50例阴道细菌的检验方法比较分析

50例阴道细菌的检验方法比较分析

刘林

刘林黑龙江省鹤岗矿业集团公司总医院154100

【摘要】目的：研究5种不同的阴道细菌的检验方法，分析比较各自的临床价值。方法：将我院妇科门诊近期诊断的50名细菌性阴道炎患者随机分为A、B、C、D、E五组，A组患者阴道分泌物采用线索细胞检查，B组患者采用细菌性阴道病快速检测（BV快速检测法），C组患者采用胺试验检查方法，但不进采用pH检测，D组患者采用pH检验法，但不进采用胺试验检查法，E组患者采用PCR检验法，分析比较每组患者的检测结果。结果：五组患者的检测阳性率依次为70%、60%、50%、50%、90%，五种方法的检测结果差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。结论：目前临床上检验细菌性阴道病的方法有很多，不同的方法优缺点也各不相同，最近研究的PCR检测率较高，而传统的BV检测法具有方便快捷的优点，临床上针对患者可以采取适当的方法。

【关键词】阴道；细菌；检验方法

【中图分类号】R711.73【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-04-059-02

细菌性阴道病（BV）是一种典型的阴道感染性疾病，在育龄女性中最常见，主要是由于如乳酸杆菌类的正常菌群缺失或者减少，以及如支原体属、革兰阳性球菌、动弯杆菌属、加德纳菌属、拟杆菌属、Prevotela1属之类的兼性厌氧菌和厌氧菌过度增殖而引起的多细菌性紊乱疾病。细菌性阴道炎作为一种常见的妇科疾病，通常不引起重视，但是却会对患者的正常生活造成很大的影响，甚至导致急慢性盆腔炎、异位妊娠甚至不孕不育等。针对这一疾病，目前临床上主要以预防为主，在疾病早期发现异常时，要及时检测出并进行相关的治疗，所以在这里，检验方法对于治疗尤为重要。本文针对我院近期收治的50名细菌性阴道炎患者，采用了5种比较常见的检验方法，检验报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料

样本为我院近期收治的50名细菌性阴道炎患者，随机将其分为5组，每组各10人，所有患者年龄在20-50岁之间，平均年龄（32±5）岁，40例（80%）有过性生活史。本次50例患者在进行细菌性阴道病检验之前都已经全部排除了阴道药物内使用、48h内性生活、妊娠、月经等情况。五组患者在年龄、发病时间、婚否等一般资料方面比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2样本提取

阴道分泌物采集：嘱咐患者阴道分泌物检查前2天禁性生活，以医用棉签插人阴道内，轻轻旋转沾取阴道分泌物后，将棉签置于装有2ml左右生理盐水的试管中送检。

1.3检验方法

A组采用线索细胞检查：在玻璃片上将标本薄而均匀地涂抹上，等其在室温环境下干燥后再进行革兰染色。一旦发现许多染色不定或者革兰阴性的球杆菌或小杆菌出现在上皮细胞表面，那么就基本肯定判断细胞检查结果为阳性。B组采用BV快速检测法：选用细菌性阴道病（BV）快速检测试剂盒（郑州威可瑞生物科技有限公司）对阴道分泌物进行检验，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。若试管内显现为蓝色或绿色，即可认定为细菌性阴道病快速检测为阳性结果；若试管内显现为黄色，即可认定为细菌性阴道病快速检测为阴性结果。C组患者采用胺试验检查方法：在玻璃片上放置标本，然后在玻璃片上加人含量为10%的氢氧化钾1-2滴，立即闻其气味，如果能够闻到胺味或者腥臭气味，如烂鱼样，那么就可以判断为阳性。D组患者采用pH检验法：取阴道分泌物后立即以pH试纸进行pH检验，片刻后，将显色了的pH试纸与标准比色卡进行比较，根据比色的结果对阴道分泌物进行判断。若pH>4.5，则可认定pH检验结果为阳性；若pH镇4.5，则可认定pH检验结果为阴性。E组患者采用PCR检验法：制备临床标木模板DNA：取阴道分泌物500ｕl于生理盐水中，12000r/min离心10min弃上清液后加入碱性裂解液98℃下加热10min，12000r/min离心5min，取部分上清液做模板。检测PCR扩增和产物：取包含缓冲液、引物、无菌去离子水和模板等总体积为25闪，以无菌石蜡油30u1覆盖后进入PCR循环、循环参数为：950C卜5min，940C卜1min，58℃下1min，72℃下1min，共32个循环，最后72℃下延伸5min。设置PCR检测细菌的阳性及阴性对照：在进行阴道分泌物样本DNA扩同时，采用同一批PCR反应试剂，将不加模板DNA的作为阴性对照；将加人分离提纯的标准菌株DNA模板的PCR扩增作为阳性对照。

