摘要
摘要目的观察叶青素对缺氧和复氧的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡的影响并确定其下游靶点。方法将人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2分为7组，分别为对照组、缺氧和复氧模组(HR)组、HR+5 mg/L组、HR+10 mg/L组、HR+20 mg/L组、HR+NC组、HR+Mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验、流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测HK-2细胞增殖和凋亡。通过数据库预测微小RNA(miR)-22-3p转录因子，然后通过蛋白质印迹法(Western blot)实验和qRT-PCR实验分别检测CCCTC结合因子(CTCF)和miR-22-3p水平。通过单因素方差分析对相关结果进行统计分析。结果与HR组比较，叶青素显著提高缺氧和复氧处理的HK-2细胞的细胞活力(叶青素5 mg/L：61.72±4.93比43.94±4.42，P<0.01；叶青素10 mg/L：76.14±4.48比43.94±4.42，P<0.01；叶青素20 mg/L：85.62±4.97比43.94±4.42，F＝53.794，P<0.01)。此外，和HR组比较，叶青素显著抑制缺氧和复氧处理的HK-2细胞的凋亡率(叶青素5 mg/L：30.62±2.41比40.08±4.41，F＝63.998，P<0.05；叶青素10 mg/L：22.32±2.85比40.08±4.41，P<0.01；叶青素20 mg/L：13.88±2.09比40.08±4.41，P<0.01)以及TUNEL阳性细胞比(叶青素5 mg/L：21.19±1.86比27.62±3.10，P<0.05；叶青素10 mg/L：14.78±1.89比27.62±3.10，P<0.01；叶青素20 mg/L：10.11±2.19比27.62±3.10，F＝53.112，P<0.01)。进一步检测发现叶青素减轻缺氧和复氧导致的miR-22-3p(对照组：1±0.05，H/R组：0.27±0.06，叶青素5 mg/L：0.46±0.05，叶青素10 mg/L：0.63±0.05，叶青素20 mg/L：0.80±0.06，均P<0.01)和CTCF降低(对照组：1.00±0.04，H/R组：0.19±0.05，叶青素5 mg/L：0.39±0.07，叶青素10 mg/L：0.56±0.04，叶青素20 mg/L：0.72±0.06，F＝102.400，均P<0.01)。HR+Mimics组HK-2细胞细胞活力显著高于HR组(79±3.85比42.78±4.45，F＝117.224，P<0.01)，同时细胞凋亡率显著低于HR组(18.2±2.28比41.26±3.59，F＝104.770，P<0.01)，TUNEL阳性细胞比显著低于HR组(16.38±2.46比29.28±3.14，F＝54.042，P<0.01)。结论叶青素通过CTCF介导的miR-22-3p上调减轻缺氧和复氧诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡。
出版日期
2021年12月19日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
