“通腑汤”对腹部术后大鼠血清一氧化氮影响的实验研究

“通腑汤”对腹部术后大鼠血清一氧化氮影响的实验研究

霍焱孟宪萌

霍焱孟宪萌

（辽宁中医药大学/<研究生学院.2011年级.中西医结合外科专业研究生>辽宁沈阳110034）

【摘要】目的:探讨“通腑汤”对腹部术后大鼠血清一氧化氮的影响。方法:复制结肠吻合大鼠模型,造模大鼠随机分成空白对照组，通腑汤组。观察各组大鼠血清一氧化氮指标。结果:通腑汤组与空白对照组比较,血清一氧化氮含量降低(P<0.05)。结论：“通腑汤”降低腹部术后大鼠血清一氧化氮含量可能是其恢复术后胃肠功能的机理之一。

【关键词】“通腑汤”腹部术后胃肠动力一氧化氮

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）15-0009-02

中药汤剂“通腑汤”是在临床经验方，临床已证实其具有较好的通腹行气、活血止痛功效。本实验通过观察“通腑汤”对腹部术后大鼠血清一氧化氮影响影响，以期通过实验研究进一步明确促进胃肠功能恢复的作用机制。

1材料与方法

1.1实验动物清洁级雄性wistar大鼠30只，体重(200士20)g，由辽宁中医药大学附属二院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（吉）-2011-0004。分笼饲养，明暗各12小时，自由摄食、饮水，温度24±2℃，湿度40%－50%。

1.2随机分组将30只SD大鼠编号按随机数字标法分为2组，15只/组；空白对照组组，通腑汤组。

1.3实验药物

“通腑汤”（大黄（后下）6g，枳壳12g，丹参6g，厚朴12g，）原料药物均一次性购于辽宁中医药大学附属医院中药局，由辽宁中医药大学附属医院煎药局制备。给药前，按方剂组成比例煎制成浓度为0.72g生药/ml的药液250ml（实验组依据人和鼠给药剂量换算公式[1]dB=dA/RB(WA/wB)1/3），置于4℃冰箱内保存备用;20%氨基甲酸乙酯0.5ml/kg.

1.4试剂仪器

NO试剂盒（美国MD公司，批号：201205）；GC-1500γ放射免疫计数器(中国科大中佳公司)；电子天平(G&GT200型电子天平，美国双杰兄弟集团有限公司)；Mettler-ToleDOAL104型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；低温离心机(Eppendorf5407，德国汉堡)；酶标仪(2010，奥地利安托斯仪器公司)；50ml量筒。

1.5模型复制

结肠吻合模型的复制[2]术前禁食禁水12h，20%氨基甲酸乙酯按0.5ml/kg行腹腔注射麻醉。仰卧位固定，常规备皮、消毒、铺无菌巾，于下腹部正中逐层入腹，切口长约2cm,寻找到大鼠盲肠远端2cm处结肠，切断后行原位缝合(一层缝合法)，用连续缝合法缝合腹膜及肌层，再用间断缝合法缝合大鼠皮肤。

1.6干预方法手术当天禁食禁水，术后第1、2天流质饮食(空白对照组：温水4.5ml/kg灌胃，通腑汤组：通腑汤0.72g/ml,4.5ml/kg灌胃)均为每日一次，共3天。

