目的：建立同时测定复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸的含量的方法。方法：以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂，采用柱前衍生-反相高效液相色谱法测定。色谱柱为C18柱，以0.05mol·L-1乙酸铵溶液-乙腈（850：150）为流动相A，以乙腈-水（500：500）为流动相B，梯度洗脱，柱温40℃；流速为1.0mL/min，检测波长360nm。结果：复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸可有效分离，门冬氨酸在0.0003～0.3mg·mL-1范围内线性良好；牛氨酸在0.002～2.03mg·mL-1范围内线性良好；氨基己酸在0.002～2.0mg·mL-1范围内线性良好。门冬氨酸、牛磺酸、氨基己平均回收率分别为100.8%（RSD=2.3%,n=9）、97.8%（RSD=1.6%,n=9）、99.3%（RSD=1.9%,n=9）。测定样品5批，检测结果分别为门冬氨酸102.8%、103.1%、102.1%、102.4%、103.4%，牛磺酸102.1%、99.8%、102.6%、104.3%、103.1%，氨基己酸98.8%、99.4%、98.9%、104.2%、105.5%。结论：所建方法简便、重复性好，可用于复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸的含量测定。
