简介：摘要目的探讨流式探针法在分析、分选丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)特异性B细胞以及全人源单克隆抗体发现中的作用。方法采用伯胺标记法制备HCV特异性探针；使用流式细胞术检测和分选HCV特异B细胞，并体外通过单个B细胞抗体克隆技术从分选的HCV特异性B细胞中克隆表达抗体；应用ELISA技术和假病毒中和试验检测抗体的结合活性以及中和活性。结果探针法能有效地检测HCV特异的记忆性B细胞，HCV患者探针阳性细胞频率明显高于正常人(U＝0.0004, P <0.0001)。通过单细胞分选HCV特异的记忆性B细胞，体外克隆表达获得6个单克隆抗体，其中有5个与HCV膜蛋白具有结合活性，2个显示具有较强中和活性。结论伯氨标记法制备HCV特异性探针是一种简单高效的探针制备方法，结合流式细胞术可用于HCV特异B细胞的检测以及分选。

简介：摘要以葫芦脲为主体的超分子化学近年来得到了快速发展,目前已成为超分子化学中最为活跃的研究领域之一,许多无荧光或弱荧光物种采用传统的荧光分析方法无法实现荧光测定,因此使之在药代动力学监测和痕量测定方面变得十分困难.近年来,通过建立的新型荧光探针体系葫芦脲－异喹啉类药物使许多无荧光的药物建立了高灵敏度的分析方法.本论文旨在借助这一新型荧光探针体系,采用荧光光谱法、核磁共振波谱法、密度泛函理论等手段从实验和理论两个方面研究了盐酸克伦特罗与葫芦脲主－客体之间的相互作用,确立了这一探针体系与目标分析物的作用机理,建立了无荧光的盐酸克伦特罗的荧光探针新方法.关键词葫芦７脲,克伦特罗,荧光滴定法,荧光探针AbstractInrecentyears,withtherapiddevelopmentofthesupramolecularchemistryofthemainbodyoftheurea,themostactiveresearchfieldsofthesupramolecularchemistryhavebecomeoneofthemostactiveresearchfields．Inrecentyears,anewtypeoffluorescentprobesystemhasbeenestablishedfortheestablishmentofahighsensitivityanalysismethodformanynonfluorescentdrugs．Thisthesisisforthepurposeofusingthisnovelfluorescentprobesystem,clenbuterolandcucurbiturilhostguestinteractionswasstudiedfromtheaspectsofexperimentandtheorybymeansoffluorescencespectroscopy,nuclearmagnetＧicresonancespectroscopy,densityfunctionaltheory,establishthemechanismoftheprobesystemwithatargetanalyte,nofluorescenceofclenbuterolhydrochloＧridefluKoeryeswcoerndtsprobemethodwasestablished．cucurbit７uril,clenbuterol,fluorescencetitration,fluorescenceprobe中图分类号R９６文献标识码B文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－０４０２－０２

简介：摘要：目的：探究分析对结核分枝杆菌耐药性的线性探针技术快速检测临床应用；方法：对 260株结核分枝杆菌菌株进行线性探针技术检测，金标准选择比例药敏试验法，对比探针技术检测与比例药敏试验结果的符合情况，以评价线性探针检测技术的准确性和临床应用效果；结果：采用线性探针检测，异烟肼的敏感性为 96.9%，特异性为 95.8%，阳性预测值为 94.6%，阴性预测值为 93.8%，采用比例法共检出耐多药 92例，而采用线性检出耐多药 90例，两者符合率为 97.8%，敏感度为 98.9%，特异性为 100%，阳性预测值为 100%，阴性预测值为 100%，比较两种检测方式差异无统计学意义（ X2=0.000 P=1.012）；结论：采用线性探针技术检测利福平、异烟肼的耐药性与比例法的一致性较高，操作更加简单，敏感性、特异性高，可以推广应用；

简介：以1,8-萘二甲酸酐、二乙烯三胺（DETA）、N-甲基哌嗪及丙烯基氯为原料,通过酰胺化、季胺化、SN2亲核取代以及丙烯酰胺共聚合等反应,合成了水溶性1,8-萘酰亚胺高分子荧光探针。用紫外光谱、荧光光谱等手段研究它们在水、四氢呋喃和乙醇溶液中光物理化学性质,同时考察浓度和溶剂极性及取代基对荧光性能影响及对金属离子的识别作用。结果表明,此高分子荧光探针的光稳定性及荧光量子产率明显提高,随着溶剂极性增大,荧光量子产率增大,波长红移;当浓度超过8×10^-4g/mL时出现荧光浓度自猝灭;该探针在水中能对Cu^2＋在392nm处进行高选择性识别。

