环境温、湿度对梅毒患者梅毒螺旋体抗体高通量ELISA检测预期值的影响

环境温、湿度对梅毒患者梅毒螺旋体抗体高通量ELISA检测预期值的影响

黄晓阳涂其弓林伟评

（永春县医院福建泉州362600）

摘要：目的分析环境温、湿度对梅毒患者梅毒螺旋体抗体高通量ELISA检测预期值产生的影响。方法分别用Freedomevolzyer和AddcareELISA600的高通量ELISA的检测系统做检测，以我院收治的43例梅毒患者的病毒样本做研究分析。结果环境条件为18-22℃的温度；30％-39％、20％-29％的湿度，检测值同预期值比较，差异不大（P＞0.05），统计学意义不存在；环境条件为13～17℃、8～12℃的温度；10％-19％的湿度，检测值同预期值比较，差异明显（P<0.05），统计学意义存在。环境的湿度和温度都对质控值会产生影响，影响差异存在统计学意义（P<0.05）。结论湿度相同，温度与质控值为正比例关系；温度相同，湿度与质控值为负相关的关系。

关键词：环境温度；湿度；梅毒螺旋体抗体；高通量；ELISA检测

本文就梅毒患者以高通量ELISA方式检测梅毒螺旋体抗体预期值受到检测当下环境的温度和湿度影响研究，做简要报道：

1、资料与方法

1.1基础资料

2015年级4月到2016年4月期间，以我院收治的43例梅毒患者的病毒样本做研究分析。分别用AddcareELISA600（以下称SB1）和Freedomevolzyer（以下称SB2）的高通量ELISA的检测系统做检测，主要对梅毒螺旋体弱阳性质控值（S/CO）做数据性分析。

1.2方法

检测仪器是中国烟台艾德康医疗设备有限公司（SB1）；高通量比较系统来自瑞士（SB2）；检测用试剂用中国厦门英科新创生物技术有限公司，0.5NCU/ml是抗体定值弱阳性质控品浓度；中国北京康彻斯坦生物技术有限公司，抗体定值弱阳性质控品浓度分别是L0.5NCU／mL与1NCU／m。具体方法，以临床实验室标准协会所指定相关标准为准，将检测温度设定在18℃到22℃之间，湿度设施在20%到40%，验证两种高通量的检测系统性能，具体验证指标有精密度、CUTOFF值、灵敏度。用室内定值弱阳性质控方法，分别检测样本的抗体，以两个系统为基础，详细记录检测时环境温度和湿度，记录质控值。以湿度和温度为分组依据，对各个小组的质控数据进行分析[1-2]。

1.3统计方法

采用SPSS21.0统计学软件对数据进行分析，表示计量资料的方法为x±s，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。并做多变量线性回归分析，主要分析温度和湿度对质控结果的影响。

2、结果

2.1环境温度、湿度对预测值影响分析

环境条件为18-22℃的温度；30％-39％、20％-29％的湿度，检测值同预期值比较，差异不大（P＞0.05），统计学意义不存在；环境条件为13～17℃、8～12℃的温度；10％-19％的湿度，检测值同预期值比较，差异明显（P<0.05），统计学意义存在。

2.2SB1检测系统受到温度和湿度影响分析

通过对两种检测系统的检测结果做多变量的线性回归分析，环境的湿度和温度都对SB1检测系统的质控值产生影响，影响差异存在统计学意义（P<0.05）。如果环境有相同湿度，每升高1°，质控值也会跟着上升，上升量是0.043；温度与质控值表现为正比例关系。如果环境有相同温度，每增加湿度1%，质控值会减少，数值是0.007，湿度与质控值表现为负相关关系，可见表1。

3、讨论

梅毒是一种危害性极大的传染性疾病，其通过梅毒螺旋体（密螺旋体苍白亚种）所产生感染而引起，有着很强的传染性。该病前期检验结果对于诊断和治疗有着重要意义。针对其的检测技术是ELISA，固相载体是微孔反应板，实验基础是抗原体反应。该检测实验过程有很多步骤，包括加样、洗板、温育，使用显色液和酶等化学制剂和生物制剂。所以检测过程中任意方面受到影响，比如外界条件变化或者外界物质的感染等，都会影响到实验结果。

在以往研究中发现，温度以及湿度是对检测结果产生影响的关键性因素，特别是实验标本是弱阳性时，产生的影响最为明显。检测环境中温度发生改变，比如降低，尤其针对高通量检测，当处于非水浴状态，反应板孔内的温度上升为37℃，所用时间更多，但是临床实践中对这种想象不是很关注，整个实验时间不变，EILSA反应真正时间则很少，就容易出现漏检弱阳性的样本。而检测时环境温度比37℃高，分子更好活跃，抗原抗体反应更加激烈，如果温度降低，高浓度TP样本受到的影响不是很大，科室分子含量不多的弱阳性标本，就可能会出现漏检现象[3]。SB1为开放式孵育模块，SB2为封闭式孵育模块，可以更好的对比湿度影响。湿度30％～39％、20％～29％；温度18～22℃，检测值比较预期值，无统计学差异，说明此时的温湿度条件对高通量ELISA检测TP抗体是比较合适。综上所述，控制环境温、湿度对ELISA检测十分有意义。

参考文献

[1]温丽玲，余晋林，郭如华，等.血液保存液对梅毒螺旋体抗体ELISA检测结果的稀释影响[J].中国卫生检验杂志，2008，18（5）：938-938.

[2]张明霞，张根仓，赵黎娟，等.不同抗凝剂对梅毒螺旋体抗体ELISA检测结果的影响[J].临床输血与检验，2011，13（4）：340-341.

[3]魏方，张鹏.ELISA法与TPPA法检测梅毒螺旋体抗体的相关性研究[J].蚌埠医学院学报，2014，39（5）：651-652.