荧光定量PCR技术在儿童EB病毒感染早期诊断中的应用探析

荧光定量PCR技术在儿童EB病毒感染早期诊断中的应用探析

王晓庆李雅楠

王晓庆李雅楠

黑龙江省大庆油田总医院黑龙江大庆163000

【摘要】目的：研究荧光定量PCR（FQ-PCR）技术应用于儿童Epstein-Barr（EB）病毒感染早期诊断的价值。方法：选取120例2015年4月-2016年4月收治的儿童EB病毒感染患儿，用荧光定量PCR技术检测EBV-DNA。结果：120例患儿中共检出48例EBV-DNA阳性，1-3岁和4-7岁患儿EBV-DNA检出率较高，25%的阳性患儿可以在3天内检测出来，81.25%的患儿可以在7天内检测出来。结论：应用FQ-PCR技术诊断早期儿童EB病毒感染，诊断效果较好，值得临床推广使用。

【关键词】FQ-PCR技术；早期诊断；儿童EB病毒感染；阳性

EB病毒是一种常见病毒，儿童感染EB病毒的机率较高，受EB病毒感染后，部分患儿因病情得不到控制，感染迁延不愈或继发其他恶性疾病[1]。因此，早期诊断并及早治疗至关重要。为进一步明确FQ-PCR技术在儿童EB病毒感染早期诊断中的应用价值，本院对其进行了研究，具体如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

选取我院儿科2015年4月-2016年4月收治的儿童EB病毒感染患儿120例，所有患儿临床表现为咽峡炎、发热以及淋巴结肿大等症状，其中男70例，女50例，1岁以下患儿36例，1-3岁44例，4-7岁32例，8-12岁8例。

1.3方法

对这120例患儿均采集静脉血用荧光定量PCR技术进行检测，使用的仪器为ABI-7500荧光定量PCR扩增仪，具体操作为：先使用EDTA-K2抗凝真空血管对120例患儿分别采集2ml的静脉血，取全血1ml至干净玻璃试管中，然后将1ml的生理盐水轻摇混匀。取干燥玻璃试管加入500l淋巴细胞分离液，将稀释的全血缓慢加入加有淋巴细胞分离液的试管中，2000rpm离心20分钟，吸取白细胞层，加入1.5ml离心管，12000rpm离心5分钟，去上清，沉淀中加入DNA提取液50l摇匀，同时再取阴性和阳性对照质控品分别加入50l的DNA提取液，经过恒温和离心处理后均取2l的上清液加入PCR反应管，8000rpm并离心数秒。通过仪器自动检测情况，对检测结果进行分析。

2结果

2.1EBV-DNA阳性患儿不同年龄段的检出情况比较

通过检测结果可以发现，120例患儿中共检出48例EBV-DNA阳性，其中36例1岁以下患儿中有13例被检出为EBV-DNA阳性，检出率为36.11%。44例1-3岁患儿检出20例，检出率为45.45%，4-7岁患儿检出率为40.63%（13/32），8-12岁患儿检出率25%（2/8）。由此可见，1-3岁以及4-7岁患儿EBV-DNA检出率较高。

2.2阳性病例患儿确诊时间比较

通过表一数据可以发现，3天内有25%的阳性患儿检测出来，81.25%的患儿都可以在7天内检测出来。只有18.75%的患儿在7天后检出，其中有6例在住院前未行EBV-DNA检测。

3讨论

EB病毒多发于儿童群体中，症状多变，往往会累及患儿全身多个系统，如果没有及时对病情进行控制很有可能导致其他疾病发生，严重时还有可能威胁患儿的生命安全，所以对EB病毒进行早期诊断具有非常重要的意义[2]。近年来，国外文献报道EB病毒荧光定量PCR是诊断EB病毒感染的最有效方法，该PCR技术近年被广泛应用[3]，具有较高的准确性和可靠性。FQ-PCR技术是一种操作简单且准确率较高的检测方法，对临床早期诊断儿童EB病毒感染具有较好的效果。

本研究中，通过对120例患儿采用FQ-PCR技术进行检测，检测结果发现，1-3岁以及4-7岁患儿的EBV-DNA检出率较高，超过4/5的患儿可以在7天内检测出来，说明采用FQ-PCR技术检测EBV-DNA，检出效果较好。

总而言之，FQ-PCR技术用于儿童EB病毒感染早期诊断准确率较高。且操作简便，值得推广。

参考文献：

[1]郭龙.EB病毒与非肿瘤性重症疾病[J].中国实用儿科杂志，2008.23（1）：64-66

[2]祁新蕾.PCR检测70例儿童EBV-DNA的临床分析[J].中国医药指南，2013，01（20）：573+576.

[3]黄建宏.林心.李文锋.等.FQ-PCR技术在儿童支原体肺炎早期诊断中的应用[J].分子诊断与治疗杂志2009.1.（1）：18-19.