简介：目的：探讨多重连接探针扩增（multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA）技术在分析胚胎停止发育（以下简称胚胎停育）流产绒毛组织染色体非整倍体异常中的应用,探讨染色体非整倍体异常导致胚胎停育与胎儿性别、患者年龄间的关系。方法：收集324例临床诊断为胚胎停育患者的流产绒毛组织,采用MLPA技术进行染色体检测,并分析检测结果与胎儿性别及患者年龄间的相关性。结果：在324例胚胎停育患者中,检出绒毛染色体非整倍体异常共68例（20.99%）,其中常染色体三体33例（13-三体12例、18-三体6例、21-三体15例）,常染色体缺失3例（13-单体1例、21-单体2例）,性染色体数目异常32例（45-XO15例、47-XXY13例、47-XXX1例、47-XYY3例）。常染色体数目异常组与染色体数目正常组间的胎儿性别分布差异无统计学意义（P〉0.05）。对绒毛染色体数目正常组[平均年龄（32±6）岁]、常染色体数目异常组[平均年龄（34±7）岁]、性染色体数目异常组[平均年龄（28±6）岁]3组患者的年龄进行比较,发现差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：MLPA技术可以作为一种辅助检测手段,用于检测胚胎停育流产绒毛组织染色体的非整倍体异常,染色体数目异常导致的胚胎停育与胎儿的性别无关,但与患者的年龄有关,胚胎常染色体数目异常组的孕妇年龄大于染色体数目正常组及性染色体数目异常组。

简介：目的建立基于TaqMan探针三重荧光PCR检测沙门菌（salmonella,Sa）、肠炎沙门菌（salmonellaenteritidis,SE）和鼠伤寒沙门菌（salmonellatyphimurium,ST）的方法。方法根据沙门菌aceA基因、肠炎沙门菌特异序列（GenBank：AF370707.1）、鼠伤寒沙门菌的STM4599序列（GenBank：AERV01000023.1）,分别设计引物和TaqMan探针,在探针的5′端分别标记FAM、VIC、cy5,建立基于TaqMan探针三重实时荧光PCR检测沙门菌的方法。结果29种不同血清型沙门菌均扩增出aceA基因,肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的引物和探针分别特异性地扩增出15株肠炎沙门菌和11株鼠伤寒沙门菌,而其他血清型沙门菌和17株非沙门菌扩增结果阴性。aceA、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌的三重荧光PCR扩增效率分别为89%、87%、90%,最低检测浓度分别达到280cfu/ml、260cfu/ml、300cfu/ml。结论本研究建立的方法特异性好、灵敏度高,可用于食品中沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌的特异性检测。

简介：研究寡核苷酸芯片的重复性与间隔臂(spacer)和探针长度之间的相关性.设计12条不同长度的带有不同spacer的探针,与749bp荧光标记靶序列杂交.扫描分析三次杂交结果,用Quantarray定量分析软件进行分析.随探针长度的延长,杂交信号的变异系数逐步降低.15mer的探针杂交的信号较弱,杂交不够稳定,重复性也相对较差.20mer、25mer、30mer的探针的变异系数逐渐降低.spacer为15时变异系数最小.说明选择spacer为poly(dT)15的25mer和30mer的探针可以获得较好的重复性.

简介：摘要本文以成都市某新建民用住宅小区为例，对成都市政府要求新建居民住宅用房必须达到15%的预制率作出分析。本案例主要通过成本、施工进度、施工难度等方面进行分析对比，已达到既能够满足成都市政府的要求，又能够满足工期要求，同时还能在这基础之上节约成本的目的。

