潍城区女性感染HPV调查与分析

潍城区女性感染HPV调查与分析

崔金祥李卫红

崔金祥1李卫红2（1山东省潍坊市潍城区西城医院261057;2山东省潍坊市潍城区杏埠中心卫生院261056）

【中图分类号】R195.4【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）20-0017-01

【摘要】目的研究潍城区女性人群人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况、年龄特征和基因型分布，为HPV感染的防治提供理论依据。方法采用核糖核酸分子导流杂交分型技术队679例女性患者进行HPV分型检测并对感染情况及基因分布进行统计学分析。结果(1)679例女性中HPV阳性212例，阳性率为31％，感染者中单一感染183例占86％，二重以上感染29例占14％，小于30岁大于51岁女性是HPV感染高峰与其他年龄段比较差异有统计学意义。（P<0.05）。（2）212例阳性标本共检出HPV519株，分为19个亚型，分离率高的前5个基因是HPV16（16.28％）、HPV58（11.63％）、HPV6（0.08％）、HPV33（9.30％）、HPV52（8.53％）。结论hPV感染具有一定的地域性，HPV基因型的检测对宫颈疾病的防治具有重要意义。

【关键词】人乳头瘤病毒基因亚型多重感染

人乳头瘤病毒（humanpapillomavirushPV）是一类能特异感染人皮肤和粘膜的双链闭合环状DNA病毒。早期流行病学和基础研究已证实HPV感染是宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌的主要原因。DNA序列分心发现HPV至少有200多个基因型[1]，不同的HPV亚型的感染其致病性和后果也有差异，另有研究证实不同地域HPV流行的基因型有所差异，因此本文旨在了解我区HPV分子流行病学状况明确感染型别。期望对监控HPV感染疫情及制备相关治疗性疫苗起到指导作用。

1资料与方法

1.1研究对象收集我院2010年3月—2011年3月妇产科门诊住院疑似HPV感染的高危人群679例，年龄18—68岁。

1.2标本采集取材前先用消毒棉拭子将宫颈口的分泌物擦去，然后用凯普专用的宫颈刷贴宫颈口粘膜稍用力转动三圈，将取样后的棉拭子放入有细胞保存液的十瓶内。

1.3仪器与试剂美国HBI9700型PCR扩增仪，凯普生物科技有限公司提供的专用核酸分子快速杂交仪器,DNA提取试剂盒、PCR扩增试剂盒及杂交试剂盒均购自开普生物科技有限公司。

1.4hPV基因亚型检测步骤DNA提取、聚合酶链反应（PCR）扩增、导流杂交步骤。均严格按照试剂盒说明书进行操作，在一张低密度基因芯片薄膜上一次性检测21种HPV病毒亚型，包括13种高危亚型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68；5种低危亚型:6、11、42、43、44；3种中国人常见亚型：53.66.CP8304。

1.5结果判定阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点，根据膜条HPV分型分布图，判断阳性点为何种HPV病毒类型。Biotin对照点为酶与显色液的质控点，内对照点（IC）为PCR，热变性及杂交过程质控点，在检测中这两个对照点均应为阳性。

1.6统计学处理组间比较采用F检测，如方差不齐采用秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1hPV检测结果在研究的679例女性中，HPV感染者２１２例，感染率为31.22％,在感染者中单一感染183例占86.08％，二重感染20例占9.43％，三重感染6例占2.59％，四重感染2例占1.18％，五重感染1例占0.47％，八重感染1例占0.24％。

2.2hPV感染的年龄分析679例女性在各年龄段HPV感染率，小于30岁阳性43例占39.9％，31—40岁阳性47例占26.7％，41—50岁阳性59例占27.7％，大于51岁阳性63例占34.5％。

2.3hPV感染亚型分析212例阳性标本中共检出516株HPV病毒，共19个亚型，其中高危型367株占71.12％，低危型86株占16.67％，中国人常见亚型63株占12.2％。

2.4单一感染和混合感染的HPV亚型分布结果显示：HPV感染最常见的五个亚型是：HPV16（占28％）、HPV58（占11.63％）、hPV6（占10.08％）、HPV33（占9.3％）、HPV52（占8.53％）。

3讨论

HPV是一组DNA内切酶谱各异，外壳蛋白质抗原性不同的嗜上皮细胞的一类病毒的总称。目前确定的型别大约有200余种，大约有30余种可以从生殖道组织细胞中分离出来。根据HPV型别与癌发生危险性的高低分为低危性和高危性。低危型如HPV6、11、42、43、44等常引起外生殖器湿疣等变性病变，高危型如HPV16.18.31.33.35.39.45.51等，与宫颈癌及CIN的发生有关，加强女性HPV检查了解HPV感染的情况及HPV亚型分布，对于发现HPV感染的高危人群，积极控制HPV感染及有效治疗CIN，降低宫颈癌的发生率具有重大意义。传统的HPV方法操作复杂，杂交效率低等问题，目前公认的HPV检测法当属第二代杂交捕获法，但不能具体对HPV基因型分型，不能同时检测高危性和低危性，也不能判定多种感染。[2]而导流杂交法克服了上述确定。本研究发现，感染率高的五种高危性HPV依次是:HPV16.HPV58.HPV33、HPV52、HPV68与目前国内一些报道基本一致。另外在年龄上有两个感染高峰<35岁和>51岁，在年轻女性中HPV感染多是一过性的，且低危型多见，多为孕龄妇女，大于51岁年龄妇女宫颈疾病的发病率明显提高，更有发生肿瘤的危险，所以应当开展HPV常规筛查，定时跟踪检测。

参考文献

[1]张学东，何春年.人乳头瘤病毒与子宫颈癌的研究进展[J].国外医学妇产科手册，2006，33（2），113-116.

[2]陶平平，欧华.卞美璐等导流杂交基因芯片技术与人乳头状瘤病毒检测中应用的研究[J]中华妇产科杂志2006,41（1）,43-47.