15.53) μg/L ,两组间比较差异无统计学意义(t=1.73,P=0.08);TIMP-1水平治疗组(139.60±6.79) μg/L 、对照组(135.09±6.16) μg/L ,两组间比较差异有统计学意义(t=3.29,P<0.001);MMP3水平治疗组(1.19±0.10) μg/L、对照组(1.23±0.06) μg/L ,两组间比较差异有统计学意义(t=2.28,P=0.03);TIMP1/MMP3比值治疗组111.04±8.81、对照组118.46±12.06,差异有统计学意义(t=3.34,P<0.001)。结论麝香乌龙丸可以降低IL-1 、MMP3水平;升高TGF-β1 、TIMP-1和TIMP1/MMP3比值的表达水平,从而起到保护关节软骨、改善KOA患者膝关节功能的作用

  • 标签: 膝骨关节炎 麝香乌龙丸 白细胞介素1 转化生长因子β1 基质金属蛋白酶3 基质金属蛋白酶抑制剂1
  • 简介:UHT灭菌牛乳是指采用超高温灭菌(137~150℃保持4~20s)和无菌灌装的工艺过程加工而成的牛乳制品。UHT乳以其高品质,饮用方便,长保鲜期以及可远距离销售等特点。然而,UHT乳在贮存过程中常会出现一些质量问题影响到产品品质。胶凝现象就是一个限制UHT灭菌乳货架期,阻碍其商业化发展的主要问题。胶凝是以贮存过程中产品的流动性损失为特征的。在贮存过程中UHT灭菌乳发生黏度变化,通常起始阶段产品变薄,接

  • 标签: UHT乳 胶凝 灭菌乳 贮存过程 超高温灭菌 蛋白酶
  • 简介:摘要诊断牙周疾病的传统方法,包括临床指标的检查和生化指标的检测。生化指标可以弥补临床指标检查的低敏感性。检测龈沟液中的弹性蛋白,可以早期发现并诊断牙周炎。本文综述了龈沟液中的弹性蛋白与牙周炎的诊断。

  • 标签: 牙周炎 龈沟液 弹性蛋白酶
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  • 简介:恶性肿瘤的侵袭和转移的分子调控机制是目前肿瘤分子生物学研究的热点课题,众多研究表明,肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导产生基质金属蛋白的能力密切相关。基质金属蛋白(MMPs)是一个由多个成员组成的蛋白水解家族,是丝氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、天门冬氨酸蛋白和基质金属蛋白4类蛋白水解中较为重要的一类,它们几乎能降解细胞外基质的所有成分。

  • 标签: 基质金属蛋白酶 肿瘤侵袭转移 蛋白水解酶 肿瘤分子生物学 天门冬氨酸 细胞外基质
  • 简介:摘要产IgA蛋白的细菌在危及生命的感染中占有很大比例,IgA蛋白可以裂解IgA,并使细菌免受各种免疫球蛋白的攻击,在感染中具有多种作用。IgA的糖基化异常影响其对IgA蛋白的敏感性,因此在最常见的肾小球肾炎IgAN中,IgA的糖基化异常可能为导致IgA升高的原因之一。本文就各种细菌产生的IgA蛋白的基因结构,性质及应用作一综述。

  • 标签: IgA蛋白酶 细菌 IgAN
  • 简介:泛素蛋白体水解途径是蛋白质的选择性降解中一种非常重要的机制,它通过选择性地降解蛋白质控制着体内许多重要的生物学过程。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素蛋白体途径与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生命周期。同时,病毒的某些蛋白也会影响泛素蛋白体途径,以逃避宿主的防御机制。

  • 标签: 泛素 蛋白酶体 干扰素 NF-κB
  • 简介:摘要目的观察注射用丹参粉针伍注射用糜蛋白粉针对产科会阴侧切口感染时的治疗效果。选择产科会阴侧切切口感染患者23例为实验组,以丹参粉针伍糜蛋白局部治疗,治疗时间4~7日。对照组13例常规处置换药、抗生素冲洗治疗,治疗时间10~25日。实验组明显低于对照组(P<0.01)。结论丹参伍糜蛋白能明显缩短产科会阴侧切口感染治疗时间。

