乙肝抗-HBc和抗-HBe在ELISA法出现假阳性原因分析

乙肝抗-HBc和抗-HBe在ELISA法出现假阳性原因分析

赵琼

赵琼

（玉溪市疾病预防控制中心；云南玉溪653100）

【摘要】目的：分析乙肝抗-HBc和抗-HBe在ELISA法出现假阳性概率，并分析出现该事件的原因。方法：研究基础资料选择2017年1月-2017年12月进行检验的57例乙肝抗-HBc样本与54例乙肝抗-HBe样本作为基础数据，对其进行ELISA法检验，之后采用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂进行复检，对检验准确性进行分析，并对出现假阳性原因进行分析。结果：乙肝抗-HBc样本与抗-HBe样本进行比较可以发现，两者之间检查过程中假阳性率12.28%与11.11%。结论：使用ELISA法对乙肝抗-HBc和抗-HBe进行检验的过程中，整体的准确性较低，容易受到各种因素的影响，因此在进行实验的过程中需要采用更加敏感的TRFIA测试方法进行复检，进一步提升检验准确性。

【关键词】：乙肝抗-HBc；乙肝抗-HBe；ELISA法；假阳性

【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）11-0152-01

ELISA（酶联免疫吸附试验）方法是进行乙肝检验经常使用的方法，该方法最早开始于上世纪80年代，整体的测试更加的简单、便捷、准确，但是在实际使用过程中该方法容易受到外界环境的影响，造成最后检验结果的不准确，因此在进行检验的过程中需要对ELISA可能出现假阳性的原因进行分析，并且对实验结果进行复检，进而找出一些克服问题的方法，保证整体检验结果的准确性[1]。本文对乙肝抗-HBc和抗-HBe在ELISA法出现假阳性原因进行分析，详细的研究结果如下：

1基本资料

1.1一般资料

研究基础资料选择2017年1月-2017年12月进行检验的57例乙肝抗-HBc样本与54例乙肝抗-HBe样本作为基础数据，乙肝抗-HBc样本中男37例，女30例，年龄32-75岁，平均年龄为（45.59±5.69）岁；乙肝抗-HBe样本中男30例，女24例，年龄33-76岁，,平均年龄为（45.89±5.74）岁。两组患者均排除系统性疾病以及严重肝肾功能不全者，并签署实验同意书。对两组患者各指标进行比较，无显著性差异（P＞0.05）。

1.2方法

于清晨时间抽取患者静脉血，剂量为3-5ml，并放置于促进分离胶密试管内部，保持温度在37°温度内，将血清进行离心分离，时间为1-2h，在进行检测之前需要对试剂盒进行检查，取出试剂后需要在常温下平衡30min，之后提取血清样本对患者乙肝五项指标进行测试，之后将检验出的乙肝抗-HBc和抗-HBe阳性样本进行复检，复检采用TRFIA法，严格按照操作规范进行，重视质控[2]。

1.3观察指标

对样本检验的准确性进行分析，并对假阳性发生原因进行研究。

1.4统计学处理

本次研究数据均采用统计学软件SPSS20.0进行处理，计量资料以（）表示，采用t检验，计数资料采用χ2表示，P检验，P＜0.05。

2结果

乙肝抗-HBc样本与抗-HBe样本进行比较可以发现，两者之间检查过程中假阳性率12.28%与11.11%，详见表1。

3讨论

ELISA法是进行乙肝病毒五项指标检验较为重要的方式，随着使用范围的不断推广，厂家在进行试验的过程中厂家对方法进行不断改进，操作方法也在不断更新，在试剂盒使用方面更加便捷，但是在实际检验仍然存在一些因素对检验结果产生一些影响，例如样本溶血、细菌感染和样本储存时间等各个方面的问题，导致假阳性，上文研究数据可以看出，乙肝抗-HBc样本与抗-HBe样本进行比较可以发现，两者之间检查过程中假阳性率12.28%与11.11%。原因为：血液采集的过程中因为对样本的重视度不足，在样本存储的过程中未采用试管密封，造成纤维蛋白原受到影响，因此需要增加对血液样本的管理，建议尽量采用促凝分离胶密封试管，防止出现纤维蛋白的干扰，如患者出现重度脂血、溶血标本等，建议重新进行抽血操作，并且在进行操作的过程中尽量保证血清和酶结合物在同一时间加入，防止因为样本和酶结合物时间的分离造成假阳性增加[3]；在检验过程中对温度控制不当也会造成实验结果收到影响，因此在实际工作中需要在实验过程中防止标本和稀释液蒸发吸附于孔壁上，对整体的检验结果进行分析，并且进行育温讷的过程中时间不宜过长，防止因为血清放置时间过长造成的影响结果收到影响[4]；操作人员在进行实验的过程中对于仪器板的清洁等问题不足，造成实验过程中血液样本受到外界因素的影响，使得检验准确性不足，因此需要在进行检验的过程中高度重视洗板工作，检查仪器板清洗液是否按照要求进行配置，洗液是否足量安全，洗液针是否顺畅，将仪器板进行更加科学的清洗，降低假阳性[5]；在进行检查的过程中通过TRFIA法进行复检，该方法属于一种新型的检验方法，该方法采用稀土离子作为标志物，该物质较为稳定，受到外界干扰因素较少，通过这种方法进行复检，可以对整体的准确性就进行验证[6]。

综上所述，使用ELISA法对乙肝抗-HBc和抗-HBe进行检验的过程中，整体的准确性较低，容易受到各种因素的影响，因此在进行实验的过程中需要采用更加敏感的TRFIA测试方法进行复检，进一步提升检验准确性。

参考文献

[1]赵花,李军民,张红.TP-ELISA法检测梅毒抗体假阳性结果的影响因素[J].武警医学,2014,25(10):1003-1004+1007.

[2]蒿会玲.ELISA检测抗-HBc和抗-HBe假阳性原因分析[J].中国伤残医学,2014,22(02):185-186.

[3]于兰芝.ELISA法检测抗-TP假阳性和抗HIV假阳性1例[J].中国医药指南,2013,11(08):292-293.

[4]汤进.ELISA法检测HBsAg假阳性结果的分析[J].中国医药指南,2012,10(33):147-148.

[5]蔡余霞.ELISA法和胶体法检测乙型肝炎两对半的假阴性和假阳性率对比研究及原因分析[J].中国医药指南,2012,10(29):89-90.

[6]李艳霞.ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc和抗-HBe假阳性原因分析[J].中国当代医药,2010,17(36):82+84.