简介：背景：胰腺癌发病隐匿，进展迅速，预后极差。光动力疗法（PDT）是20世纪80年代发展起来的一种新型抗肿瘤治疗手段。目前关于PDT在体内靶向治疗胰腺癌的研究甚少。目的：探讨以量子点-RGD（QDs-RGD）探针为光敏剂的PDT联合吉西他滨对胰腺癌移植瘤裸鼠的治疗效应。方法：合成QDs-RGD探针，制备胰腺癌移植瘤裸鼠模型。采用小动物活体成像术观察QDs-RGD、QDs探针注射入模型裸鼠体内1、5、10、24h后的显影情况。取40只造模成功的裸鼠，随机分为5组：对照组（不给予任何治疗）；单纯光照组（激光630nm，120J/cm2，持续照射20min）；PDT组（QDs-RGD0.5nmol＋激光照射）；吉西他滨组（吉西他滨50mg/kg）；联合治疗组（QDs-RGD0.5nmol＋激光照射＋吉西他滨50mg/kg）。第18d处死全部裸鼠，取出瘤体，称重并测量体积，计算抑瘤率。结果：QDs-RGD注射1h后，肿瘤显影逐渐清晰，注射5h后显影达高峰，随后逐渐减弱。QDs于瘤体附近的聚集浓度明显低于QDs-RGD，注射10h后肿瘤部位已无显影。PDT组、吉西他滨组和联合治疗组的瘤重、瘤体积均显著低于对照组和单纯光照组（P＜0.01），其中联合治疗组又显著低于PDT组和吉西他滨组（P＜0.05）；对照组与单纯光照组间、PDT组与吉西他滨组间瘤重、瘤体积差异均无统计学意义（P＞0.05）。联合治疗组、吉西他滨组、PDT组的抑瘤率分别为70.5%、43.5%、37.1%。结论：以QDs-RGD探针为光敏剂的PDT联合吉西他滨能明显抑制裸鼠体内胰腺癌移植瘤的生长，为临床治疗胰腺癌提供了一条新思路。

简介：摘要目的制备靶向血管紧张素转化酶2(ACE2)的新型分子影像探针68Ga-1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸(DOTA)-DX600，并评价其在宫颈癌模型的microPET/CT显像效果。方法对DOTA-DX600在95 ℃下进行68Ga放射性标记，并对该标记化合物进行质量控制、体外稳定性分析及脂水分配系数(log P)测定。利用稳转的ACE2高表达宫颈癌细胞(Hela)构建荷瘤裸鼠模型，利用microPET/CT显像探究68Ga-DOTA-DX600在正常昆明(KM)鼠和荷瘤裸鼠体内的分布及摄取情况，通过勾画感兴趣区(ROI)的半定量分析，获得主要脏器及肿瘤的最大标准摄取值(SUVmax)。结果68Ga-DOTA-DX600的制备时间约为20 min，探针比活度为(18.74±3.72)×106 GBq/mol，标记率为82.3%，纯化后的放化纯约为99%。室温放置2 h后，探针在生理盐水及质量分数5%人血清白蛋白(HSA)溶液中放化纯>96%；脂水分配系数(log P)为-2.44±0.04(n＝3)，表明产品具有较好的亲水性。68Ga-DOTA-DX600在正常KM鼠血液中代谢较快，主要分布于肾脏；在荷瘤裸鼠体内具有较好的肿瘤靶向性，注射后30和60 min时肿瘤部位SUVmax分别为0.25±0.01和0.21±0.01，且肿瘤摄取可被DX600抑制。结论68Ga-DOTA-DX600标记方法简单、快速，其对ACE2高表达肿瘤具有良好的靶向性，具有应用于以ACE2为靶点研究的潜在价值。

简介：矿物的比表面积是决定矿物表面反应能力和吸附容量的重要参数，但因其测定方法多样、分析结果受多种因素影响，致使分析结果有时会偏离实际值。为全面认识和更好地利用比表面积数据，本文在对比表征矿物材料比表面积的几种常用技术的基础上，重点介绍了基于探针气体吸附等温线的比表面积测定方法。以方解石粉体、石英粉体、蒙脱石等常见矿物材料和铁锰结壳为例，根据各类材料的比表面积测定数据，研究了探针气体种类、脱气温度和吸附平衡时间等测试条件的影响。并从表面能量非均质性和孔隙结构的角度，提出了在应用测定结果时需要注意的问题。

简介：卡介苗(BacilledeCalmette-Guerin,BCG)是世界上应用最广泛的菌苗,而且也是最安全,最稳定的疫苗,还是目前所知最强的免疫佐剂之一。由于在免疫学上具有许多独特优点,如:可研制成活菌苗、提高免疫力、延长保护期、适合表达免疫原性弱的抗原基因、方便、成本低等,使卡介苗在90年代迅速成为基因工程疫苗研究中的热点。要将BCG改造成为活的重组多价疫苗载体,集佐剂与抗原于一身,就需要在分枝杆菌中建立与E.coil类似的基因转化系统,使重组