1.5统计学方法

数据收集及统计采用SPSS17.0数据统计软件，计数资料比较采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

线索细胞检验方法检测阳性率为70%，细菌性阴道病快速检测阳性率为60%，胺试验检查阳性率为50%，pH检验检查阳性率为50%，PCR检测的阳性率为90%。其中，PCR检测法阳性检测率最高，与其他各组的检验结果相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。

3讨论

很多女性在日常生活中或多或少都会出现细菌性阴道病，这是一个较为常见的女性疾病。当女性患有细菌性阴道病时，那么就会出现动弯杆菌、加德纳尔菌之类的厌氧菌大量繁殖，而阴道内乳酸杆菌减少的问题，部分患者的阴道分泌物还会出现臭味，且分泌量大幅度增加。一旦患上这种疾病，女性很容易出现白带增多、外阴痰痒、宫颈水肿、外阴充血等问题，甚至还有可能会出现尿痛、尿急、尿频等情况，严重刺激到患者的尿路。

细菌性阴道炎患者阴道pH值增加，采用pH检验法进行检验时，具有敏感度高、操作简便易行的优点，但检查特异性差，当患者同时伴有滴虫感染、阴道出血、宫颈粘液时，容易干扰检查结果，容易出现假阳性，故该检查方法通常仅作为辅助性检查。采用胺试验检查方法进行检验时，10%氢氧化钾溶液与含加德纳菌、支原体、厌氧菌等的阴道分泌物发生化学反应，生成氨气并释放出来，嗅时可闻及胺味或鱼腥味，该检验方法亦具有操作简单、敏感度高的优点，但与pH检验法相似，当患者存在近期有性生活史、标本被月经血污染等情况时，亦可引起假阳性检验结果，容易引起误诊。在临床实际工作中，通常采用pH检验法、胺试验检查方法联合使用对细菌性阴道炎进行诊断。我们从本组资料结果可以看出，阴道pH值测定法检验出的阳性为5例（50%）；胺试验法检验出的阳性为5例（50%）；线索细胞检查法检验出的阳性为7例（70%）；BV决速检测法检验出的阳性为6例（60%）。本文中的BV快速检测法正是利用引起细菌性阴道病的病原菌所产生的唾液酸酶和试剂盒中的蛋白水解酶发生颜色反应，反应所得的物质加显色剂即可出现颜色变化，根据染色的变化直接进行诊断，不易受外界因素的干扰。PCR检测法的出现及发展，为临床中找到了一种替代细菌培养的检验方法，PCR检测法融合PCR的敏感性、DNA杂交的特异胜和光谱技术精确定量等各种优点于检测中。PCR检测法与细菌培养法检验结果对照显示，PCR检测法的细菌检出率为90%，PCR检验法细菌检验的敏感性及特异性高，且操作过程相当简便及快捷，可满足当今临床诊断的需要值得在临床上推广。

综上所述，细菌性阴道病（BV）快速检测法检查细菌性阴道病时，具有结果准确可靠、操作简单、检查耗时少、经济、方便等优点，可补充线索细胞检查法的不足；pH检验法、胺试验检查方法联合使用可提高细菌性阴道病的阳性检出率。除此之外，近期的PCR检测技术的出现与发展，更是为临床上找到了一种更为有效的检测方法，值得在临床上推广。在对患者检测时，可根据患者具体情况采取更加有效的方法。

参考资料：

[1]韦丽苹.200例细菌性阴道病的检验方法比较[J].中国卫生产业，2009，13

[2]史跃杰.99例阴道细菌的检验方法比较分析[J].现代预防医学，2011，14

[3]钟里华.156例妇女阴道细菌临床检验方法的比较分析[J].中国医药指南，2013，07