苦豆子总生物碱对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

苦豆子总生物碱对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

陈娟

陈娟

（江苏省南通市卫生高等职业技术学校226007）

【摘要】目的观察苦豆子总生物碱对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用酸水提取法提取苦豆子总生物碱，作用于0.1%CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型，观察不同浓度总生物碱对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。结果与正常组比较，模型组小鼠血清ALT、AST活性显著升高；与模型组比较，给药组中剂量组小鼠血清中ALT活性降低（p<0.01），AST活性不降低（p>0.05），高剂量组、低剂量组小鼠血清中ALT、AST活性无显著性差异（p>0.05）。结论苦豆子总生物碱对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用。

【关键词】苦豆子总生物碱肝损伤

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）09-0172-02

苦豆子为豆科槐属植物苦豆子SophoraalopecuroidesL.的种子，性寒，味苦，有小毒，具有清肠燥湿的功效，主治痢疾、肠炎等。苦豆子主产于内蒙古、甘肃、新疆、山西、宁夏、青海等地[1]。近年来，对苦豆子全草的药理作用研究得较为深入，发现苦豆子全草具有中枢抑制、抗炎及抗变态反应、抗心律失常及正性肌力、抗氧化作用等[2]。本实验采用酸水提取法从苦豆子种子中提取生物碱，作用于0.1%CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型，考察苦豆子总生物碱对0.1%CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用，为扩大药源做基础性研究。

1.材料与仪器

1.1材料

苦豆子，购于安徽省亳州药材市场，并经生药鉴定后供实验之用。

四氯化碳（分析纯，上海长江化工厂生产，批号：20080512），联苯双酯滴丸（浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号：110524），ALT检测试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20110420），AST检测试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20110520）。

1.2实验动物

雄性ICR小鼠，体重18～22g，安徽医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：皖动准字02号。

1.3主要仪器

KQ-300DB超声波清洗仪（昆山市超声有限公司），低速离心机（上海安亭科学仪器厂），日立7020自动分析仪（日本日立公司）。

2.方法

2.1药液配制

取苦豆子粗粉100g，加10倍量0.5%硫酸溶液，超声提取5h，滤过，滤液用石灰乳调pH值为7，调整不同的浓度,备用[3]。

取联苯双酯滴丸200粒，加蒸馏水300ml溶解成混悬液，备用。

精密吸取CCl40.1ml，加花生油100ml，超声30min混匀，备用[4]。

2.2实验方法

取ICR小鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为：正常对照组（蒸馏水10ml/kg），模型组（蒸馏水10ml/kg），阳性对照组（联苯双酯混悬液150mg/kg），高剂量组（10g/kg），中剂量组（5g/kg）和低剂量组（2.5g/kg）。上述药液浓度均以相当于原生药量计[5]。每日灌胃给药1次，连续投药7d，最后1次给药1h后，除正常组外，每组腹腔注射0.1%CCl4溶液0.1ml/10g。禁食16h，眼眶取血，分离血清，作ALT、AST活性测定[6]。

2.3统计学方法

ALT、AST数据采用双侧t检验，用x-±s表示。

3.结果

与正常组比较，模型组小鼠血清ALT、AST活性显著升高；与模型组比较，给药组中剂量组小鼠血清中ALT活性降低（p<0.01），AST活性不降低（p>0.05），高剂量组、低剂量组小鼠血清中ALT、AST活性无显著性差异（p>0.05），结果如表1所示：

表1苦豆子总生物碱对CCl4所致急性肝损伤小鼠血清中ALT、

AST活性的影响（n=10）

与模型组比较，**p<0.01，*p<0.05，与正常对照组比较，△△p<0.01，△p<0.05

4.讨论

CCl4是建立肝细胞损伤模型的常用药物，CCl4可通过P450酶系统脱卤素后形成CCl3，后者能从不饱和脂肪酸分子中夺取氢离子，引起脂质过氧化，使肝细胞结构破坏、肝细胞内酶外逸、细胞存活率下降[7]。现代研究表明，一般认为ALT活性上升作为肝细胞浆膜损伤的标志，而AST活性上升作为线粒体损伤的重要指标[8]。

本研究成功地复制了CCl4所致小鼠急性肝损伤模型，并发现苦豆子总生物碱中剂量组对CCl4所致急性肝损伤有明显的保护作用，能显著降低CCl4所致急性肝损伤小鼠血清中ALT的活性，说明苦豆子总生物碱具有保肝降酶的药理活性，但效果不如阳性组明显。我们推测苦豆子总生物碱可能是通过修复肝细胞浆膜损伤而产生保肝作用，而对于线粒体损伤无明显修复作用，其确切机制还待今后进一步研究。与模型组比较，苦豆子总生物碱高剂量组ALT、AST的活性无明显降低，可能与苦豆子有小毒有关，在开发制剂的过程中应充分考虑到苦豆子毒性这一点。

参考文献

[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(第四册)[M]上海：上海科学技术出版社1998：632.

[2]吴立军主编.天然药物化学[M].北京:人民卫生出版社,2004:380-382.

[3]黄华，哈木拉提，杨丽丽，等.苦豆子生物碱保肝降酶和免疫调节作用研究[J].中药药理与临床，2005，21（2）：16～19.

[4]秦学功，元英进.苦豆子种子中生物碱的冷浸提取实验研究[J].中草药，2001，32（7）：604～606.

[5]陈奇主编.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1996；118～119.

[6]赵艳玲，蔡光明，刘军,等.正交实验法优选小鼠四氯化碳肝损伤模型[J].解放军药学学报，2001，17（4）：215～217.

[7]赵敏，杨杏芬，池莉平，等.小鼠急性四氯化碳肝损伤模型的建立及在保健食品筛选中的应用[J].华南预防医学，2002，28（5）：5～8.

[8]施畅，廖明阳.肝脏毒理学研究中的体外实验模型[J].癌变?畸变?突变，2004，16（2）：121～124.