  • 标签: 丹参 糜蛋白酶 会阴侧切口感染
  • 简介:目的通过测定转基因食品的胰蛋白抑制剂活性,为建立转基因食品营养评价标准提供数据。方法首先通过探讨胰蛋白-底物-胰蛋白抑制剂的剂量反应关系,建立转基因食品胰蛋白抑制荆活性测定的最佳反应体系,并以此为基础分析了部分转基因玉米、大豆的胰蛋白抑制剂活性及与亲本食品的差别。结果所检转基因食品胰蛋白抑制剂活性大多与亲本食品差别不大,尽管个别产品出现胰蛋白抑制剂活性增高或降低现象,但都在可接受范围。结论在规范检测技术前提下加强对非转基因食品基础数据建设对制定转基因食品营养评价标准十分必要。

  • 标签: 转基因 食品 基因修饰 胰蛋白酶抑制剂 营养评价
  • 简介:利用反相高效液相色谱法对玉米黄粉蛋白解产物的氨基酸组成进行了测定,发现解产物中含有大量的Phe(Phenylalanine,苯丙氨酸),Leu(Leucine,亮氨酸)等必需氨基酸和Pro(Proline,脯氨酸),他们可以添加到食品中来补充必需的氨基酸和降低高血压患者的血压,对综合开发利用这一丰富的农副产品具有重要的意义.

  • 标签: 玉米黄粉蛋白 氨基酸 高效液相色谱
  • 简介:摘要:严重急性呼吸系统综合征(SARS)的流行表明,人畜共患病向人类和动物冠状病毒(COV)的传播对公众健康构成严重威胁,因此有必要制定防治对策。由于缺乏对SARS-CoV-2引起的COVID-19的有效治疗,为了开发更有效的抑制剂,我们发现非共价片段X1249的设计提供了进一步的有益信息。

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  • 简介:主要研究不同水解度对大豆分离蛋白解产物理化性质的影响。结果表明:随着水解度的提高,大豆分离蛋白的相对分子量逐渐减小,其平均粒径、黏度、持水性分别由89.3gm、540mPa·S、699.3%降低至10.2μm、3.07mPa·S、231.1%;而溶解性和持油性显著提高,分别由32.55%、112.7%增加至67.85%、174.7%;乳化性则呈现先增加后减少的趋势,在水解度2%时乳化性达到最高为0.462,乳化稳定性无显著变化;起泡性显著增加,在水解度2%时达到最大为107.3%。大豆分离蛋白解产物具有与原大豆分离蛋白显著不同的理化性质,为其作为新型食品添加剂提供了可能,拓宽了其在食品工业中的应用。

  • 标签: 大豆分离蛋白 酶解 理化性质 碱性蛋白酶
  • 简介:目的:探索果蝇脑神经元胰蛋白急性分离的新方法.方法:解剖果蝇晚三龄幼虫脑组织,用胰蛋白化学消化并辅以机械微振荡法分离制备单个细胞,用果蝇细胞培养液适当孵育.在倒置相差显微镜下对其进行形态学观察和分类,结合全细胞膜片钳技术对其电生理学特性进行初步研究.结果:该方法成功制备出三类大小和形态各异、活性较好的果蝇脑神经元,未见神经胶质细胞;以三型细胞为电生理学研究对象,记录到五种类型的全细胞外向钾电流.结论:我们建立的果蝇晚三龄幼虫脑细胞急性分离方法简便易行,稳定可靠.

  • 标签: 果蝇 神经元 急性分离 膜片钳
  • 简介:摘要:近年来,我国的工业化进程有了很大进展,角蛋白是一类能水解难溶性角蛋白废物的广谱蛋白,在饲料、肥料、医疗、制革和洗涤剂等领域具有良好应用前景。但目前已报道的天然角蛋白存在产量低、活性低和稳定性差的问题,限制了角蛋白的应用。本文首先分析角蛋白基本性质,其次探讨角蛋白的分类,最后就角蛋白的理化性质进行研究,这为进一步研究角蛋白的降解机制及其推广应用提供了重要基础。

  • 标签: 微生物角蛋白酶 降解 应用