1.7标本采集末次给药24小时后腹主动脉采血2ml/只。

1.8观测指标

观察大鼠血清NO含量的变化

用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定NO值。

1.9统计分析采用SPSS15.0统计软件，计量资料采用均值±标准差（x-±S）表示，组间比较采用方差分析和两样本均数比较的t检验。

2结果

2.1血清NO含量

与空白组比较，通腑汤组大鼠血清NO含量显著降低（P＜0.05）见表1。

注：与空白组比较，▲P＜0.05

3讨论

现代医学对腹部术后胃肠功能紊乱的发病机制研究认为可能与胃肠动力异常、胃肠激素、受体改变以及精神等因素相关。胃肠动力障碍受神经系统和局部胃肠激素等多种因素调节。胃肠激素包括胃动素（MTL，mtlilin）胃泌素（GAS，gastrin）胃促生长素(Ghrelin)生长抑素(SS，Somatostatin)血管活性肠肽（VIP，vasoactiveintestinalpeptide）等。同时胃肠可分泌一氧化氮(NO)和5-羟色胺(5-HT3)等神经递质，前者抑制胃肠动力，后者相反。一氧化氮为非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经抑制性神经递质，对胃肠平滑肌具有广泛的调节作用,由一氧化氮合酶(NOS)催化生成，在哺乳动物和人的整个消化道内都有NO阳性神经元的分布。对全消化道平滑肌均有舒张作用，且对MMc也有影响。食物进入胃腔后引起胃容受性舒张的生理反射也是由NO介导的。一氧化氮能使胃排空延迟，降低胃窦动力[3]。其外周血含量变化与患者胃排空延迟关系密切，NO增多抑制胃排空，抑制肠蠕动[4]。

中医认为：“脾”、“胃”功能与胃肠动力关系密切。脾胃为升降之枢纽，升降相因，则水谷精微得化，气血生化有源，脏腑功则正常；升降失常,势必导致中焦气机壅滞，升降逆乱。胃肠道传化糟粕无力，不能“分清泌浊”，使糟粕久居肠道，积而化热，热蒸津亏，糟粕愈加燥结不行。腹部手术因元气受损，气虚血行不利，导致血脉瘀阻，气机不畅；瘀血留置，可致肠道气血瘀闭，使机体气机升降失常，疏泄失职。胃肠功能以通为顺，滞塞上逆则发病，淤滞引起肠腑通降失调，大便不通,逐成梗阻。治以通里攻下，行气化淤，润肠通便。

“通腑汤”由大黄、枳壳、厚朴、丹参组成。本方以行气通便为主兼以止痛、活血化瘀。方中配以大黄攻积导滞、泄热通畅、凉血解毒、逐淤通经之功效，为君药；因积滞内阻，腑气不通，故而用枳壳、厚朴为臣以行气散结，除胀消气；助大黄荡涤积滞以促进通腹行气；佐以丹参活血化瘀，使气血通畅，瘀血去则疼痛止；诸药合用，以达到通腹行气、行气化淤、润肠通便、活血止痛之功。现代药理研究证明：大黄则可促进胃肠道平滑肌电活动，亦能够抑制一氧化氮(NO)抑制过度的炎性反应，从而促进肠道蠕动[5]。厚朴可升高胃底平滑肌张力,加速胃蠕动,提高血浆MOT水平有关。枳壳能增强胃肠节律性蠕动。丹参能改善微循环，有增加组织耐缺氧能力，亦具有抗炎抑菌作用，有利于肠功能的恢复。

本实验表明“通腑汤”能够显著降低结肠吻合模型大鼠血清一氧化氮含量，具有统计学意义。因此，我们认为“通腑汤”的主要成分具有的调节和促进胃肠的运动功能，有可能是通过调节胃肠肽类激素和NO、5-HT3的平衡来实现的。

参考文献

[1]孙敬方.动物实验方法学「M].北京:人民卫生出版社，2001:357

[2]刘少杰,杨小红,刘建伟.外用芒硝促进大鼠腹部手术后胃肠运动的实验研究[J].广东医学,2006,27(7)：958.

[3]石灯汉等.NO与功能性消化不良的相关性研究[J].浙江中医药大学学报2009，33（3）443，444.

[4]赵芹，林爱华等.功能性消化不良与MTL，NO，SP和55的关系[J].中国现代医学杂志，2004，14(11)：136-137

[5]张骏，翁福海，李会强等.大黄素对内毒素刺激下大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-a及NO的影响[J].天津医科大学学报，2001，7(2)：189-191