浅谈常规石蜡HE制片的质量控制

浅谈常规石蜡HE制片的质量控制

代洁孙亮

(四川大学华西第二医院;四川成都610000)

【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）08-0227-01

随着分子病理、免疫组织化学技术及其他病理技术的发展，均为最终的病理诊断提供了十分重要的依据，但是常规石蜡HE（Hematoxylin-Eosin）制片仍起着不可代替的作用，因此制作出一张优良的HE切片十分重要，并且我们应当保证每一次都能制作出优良的HE切片。但事实并非如此，因此本文就如何进行HE制片质量控制进行探讨。

1、组织取材及固定

要保证HE制片质量的第一步是组织取材的大小和固定时间、方法的正确。组织大小一

般为1.5cmX1.5cmX0.2-0.3cm，如果组织过大就会影响脱水效果，最终影响HE制片质量。任何组织无论大小离体后均应立即固定，固定液的种类较多，我科选用的是10%中性福尔马林固定液。

2、组织处理

适宜的脱水程序和良好的脱水试剂是保证HE制片质量的第二步。随着全自动密闭式组

织脱水机的出现，替代了手工脱水，极大方便了病理工作者的工作。我们应当通过日常工作经验摸索出适合自己科室组织标本的脱水程序和时间。组织在无水酒精中时间过长，脱水过度容易使组织过硬、过脆，影响切片质量。并且我们应当注意合理更换脱水试剂，保证组织脱水质量。

3、包埋

包埋时要注意组织的包埋面[1]，如囊壁、管腔等组织必须竖直包埋，多块组织如皮肤组

织、胃、肠粘膜等要注意使组织的方向性一致。小块多颗组织，应尽量放在一起，并保证在同一平面上。同时还应观察组织内有无缝线、纸絮，如有，一定要去除。因此，正确的包埋是保证HE制片质量的第三步。

4、切片

切片在常规石蜡HE制片质量控制中占有十分重要的地位。病理常规石蜡包埋HE染色切片质量标准和评分表中要求，组织切面必须完整，稍微不完整，减1-3分，不完整，减4-10分；切片应薄（3-5微米），厚薄均匀，切片厚（细胞重叠），影响诊断，减6-10分；切片应无刀痕、裂隙，有刀痕、裂隙，尚不影响诊断减2分；切片应平坦，无褶皱、折叠，无污染物；切片应无松散，裱贴位置适当，切片松散，减5分，切片裱贴位置不当，减5分。

5、HE染色

HE染色[2]是HE制片质量控制的最后关键,一定要保证试剂的质量和染色时间控制。染色

的好坏与苏木素、伊红的配制和染色方法以及温度、染液的pH值、染色时间等有关。染色最关键的一步是苏木素染好后的分化及蓝化。盐酸酒精过度使用也会造成最终HE染色质量下降。优质切片镜下是：核浆对比明显，核膜及核染色质清晰可见、色泽鲜美艳丽。

6、脱水、透明、封片要细心

我们可以提前在中性树胶中加入适量的二甲苯，混合均匀，不宜过稠、过稀、过多。过稠时树胶不易分开，过稀、过多时盖片周边容易溢胶影响美观，切片不整洁会减3分，胶外溢减3分。盖片时要轻,以免产生气泡，有气泡，减3分。切片透明度要好，透明度差，减1-3分，组织结构模糊减3-7分。

总之,要制出优质的HE切片，不仅需要制片过程每一步骤的规范操作，还需要技术人员有精湛的技术和高度的责任心。并且我们应该每天抽查HE切片，对其评分，对不合格的切片作出相应的惩罚，只有这样，我们才能真正达到HE制片的质量控制。

参考文献：

[1]马恒辉,周晓军.组织固定处理及包埋常见问题与对策[J].临床与实验病理学志.2011(06)

[2]王树生.常规石蜡HE染色过程中的质量控制[J].齐齐哈尔医学院学报.2005(07)