简介：摘要目的利用八探针荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization，FISH）比较成人ALL与儿童ALL细胞遗传学的差异。方法回顾性分析2016年1月至2019年6月在本院住院治疗的急淋患儿275例，本院住院治疗的成人急淋患者66例；应用八探针荧光原位杂交技术（CMYC、P16、E2A、CHIC2/D10Z1/D17Z1、TEL/AML1、MLL、BCR/ABL与IGH的DNA探针），比较其细胞遗传学差异。结果八探针FISH技术共检出成人ALL 37例异常，总阳性率为56.06%；儿童ALL共检测出153例异常，总阳性率为55.63%，二者检测阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；成人ALL中，CMYC断裂基因阳性率3.03%、P16缺失阳性率16.67%、MLL断裂基因阳性率6.06%、BCR/ABL融合基因阳性率21.21%、IGH断裂基因阳性率7.58%，均高于儿童ALL；儿童ALL中，E2A断裂基因阳性率5.09%、CHIC2/D10Z1/D17Zl多倍体八探针阳性率14.55%、TEL/AMLl融合基因阳性率15.27%，均高于成人ALL；其中BCR/ABL融合基因、CMYC断裂基因、CHIC2/D10Z1/D17Zl多倍体、TEL/AMLl融合基因、IGH断裂基因在成人ALL与儿童ALL之间比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论成人ALL与儿童ALL在遗传学上异常分布各有不同，其预后也不同，八探针FISH技术具有高效、省时、灵敏等优点。临床上ALL患者初诊时检测八探针荧光原位杂交技术可以1次检测出多种异常，为临床个体化治疗提供更多的依据。

简介：目的建立以TaqMan探针实时荧光PCR技术为基础的核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（Nucleotide-bindingoligomerizationdomain,LeucinerichRepeatandPyrindomaincontaining,NLRP3）基因单核苷酸多态性（Singlenucleotidepolymorphism,SNP）检测方法。方法以20份健康人血液样本为对象,选择NLRP3基因的两个SNP位点（rs3806265和rs35829419）,针对每个位点分别设计1对PCR引物和2条TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,对SNP位点进行分型。用常规PCR和基因测序的方法对TaqMan探针实时荧光PCR分型的结果进行验证。结果用建立的TaqMan探针实时荧光PCR分型法对20份样本进行检测,其中rs3806265位点发现TT基因型3份,TC基因型8份,CC基因型9份;rs35829419位点发现CC基因型20份,无AC和AA基因型。分型结果与常规PCR及基因测序分型方法完全一致。结论基于TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法简单、快速,可实现对NLRP3基因位点的分型检测。

简介：摘要:本文探讨了半导体材料四探针测试仪中的自动控制技术与图像识别技术的应用。在测试仪下位机电路设计方面，包括恒流源及电流数显电路、多路通道开关电路、电压放大及A/D转换电路以及单片机控制和上下位机通信电路的详细设计方法。随后，我们介绍了测试仪上位机软件的设计和图像识别技术的应用，包括软件界面及其使用方法，软件编程总述以及图像识别技术在测试仪上的具体应用，如探针位置定位与校准、自动参数设置以及异常检测与反馈控制。这些技术的应用提高了测试仪的自动化程度、准确性和可靠性，为半导体材料测试提供了强大的工具。

简介：摘要：飞机制造是一个装配精确度要求高，结构、装配协调关系极其复杂的过程，而飞机装配是飞机制造过程中一个非常重要的环节，不但工作量大、装配技术难度大，而且协调困难。因此在传统飞机装配基础上，采用先进制造技术对提高装配工艺质量，缩短研制周期、降低研制成本具有重要的意义。基于此，本文主要对虚拟装配技术在飞机装配中的应用进行分析探讨。

简介：摘要：随着科学技术的不断发展，飞机装配技术得到了显著的提高。基于自动化技术和电子技术的飞机柔性装配技术是一种能够实现模块化装配，满足飞机快速发展需要的新技术，它既集成了自动化的优势，又降低了装配成本，提高了装配效率。本文首先对飞机柔性装配工作进行了概述，然后阐述了柔性装配方法在装配工作中的实际应用。

简介：摘要：本文着重阐述了该技术的关键技术和虚拟组装的建立，并以该系统为实例，在eM-Engineer的虚拟仿真平台上实现了该系统的组装，实现了该系统的可装配性.

简介：摘要：现阶段，虚拟装配技术在雷达装配领域已经有了广泛的应用，大大缩短了雷达装配的周期。但其应用的深度和广度还有很大的空间，随着虚拟装配技术在工业设计领域的不断应用，其技术也日益完善。基于计算机图像学，通过计算机辅助展现工业产品设计的构造、结构、外观等信息，在工业产品设计阶段发挥了重要的作用。

简介：摘要：随着科学技术的不断发展，飞机装配技术得到了显著的提高。基于自动化技术和电子技术的飞机柔性装配技术是一种能够实现模块化装配，满足飞机快速发展需要的新技术，它既集成了自动化的优势，又降低了装配成本，提高了装配效率。本文首先对飞机柔性装配工作进行了概述，然后阐述了柔性装配方法在装配工作中的实际应用。