乳没镇痛胶囊质量标准研究

乳没镇痛胶囊质量标准研究

薛利华冯小燕杨晓媛岳宝森

薛利华冯小燕杨晓媛岳宝森

（陕西省西安市中医医院710001）

【摘要】目的:建立乳没镇痛胶囊质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中乳香和没药进行鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中血竭素高氯酸盐含量。结果:薄层色谱斑点清晰，分离度较好，专属性强。高效液相色谱法测定结果，血竭素高氯酸盐在79.53～530.2μg线性关系良好(r=0.9999)，平均加样回收率96.2%，RSD为0.8%。结论:该方法快速、灵敏、准确，可有效控制乳没镇痛胶囊的质量。

【关键词】乳没镇痛胶囊血竭素高氯酸盐薄层色谱高效液相色谱

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）20-00100-02

乳没镇痛胶囊是由镇痛饮进行剂型改革而来的制剂，是国家级名老中医姚树锦主任医师集30余年临床经验总结出治疗痹痛的经验方，处方由乳香、没药、细辛、土鳖虫、血竭等药组成，功效为活血定痛，破瘀化滞，祛寒逐风。临床广泛用于类风湿性关节炎、退行性骨关节炎、强直性脊柱炎、跌打损伤等导致的周身肌肉关节肿胀疼痛[1]。为了更有效的控制产品的质量，建立乳没镇痛胶囊乳香和没药的薄层色谱鉴别方法，并采用高效液相色谱法测定制剂中血竭素高氯酸盐含量。

1仪器与试药

1.1仪器LC-20AT恒流泵；SPD-20A紫外检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10ASVP校温箱（日本岛津）；FA2104(上海民桥精密科学仪器有限公司)，预制硅胶G板(青岛海洋化工生产)。

1.2试药乳香、没药、血竭（购自西安盛兴饮片厂）；磷酸（广东汕头市西陇化工厂）；乳香对照药材（120970-200403）；没药对照药材（120967-200603）；血竭素高氯酸盐对照品（110811-200704购自中国药品生物制品鉴定所，含量测定用）；乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。乳没镇痛胶囊样品(批号：20121023，20121025，20121027)及相应药材阴性样品由本实验室自制。规格0.5g/粒，相当于生药材2.5g/粒。

2方法与结果

2.1薄层色谱鉴别[2-6]

2.1.1供试品溶液的制备取本品5g，加甲醇30mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2没药对照药材溶液的制备取没药对照药材1g，加甲醇10ml，同供试品溶液的制备制成没药对照药材溶液。

2.1.3乳香对照药材溶液的制备取乳香对照药材1g，加甲醇10ml，同供试品溶液的制备制成乳香对照药材溶液。

2.1.4阴性对照溶液的制备取原料药材，按处方分别制得缺乳香、缺没药的阴性样品，照供试品溶液制备方法制得相应阴性对照溶液。

2.1.5测定法照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述四种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙醚（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰。

2.2血竭素高氯酸盐含量的测定[2,7-9]

2.2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（50：50）为流动相；检测波长为440nm；柱温40℃。

2.2.2对照品溶液的制备取血竭素高氯酸盐对照品4.43mg精密称定置25ml棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1ml中含血竭素高氯酸盐26.51?g）（血竭素重量=血竭素高氯酸盐/1.337）。

2.2.3供试品溶液的制备取供试品约0.4g，精密称定置25ml棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液至刻度，密塞，振摇3分钟，滤过，精密量取续滤液2ml置10ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.4专属性考察按照处方比例称取缺血竭的空白样品,按制备工艺制成缺血竭的阴性对照样品,按供试品溶液的制备方法制成缺血竭的阴性对照溶液。将血竭素高氯酸盐对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液,分别注入液相色谱仪进行测定。结果见图1。

2.2.5线性范围考察精密吸取血竭素高氯酸盐对照品溶液（浓度26.51?g/ml）3、5、10、15、20?l，按上述色谱条件注入色谱仪，依法测定峰面积，以峰面积对血竭素高氯酸盐含量进行回归，得回归方程为Y=2E+06X+2860.3，r=0.9999结果表明血竭素高氯酸盐在79.53～530.2?g范围内呈良好线性关系。

2.2.6精密度考察精密吸取供试品（批号：20121023）溶液10?l重复进样6次，测定峰面积RSD为0.68%，表明精密度良好。

2.2.7重复性试验取同批样品（批号：20121023）按供试品制备方法制备6份供试溶液，进样10?l测定，分别计算血竭素的含量，RSD为1.2%，结果表明该方法的重复性良好。

2.2.8稳定性试验精密吸取供试品（批号：20121023）溶液10?l，分别与不同时间测定峰面积，结果在0、4、8h的面积分别为696228、691395、697321，峰面积RSD为0.45%，结果表明供试品溶液在8h内稳定性良好。

2.2.9回收率试验取已知含量的同批样品（批号：20121023）5份，每份20粒。取内容物混匀，取约0.20g，精密称定，置25mL棕色瓶中，分别精密加入血竭素高氯酸盐对照品溶液（178μg/mL）10mL，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液。测定结果见表1。

2.2.10样品含量测定

取三批供试品，按“2.2.3”项下方法操作，在“2.2.1”色谱条件下进样分析，测定含量，结果见表2。

3讨论

3.1本试验参照《中国药典》[2]和有关文献[3-6]对乳没镇痛胶囊方中君药乳香、没药进行薄层鉴别,提出了一种更加简便、经济的质控模式，同一供试液，同一色谱条件，同时鉴别没药、乳香，提高了检验效率，降低了检验成本，结果薄层色谱斑点清晰、方法专属性强、重复性好,且阴性无干扰。

3.2血竭为方中贵重药材，且市场伪品较多，故对血竭进行含量测定，结果用HPLC法测定本制剂中血竭素高氯酸盐含量专属性强，重现性好，可作为乳没镇痛胶囊的质量控制指标。

3.3本实验所建立的方法可靠，准确性好，可用于该胶囊的质量控制。

参考文献

[1]王维英.姚树锦中医世家经验辑要[M].西安.陕西科学技术出版社,2002.1

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*陕西省中医药管理局立项课题题目编号ZY49