摘要
摘要目的评价核因子-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路在右美托咪定减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用。方法BV-2小胶质细胞加入含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基，以1.5×104个/ml的密度接种于96孔培养板(200 μl/孔)或以2×105个/ml密度接种于6孔培养板(每孔2 ml)，置于37 ℃、含5%CO2-21%O2-74 %N2的正常培养箱中培养。采用随机数字表法分为5组(n＝30)：正常对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、氧糖剥夺/复氧复糖+右美托咪定组(OGD/R+D组)和氧糖剥夺/复氧复糖+右美托咪定+ML385组(OGD/R+D+ML组)。C组在正常培养箱中继续培养26 h；D组加入终浓度为10 μmol/L的右美托咪定孵育2 h，随后在正常培养箱中培养26 h；OGD/R组、OGD/R+D组、OGD/R+D+ML组更换为无糖DMEM培养基，置于37 ℃、含5%CO2-1%O2-94 %N2的培养箱中培养2 h，然后换为含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基，在正常培养箱中培养24 h；OGD/R+D组和OGD/R+D+ML组于氧糖剥夺前2 h时加入终浓度为10 μmol/L的右美托咪定，OGD/R+D+ML组于加入右美托咪定前30 min时，加入终浓度为4 μmol/L的Nrf2抑制剂ML385。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，ELISA检测上清液TNF-α、IL-6和IL-10的浓度，Western blot法检测细胞核Nrf-2、细胞Nrf-2和HO-1表达，RT-PCR法检测细胞HO-1 mRNA表达。结果与C组比较，OGD/R组和OGD/R+D组细胞活力降低，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6、IL-10浓度升高，细胞核Nrf2、细胞Nrf-2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05)，D组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与OGD/R组比较，OGD/R+D组细胞活力和上清液IL-10浓度升高，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6浓度降低，细胞核Nrf2、细胞Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05)，OGD/R+D+ML组上述差异无统计学意义(P>0.05)；与OGD/R+D组比较，OGD/R+D+ML组细胞活力和上清液IL-10浓度降低，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6浓度升高，细胞核Nrf-2、细胞Nrf2、HO-1及其mRNA表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制与促进Nrf2/HO-1信号通路激活，抑制炎症反应有关。
出版日期
2021年06月25日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
